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大肠杆菌中5-氨基酮戊酸合酶(ALAS)系列新型融合表达载体的构建、表达及纯化
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大肠杆菌中5-氨基酮戊酸合酶(ALAS)系列新型融合表达载体的构建、表达及纯化
论文目录
摘要
第1-5 页
Abstract
第5-9 页
文献综述
第9-14 页
1 5-氨基酮戊酸的合成及生物学意义
第9 页
2 5-氨基酮戊酸合酶研究进展
第9-12 页
3 融合表达系统的研究进展
第12-14 页
引言
第14-15 页
1 实验研究意义
第14 页
2 实验的研究内容
第14 页
3 实验的技术路线
第14-15 页
材料与方法
第15-29 页
1 试验材料
第15 页
2 仪器设备与试剂
第15 页
· 主要仪器设备
第15 页
· 主要试剂
第15 页
3 方法
第15-29 页
· 酿酒酵母基因组DNA的提取
第15-16 页
· hem1基因的PCR扩增
第16-17 页
· 表达载体的构建
第17-26 页
· 表达载体pET-HMA的构建
第17-23 页
· 表达载体pET-HGA的构建
第23-24 页
· DHFR基因的PCR扩增
第24-25 页
· 表达载体pET-HDA的构建
第25-26 页
· 表达载体pET-HGA外源基因的诱导表达与纯化
第26-28 页
· 表达载体pET-HMA外源基因的诱导表达
第26 页
· 外源基因诱导表达产物的纯化
第26-27 页
· 外源基因所编码的融合蛋白的SDS-PAGE析
第27-28 页
· 表达载体pET-HGA外源基因的诱导表达与纯化
第28 页
· 表达载体pET-HDA外源基因的诱导表达与纯化
第28-29 页
结果与分析
第29-35 页
1 ALAS和DHFR基因的克隆
第29-30 页
2 融合表达质粒的构建
第30-32 页
· 重组质粒pET-HMA的构建
第30-31 页
· 重组质粒pET-HGA的构建
第31 页
· 重组质粒pET-HDA的构建
第31-32 页
3 融合表达蛋白的纯化与分析
第32-35 页
· MBP/ALAS融合蛋白的表达和纯化分析
第32-33 页
· GST/ALAS融合蛋白的表达和纯化分析
第33-34 页
· DHFR/ALAS融合蛋白的表达和纯化分析
第34-35 页
讨论
第35-38 页
·原核表达载体及可溶标签的选择
第35-36 页
·-氨基酮戊酸合酶的原核表达和调控
第36-37 页
·不同可溶标签对表达5-氨基酮戊酸合酶的影响
第37-38 页
结论
第38-39 页
参考文献
第39-45 页
致谢
第45-46 页
作者简介
第46-47 页
附图
第47-50页
本篇论文共
50
页,
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。
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