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小麦粒重基因TaGW2的克隆、原核表达及分子标记的开发

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小麦粒重基因TaGW2的克隆、原核表达及分子标记的开发
论文目录
 
摘要第1-7页
ABSTRACT第7-12页
第一章 综述第12-29页
  · 小麦基因克隆的概况第12-14页
    · 小麦基因克隆的方法第12-13页
    · 小麦重要基因的克隆第13-14页
  · 小麦产量性状的遗传研究第14-17页
    · 小麦产量性状的构成因素第14-15页
    · 小麦粒型与粒重的 QTL 分析第15-17页
  · 作物产量性状相关 QTL 的分离第17-21页
  · 分子标记概述第21-23页
  · 等位基因特异性 PCR(AS-PCR)第23-27页
  · 本研究的目的及意义第27-28页
  · 本研究的技术路线图第28-29页
第二章 小麦粒重基因 TaGW2 的克隆与原核表达第29-50页
  引言第29页
  · 实验材料与仪器第29-30页
    · 植物材料第29页
    · 菌株、试剂第29页
    · 仪器设备第29页
    · 引物设计与合成第29-30页
  · 小麦粒重基因 TaGW2 的克隆第30-35页
    · 基因组 DNA 的提取第30-31页
      · CTAB 提取液的配制第31页
      · DNA 的提取第31页
    · 小麦总 RNA 提取第31-32页
      · 实验前准备第31页
      · RNA 抽提步骤(Trizol 法):第31-32页
      · 操作中应该注意的事项第32页
    · RT-PCR 扩增小麦全长 cDNA第32-33页
      · cDNA 第一链合成第32-33页
      · 全长 cDNA 扩增第33页
    · 全长 cDNA 的克隆第33-35页
      · 目的片段的回收纯化第33-34页
      · 目的片段与 T 载体连接第34页
      · 大肠杆菌 DH5a 感受态的制备(CaCl2 法)第34页
      · 连接产物的转化第34-35页
      · 阳性克隆的筛选与测序第35页
      · 序列分析第35页
  · 小麦粒重基因 TaGW2 的原核表达第35-38页
    · PCR 扩增第35页
    · 连接 T 载体,转化大肠杆菌感受态,涂板,蓝白斑筛选阳性克隆第35页
    · 抽提重组 T 质粒(碱裂解法)第35-36页
    · 双酶切回收第36页
    · PET 载体连接第36-37页
    · 连接产物转化 DH5a第37页
    · 挑取阳性菌落,抽提表达重组质粒,转化 DE3 表达菌株第37页
    · TPTG 诱导重组菌的表达第37-38页
    · 聚丙烯酰胺凝胶电泳检测第38页
  · 小麦粒重基因 TaGW2 内含子的克隆第38页
  · 结果与分析第38-48页
    · 小麦总 RNA 的提取第38-39页
    · 目的片段的 PCR 扩增第39-40页
    · 目的基因测序结果第40-43页
    · TaGW2 基因的结构和功能预测第43-44页
    · TaGW2 基因突变位点的发现第44-46页
    · 突变 TaGW2 等位基因原核表达载体的构建及重组子鉴定第46页
    · 目的基因表达产物的 SDS-PAGE 分析第46-47页
    · 目的基因内含子的克隆第47-48页
  · 讨论第48-50页
第三章 小麦粒重基因 TaGW2 分子标记的开发与应用第50-64页
  引言第50页
  · 实验材料第50页
  · 小麦粒重基因 TaGW2 的 AS-PCR 引物设计第50-52页
  · 小麦粒重基因 TaGW2 的 AS-PCR 标记应用第52-53页
    · 基因组 DNA 的提取第52页
    · AS-PCR 标记的筛选第52页
    · 突变位点染色体定位第52页
    · F2 群体基因型检测第52页
    · 关联分析第52页
    · TaGW2 基因染色体上的初定位第52页
    · AS-PCR 标记在其它品种中的应用第52-53页
    · 对 AS-PCR 标记的验证第53页
  · 结果与分析第53-62页
    · AS-PCR 标记的筛选第53页
    · 突变位点染色体定位第53-54页
    · F2 群体基因型检测第54页
    · 关联分析第54-58页
    · TaGW2 突变等位基因在染色体上的初步定位第58页
    · AS-PCR 标记在其它品种中的应用第58-60页
    · 对 AS-PCR 标记的验证第60-62页
  · 讨论第62-64页
第四章 结论第64-66页
参考文献第66-74页
致谢第74-75页
作者简介第75页

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