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梭菌氢酶基因hyd的同源克隆、原核表达以及敲除载体的构建

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梭菌氢酶基因hyd的同源克隆、原核表达以及敲除载体的构建
论文目录
 
摘要第1-6页
ABSTRACT第6-11页
第一章 绪论第11-19页
  · 氢酶的研究现状第11-13页
    · 氢酶的分类第11页
    · 氢酶的结构第11-12页
    · 氢酶基因的克隆与表达第12-13页
  · 产氢菌第13-14页
    · 产氢菌的分类第13页
    · 生物制氢的研究第13-14页
  · 梭菌氢酶的研究第14-16页
  · 铁还原菌研究进展第16-17页
    · 铁还原菌概述第16页
    · 异化铁还原的意义第16页
    · 异化铁还原机制研究进展第16-17页
  · 基因失活的研究方法第17-18页
  · 选题依据第18-19页
    · 背景简介第18页
    · 研究内容第18-19页
第二章 菌株鉴定第19-25页
  · 实验材料第19页
    · 菌株与质粒第19页
    · 主要试剂第19页
  · 实验方法第19-22页
    · 基因组 DNA 提取第19-20页
    · 16S rDNA 的扩增第20页
    · 回收纯化第20页
    · 连接与转化第20-21页
    · 检测与测序第21-22页
    · 构建系统发育树第22页
  · 结果与分析第22-24页
    · 总 DNA 的提取第22页
    · 16S rDNA 的 PCR 扩增第22页
    · 菌落 PCR 检测第22-23页
    · 测序结果第23-24页
  · 小结第24-25页
第三章 氢酶基因的同源克隆及序列分析第25-30页
  · 实验材料第25页
    · 菌株与质粒第25页
    · 主要试剂第25页
  · 实验方法第25-26页
    · 引物设计第25页
    · 氢酶基因(hyd)部分序列的同源克隆第25-26页
    · 序列分析第26页
  · 结果与分析第26-28页
    · hyd 基因部分序列扩增结果第26页
    · hyd 基因片段序列分析第26-27页
    · hyd 基因片段的系统发育分析第27-28页
    · hyd 基因片段的分子结构预测第28页
  · 讨论第28-29页
  · 小结第29-30页
第四章 氢酶基因的原核表达第30-40页
  · 实验材料第30页
    · 菌株与质粒第30页
    · 工具酶与试剂第30页
    · 主要实验仪器第30页
  · 实验方法第30-34页
    · 原核表达载体的构建第30-32页
    · 目的基因在大肠杆菌中的表达第32-34页
    · 目的蛋白诱导表达条件的优化第34页
    · 可溶性表达分析第34页
  · 结果与分析第34-38页
    · 氢酶基因部分片段的扩增第34-35页
    · 重组表达质粒双酶切鉴定第35-36页
    · 重组表达片段的分子量预测图第36页
    · 目的蛋白表达检测第36-37页
    · 诱导条件优化第37-38页
    · 可溶性分析检测第38页
  · 讨论第38-39页
  · 小结第39-40页
第五章 氢酶基因敲除载体的构建第40-45页
  · 实验材料第40页
    · 菌株与质粒第40页
    · 主要试剂第40页
  · 实验方法第40-42页
    · 5'端同源臂及抗性基因的扩增第40-41页
    · 敲除载体的构建第41-42页
  · 结果与分析第42-43页
    · 同源臂与抗性基因片段的扩增结果第42页
    · 敲除载体构建结果第42-43页
  · 讨论第43页
  · 小结第43-45页
第六章 氢酶基因的相对定量检测第45-54页
  · 实验材料第45页
    · 菌液样品第45页
    · 所用试剂第45页
    · 所用仪器第45页
  · 实验方法第45-48页
    · 菌液样品培养第45-46页
    · 提取 RNA第46-47页
    · cDNA 的合成第47页
    · PCR第47页
    · 相对定量 PCR第47页
    · 结果表示第47-48页
  · 结果与分析第48-51页
    · RNA 的提取第48页
    · cDNA 的常规 PCR 检验第48页
    · 相对定量 PCR 结果第48-49页
    · 相对定量 PCR 数据分析第49-51页
  · 讨论第51-53页
  · 小结第53-54页
第七章 结论与展望第54-55页
  · 结论第54页
  · 展望第54-55页
参考文献第55-59页
致谢第59-60页
作者简介第60页

本篇论文共60页,点击这进入下载页面
 
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