论文目录 | |
| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-22页 |
| 1 板栗疫病与板栗疫病菌 | 第10-11页 |
| 1.1 板栗疫病 | 第10页 |
| 1.2 板栗疫病菌 | 第10-11页 |
| 2 低毒病毒-板栗疫病菌系统 | 第11-13页 |
| 2.1 低毒病毒 | 第11-12页 |
| 2.2 低毒病毒-板栗疫病菌系统 | 第12-13页 |
| 3 细胞自噬 | 第13-18页 |
| 3.1 细胞自噬概述 | 第13-14页 |
| 3.2 关于自噬蛋白结构的研究进展 | 第14-16页 |
| 3.3 关于Atg8家族蛋白的研究进展 | 第16-18页 |
| 4 关于荧光蛋白的研究进展 | 第18-21页 |
| 5 本研究的目的与意义 | 第21-22页 |
| 第二章 材料与方法 | 第22-31页 |
| 1 菌种 | 第22-23页 |
| 1.1 细菌菌种 | 第22页 |
| 1.2 真菌菌种 | 第22页 |
| 1.3 质粒 | 第22-23页 |
| 2 培养基及培养条件 | 第23页 |
| 2.1 培养大肠杆菌的培养基及培养条件 | 第23页 |
| 2.2 培养板栗疫病菌的培养基及培养条件 | 第23页 |
| 3 抗生素及使用浓度 | 第23-24页 |
| 4 质粒的小规模提取 | 第24页 |
| 5 PCR反应 | 第24-25页 |
| 6 质粒DNA或目的DNA片段的酶切 | 第25页 |
| 7 DNA片段的回收 | 第25-26页 |
| 8 DNA连接反应 | 第26页 |
| 9 大肠杆菌感受态的制备 | 第26-27页 |
| 10 DNA转化 | 第27页 |
| 11 板栗疫病菌真菌转化 | 第27-29页 |
| 11.1 真菌原生质体的制备 | 第27-28页 |
| 11.2 真菌原生质体的转化 | 第28-29页 |
| 12 转化株的抗性筛选及单孢分离 | 第29页 |
| 12.1 转化株的抗性筛选 | 第29页 |
| 12.2 转化株的单孢分离 | 第29页 |
| 13 板栗疫病菌总DNA的提取 | 第29-30页 |
| 14 转化株的表型观察 | 第30页 |
| 15 转化株的荧光显微镜观察 | 第30-31页 |
| 第三章 结果与分析 | 第31-49页 |
| 1 pCPXG418-RFP质粒载体的构建 | 第31-35页 |
| 1.1 PCR扩增rfp基因 | 第32页 |
| 1.2 pCPXG418 -RFP重组质粒载体的双酶切验证 | 第32-33页 |
| 1.3 rfp的序列比对 | 第33-35页 |
| 2 pCPXG418 -atg8-RFP质粒载体的构建 | 第35-40页 |
| 2.1 atg8的序列分析及其氨基酸的同源比对 | 第36-37页 |
| 2.2 PCR扩增cpatg8基因 | 第37页 |
| 2.3 pCPXG418 -atg8-RFP重组质粒载体的双酶切验证 | 第37-38页 |
| 2.4 atg的序列比对 | 第38-40页 |
| 3 pCPXG418-atg8-RFP/pCPXHY_2-p40-GFP表型观察及荧光观察 | 第40-43页 |
| 3.1 pCPXG418-atg8-RFP/pCPXHY_2-p40-GFP的PCR鉴定 | 第40-41页 |
| 3.2 pCPXG418-atg8-RFP/pCPXHY_2-p40-GFP的表型观察 | 第41页 |
| 3.3 pCPXG418-atg8-RFP/pCPXHY_2-p40-GFP的荧光定位观察 | 第41-43页 |
| 4 pCPXG418-atg8-RFP/pCPXHY_2-p48-GFP表型观察及荧光观察 | 第43-46页 |
| 4.1 pCPXG418-atg8-RFP/pCPXHY_2-p48-GFP的PCR鉴定 | 第43-44页 |
| 4.2 pCPXG41 8-atg8-RFP/pCPXHY_2-p48-GFP的表型观察 | 第44页 |
| 4.3 pCPXG41 8-atg8-RFP/pCPXHY_2-p48-GFP的荧光定位观察 | 第44-46页 |
| 5 pCPXG418-atg8-RFP/pCPXHY_2-hel-GFP表型观察及荧光观察 | 第46-49页 |
| 5.1 pCPXG418-atg8-RFP/pCPXHY_2-hel-GFP的PCR鉴定 | 第46-47页 |
| 5.2 pCPXG418-atg8-RFP/pCPXHY_2-hel-GFP的表型观察 | 第47页 |
| 5.3 pCPXG418-atg8-RFP/pCPXHY_2-hel-GFP的荧光定位观察 | 第47-49页 |
| 第四章 总结与讨论 | 第49-51页 |
| 参考文献 | 第51-62页 |
| 附录 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 攻读硕士学位期间完成的研究论文 | 第64页 |
