猪流行性腹泻病毒COE抗原表位的原核表达及间接ELISA检测方法的建立

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猪流行性腹泻病毒COE抗原表位的原核表达及间接ELISA检测方法的建立

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猪流行性腹泻病毒COE抗原表位的原核表达及间接ELISA检测方法的建立

论文目录
中文摘要	第1-5页
Abstract	第5-12页
主要符号列表	第12-13页
文献综述	第13-24页
1 引言	第24-25页
2 材料与方法	第25-40页
· 材料	第25页
· 病料来源	第25页
· 菌株、质粒与载体	第25页
· 阴性血清及阳性血清	第25页
· 主要试剂及试剂盒	第25页
· 主要试验仪器	第25页
· 主要培养基及溶液的配制	第25-29页
· 主要培养基	第25-26页
· SDS-PAGE 检测所需溶液	第26-27页
· 蛋白诱导表达及提纯所需溶液	第27-28页
· Western-blot 试验所用溶液	第28-29页
· ELISA 试验所用溶液	第29页
· COE 抗原表位的遗传变异分析	第29-33页
· COE 抗原表位的扩增	第29-30页
· COE 抗原表位的克隆与鉴定	第30-33页
· COE 抗原表位的原核表达及免疫原性分析	第33-36页
· 重组质粒 pET-32α-COE 的构建	第33-34页
· 重组质粒的诱导表达及初步鉴定	第34页
· 重组蛋白诱导条件的优化	第34-35页
· 重组蛋白的细胞定位分析	第35页
· 重组蛋白的纯化	第35页
· 免疫印迹分析	第35-36页
· 间接 ELISA 检测方法的建立	第36-40页
· 抗原包被浓度及一抗稀释度的确定	第36-37页
· 抗原包被条件的确定	第37页
· 封闭时间的确定	第37页
· 一抗作用时间的确定	第37页
· 二抗稀释度的确定	第37页
· 二抗作用时间的确定	第37-38页
· 显色时间的确定	第38页
· 临界值的确定	第38页
· 特异性的检验	第38页
· 敏感性的检验	第38页
· 重复性的检验	第38-39页
· 符合率的检验	第39-40页
3 结果与分析	第40-54页
· COE 抗原表位的 PCR 扩增	第40页
· COE 抗原表位的克隆与鉴定	第40页
· COE 抗原表位的遗传变异分析	第40-42页
· 重组表达质粒 pET-32α-COE 的鉴定	第42-43页
· 重组表达质粒的 PCR 鉴定	第42页
· 重组表达质粒的双酶切鉴定	第42-43页
· 重组表达质粒的测序鉴定	第43页
· 重组蛋白的诱导表达、鉴定及纯化	第43-45页
· 重组蛋白的初步表达鉴定	第43页
· 重组蛋白诱导条件的优化	第43页
· 重组蛋白的细胞定位分析	第43页
· 重组蛋白纯化分析及含量测定	第43-44页
· 重组蛋白免疫印迹分析	第44-45页
· 间接 ELISA 检测方法的建立	第45-54页
· 抗原最佳包被浓度及一抗最佳稀释度的确定	第45页
· 抗原最佳包被条件的确定	第45页
· 最佳封闭时间的确定	第45页
· 一抗最佳作用时间的确定	第45页
· 二抗最佳稀释度的确定	第45-46页
· 二抗最佳作用时间的确定	第46页
· 最佳显色时间的确定	第46-48页
· 临界值的确定	第48-49页
· 特异性的检验	第49页
· 敏感性的检验	第49-51页
· 重复性的检验	第51-52页
· 符合率的检验	第52-54页
4 讨论	第54-57页
· 目的基因的选择	第54页
· 目的蛋白的原核表达	第54页
· 原核表达条件的优化	第54-55页
· 重组蛋白的纯化	第55页
· 重组蛋白的免疫印迹分析	第55-56页
· 间接 ELISA 方法条件的优化	第56页
· 间接 ELISA 方法判定标准的确定	第56-57页
全文结论	第57-58页
参考文献	第58-65页
致谢	第65-66页
作者简介	第66页
在读期间发表的论文	第66 页

本篇论文共66页，点击这进入下载页面。

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