论文目录 | |
| 摘要 | 第1-9
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| ABSTRACT | 第9-11
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| 第一章 前言 | 第11-33
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| · 生物界分类、超嗜热古菌及SULFOLOBUS TOKODAII STR.7简介 | 第11-13
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| · 生物分类及超嗜热古菌概述 | 第11-12
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| · Sulfolobus tokodaii Str.7 | 第12-13
页 |
| · 古菌的基因组特征及超嗜热古菌对研究DNA代谢的意义 | 第13-14
页 |
| · 古菌的基因组特征 | 第13-14
页 |
| · 超嗜热菌对研究DNA代谢的意义 | 第14
页 |
| · 超嗜热古菌中的DNA复制、重组和修复相关蛋白的研究现状 | 第14-23
页 |
| · DNA复制相关蛋白 | 第14-18
页 |
| · 古菌中DNA重组相关蛋白的研究 | 第18-19
页 |
| · 古菌中的DNA修复 | 第19-20
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| · DNA修复及其与复制重组的关系以及重组修复的概念 | 第20
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| · 细胞中的复制叉停滞、修复与复制叉再启动 | 第20-23
页 |
| · 各种解旋酶及其在生物体内的功能 | 第23-32
页 |
| · 什么是解旋酶 | 第23
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| · 解旋酶的分类 | 第23-24
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| · DEXD box DNA解旋酶 | 第24-25
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| · 解旋酶的作用机制 | 第25-28
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| · 目前已广泛研究的解旋酶 | 第28-32
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| · 本试验的立题依据和基本思路 | 第32-33
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| · 立题依据 | 第32
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| · 基本思路 | 第32-33
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| 第二章 DNA解旋酶ST0590、ST0147和PCNA三个亚基基因的克隆和蛋白的表达纯化 | 第33-41
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| 引言 | 第33
页 |
| · 实验材料和试剂 | 第33
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| · 实验材料 | 第33
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| · 试剂及仪器 | 第33
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| · 实验方法和操作步骤 | 第33-38
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| · 目的基因的克隆 | 第33-37
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| · 蛋白表达及纯化 | 第37-38
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| · 结果 | 第38-40
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| · 基因克隆 | 第38-40
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| · 蛋白表达纯化 | 第40
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| 小结 | 第40-41
页 |
| 第三章 DNA解旋酶ST0147的性质研究 | 第41-65
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| 引言 | 第41-42
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| · 实验材料和试剂 | 第42
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| · 实验方法和操作步骤 | 第42-47
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| · DNA底物制备 | 第42-44
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| · DNA结合实验的检测原理及过程 | 第44
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| · ATPase活性检测原理及过程 | 第44-45
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| · 解旋酶活性检测原理及过程 | 第45-46
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| · 退火活性和复制叉退回活性检测原理及过程 | 第46-47
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| · 结果与讨论 | 第47-63
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| · DNA结合试验和ATPase活性检测 | 第47-51
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| · 解旋酶活性依赖于ATP | 第51
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| · ST0147的解链活性可以不同程度的被PCNA亚基激活 | 第51-54
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| · ST0147对复制叉母链和新生链解链活性的比较 | 第54-57
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| · ST0147解链极性检测 | 第57-59
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| · 退火活性检测 | 第59-61
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| · 复制叉退回活性检测 | 第61-63
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| · 小结 | 第63-65
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| 第四章 DNA解旋酶ST0590的性质研究 | 第65-75
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| 引言 | 第65
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| · 材料方法及实验原理 | 第65
页 |
| · 结果与讨论 | 第65-74
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| · ST0590 ATPase活性检测 | 第65-66
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| · ST0590的解旋酶活性依赖于ATP | 第66
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| · ST0590的解链活性可以被Mg~(2+)激活 | 第66-67
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| · ST0590的解链活性可以不同程度的被PCNA亚基激活 | 第67-69
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| · ST0590对复制叉母链和新生链解链活性的比较 | 第69-70
页 |
| · ST0590在复制叉处对两条新生链的解链强度一致 | 第70-71
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| · 极性测定显示ST0590没有明显的解链极性 | 第71
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| · 退火活性检测 | 第71-74
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| · 小结 | 第74-75
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| 第五章 总结与展望 | 第75-77
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| · 总结 | 第75-76
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| · 展望 | 第76-77
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| 参考文献 | 第77-91
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| 附1:本文所使用的仪器及试剂 | 第91-92
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| 附2:本文所涉及的基因序列代码 | 第92-93
页 |
| 附3:本文所涉及的蛋白序列代码 | 第93-94
页 |
| 附4:本文所涉及的培养基 | 第94-95
页 |
| 附5:用于PCR扩增的引物序列 | 第95-96
页 |
| 附6:PCR扩增及双酶切的体系 | 第96-98
页 |
| 附7:标记寡核苷酸体系 | 第98-100
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| 致谢 | 第100-101
页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第101-102
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| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第102
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