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重组人DNase Ⅰ在大肠杆菌中的表达与分离纯化

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重组人DNase Ⅰ在大肠杆菌中的表达与分离纯化
论文目录
 
摘要第1-6 页
ABSTRACT第6-12 页
第一章 绪论第12-28 页
  · DNase Ⅰ简介第12-17 页
    · DNase Ⅰ的蛋白质化学与结构第12-13 页
    · DNase Ⅰ编码基因及表达第13-15 页
    · DNase Ⅰ的功能第15 页
    · DNase Ⅰ的临床应用第15-17 页
  · DNase Ⅰ的生产方法第17-18 页
    · 天然提取法第17-18 页
    · 基因工程方法第18 页
  · DNase Ⅰ前景展望第18-19 页
  · 大肠杆菌表达系统简介第19-24 页
    · 用大肠杆菌进行基因表达的一般策略第19 页
    · 影响基因重组蛋白质在大肠杆菌中表达的因素第19-21 页
    · 宿主的选择和培养条件的控制第21 页
    · 外源蛋白在大肠杆菌中的表达形式第21-24 页
  · 重组蛋白下游纯化技术第24-28 页
    · 层析方法的选择第24-25 页
    · 离子交换层析第25 页
    · 凝胶过滤层析第25-26 页
    · 其他方法第26-28 页
第二章 人DNase Ⅰ基因的克隆第28-38 页
  · 引言第28 页
  · 实验材料与仪器第28-29 页
    · 实验材料第28 页
    · 实验仪器第28-29 页
  · 实验方法第29-34 页
    · 引物设计及合成第29-30 页
    · PCR扩增第30-31 页
    · PCR产物回收(试剂盒)第31 页
    · 连接第31-32 页
    · 感受态细胞的制备(氯化钙法)第32 页
    · 转化第32 页
    · 质粒提取(碱裂解法)第32-33 页
    · 酶切鉴定第33 页
    · 基因测序鉴定第33 页
    · 表达载体pET-22b-hDNASE的构建第33-34 页
  · 结果分析与讨论第34-37 页
    · PCR产物琼脂糖凝胶电泳第34 页
    · 酶切鉴定第34-35 页
    · 测序鉴定第35-36 页
    · 表达载体pET-22b-hDNASE图谱第36-37 页
  · 本章小结第37-38 页
第三章 重组人DNase Ⅰ基因工程菌培养条件的优化第38-52 页
  · 引言第38 页
  · 试验材料与仪器第38-39 页
    · 试验材料第38-39 页
    · 实验仪器第39 页
  · 实验方法第39-40 页
    · 菌种活化第39 页
    · 菌种培养第39-40 页
    · 不同菌种的选择第40 页
  · 发酵过程各因素的影响第40-41 页
    · 培养时间对基因工程菌生长的影响第40 页
    · 诱导条件的影响第40-41 页
  · 分析方法第41 页
    · 菌体浓度的测定第41 页
    · SDS-PAGE分析目的蛋白表达量第41 页
  · 结果与讨论第41-50 页
    · 不同菌种融合蛋白表达量分析第41-43 页
    · 基因工程菌的生长第43 页
    · 不同诱导条件对融合蛋白表达量的影响第43-50 页
  · 小结第50-52 页
第四章 重组人DNase Ⅰ的分离与纯化第52-62 页
  · 引言第52 页
  · 实验材料和仪器第52-53 页
    · 实验材料第52 页
    · 实验仪器第52-53 页
  · 实验方法第53-55 页
    · 融合蛋白在大肠杆菌Rosetta(DE3)内的分布第53-54 页
    · 两种诱导条件下重组蛋白的分离与纯化第54-55 页
    · LC-ESI-MS/MS鉴定rhDNase Ⅰ第55 页
  · 分析方法第55-56 页
    · SDS-PAGE凝胶电泳第55 页
    · 蛋白浓度的测定第55 页
    · DNase Ⅰ酶活测定第55-56 页
  · 结果与分析第56-59 页
    · 融合蛋白在菌体中的分布第56-57 页
    · 融合蛋白的分离纯化第57-58 页
    · LC-ESI-MS/MS鉴定rhDNase Ⅰ第58-59 页
  · 小结第59-62 页
第五章 结论与建议第62-64 页
  · 结论第62-63 页
  · 建议第63-64 页
参考文献第64-68 页
附录第68-72 页
致谢第72-74 页
研究成果及发表的学术论文第74-75 页
作者和导师简介第75-76 页
北京化工大学硕士研究生学位论文答辩委员会决议书第76-77页

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