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罗非鱼海豚链球菌疫苗的研制及免疫效果的初步研究
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罗非鱼海豚链球菌疫苗的研制及免疫效果的初步研究
论文目录
 
摘要第1-6 页
ABSTRACT第6-13 页
第一部分 文献综述第13-40 页
　　一、鱼类链球菌病研究进展第13-21 页
　　　　1 病原第13-14 页
　　　　2 形态特征第14-15 页
　　　　3 流行病学第15-16 页
　　　　4 症状和病理变化第16 页
　　　　5 致病机理第16-17 页
　　　　6 诊断方法第17-19 页
　　　　　　· 常规诊断方法第17-18 页
　　　　　　· 自动化检测技术第18 页
　　　　　　· 分子生物学鉴定第18-19 页
　　　　7 疫苗的研究现状第19-21 页
　　二、鱼类疫苗研究的现状第21-32 页
　　　　1 鱼类疫苗的发展历程第21-22 页
　　　　　　· 试验探索期第21 页
　　　　　　· 生产应用期第21-22 页
　　　　　　· 攀登发展期第22 页
　　　　2 疫苗的种类第22-26 页
　　　　　　· 灭活疫苗第22-23 页
　　　　　　· 活疫苗第23 页
　　　　　　· 亚单位疫苗第23-24 页
　　　　　　· 化学疫苗第24 页
　　　　　　· 基因工程疫苗第24 页
　　　　　　· 合成肽疫苗第24-25 页
　　　　　　· DNA疫苗第25-26 页
　　　　3 疫苗的接种途径第26-27 页
　　　　　　· 单一给予方式第26 页
　　　　　　· 混合给予方式第26-27 页
　　　　　　· 多次给予方式第27 页
　　　　4 疫苗免疫效果评价第27-30 页
　　　　　　· 特异性免疫水平的检测第27-28 页
　　　　　　· 非特异性免疫水平的检测第28-29 页
　　　　　　· 免疫保护率(RPS)第29 页
　　　　　　· 免疫保护指数(PI)第29-30 页
　　　　5 鱼用疫苗发展的前景及存在的问题第30-32 页
　　参考文献第32-40 页
第二部分 实验研究第40-85 页
　　研究一 广西罗非鱼链球菌流行菌株的分离鉴定第40-48 页
　　　　1 材料第40-42 页
　　　　　　· 主要试剂第40-41 页
　　　　　　· 溶液的配制第41 页
　　　　　　· 主要仪器第41-42 页
　　　　2 方法第42-43 页
　　　　　　· 采样及细菌培养第42 页
　　　　　　· 细菌的纯化第42 页
　　　　　　· 革兰氏染色第42 页
　　　　　　· 生化鉴定第42 页
　　　　　　· 特异性PCR鉴定第42-43 页
　　　　3 结果第43-46 页
　　　　　　· 分离培养与染色结果第44 页
　　　　　　· 生化鉴定结果第44 页
　　　　　　· PCR鉴定结果第44-46 页
　　　　4 讨论第46-48 页
　　研究二 疫苗候选菌株的筛选和疫苗制备第48-55 页
　　　　1 材料第48-50 页
　　　　　　· 试验鱼以及饲养管理第48-49 页
　　　　　　· 候选菌株第49 页
　　　　　　· 主要试剂第49 页
　　　　　　· 培养基的配制第49 页
　　　　　　· 主要仪器第49-50 页
　　　　2 方法第50-51 页
　　　　　　· 细菌扩大培养第50 页
　　　　　　· 耐受试验第50 页
　　　　　　· 二次攻毒试验第50 页
　　　　　　· 候选菌株半数致死量测定第50-51 页
　　　　　　· 候选菌株灭活条件的研究第51 页
　　　　　　· 疫苗的制备第51 页
　　　　3 结果第51-53 页
　　　　　　· 耐受试验和攻毒试验结果第51-52 页
　　　　　　· S005菌株半数致死量测定第52 页
　　　　　　· 福尔马林对S005灭活试验的结果第52-53 页
　　　　　　· 安全性检测结果第53 页
　　　　4 讨论第53-55 页
　　研究三 罗非鱼对海豚链球菌疫苗产生免疫应答和保护效果的研究第55-77 页
　　　　一、水族箱饲养条件下海豚链球菌疫苗对罗非鱼免疫效果的研究第55-65 页
　　　　　　1 材料第55 页
　　　　　　· 试验动物及日常饲养管理第55 页
　　　　　　· 海豚链球菌灭活疫苗第55-56 页
　　　　　　· 金黄色葡萄球菌悬液第56 页
　　　　　　· 抗菌活力测定菌液第56 页
　　　　　　· ELISA包被抗原第56 页
　　　　　　· 主要试剂第56-57 页
　　　　　　· ELISA检测所用溶液的配制第57-58 页
　　　　　　· 主要仪器第58 页
　　　　　　2 方法第58 页
　　　　　　· 试验分组与处理第58 页
　　　　　　· WBC和DLC的测定第58 页
　　　　　　· 吞噬活性检测第58-59 页
　　　　　　· 血清抗菌活力(Ua)第59 页
　　　　　　· 血清溶菌酶活性(UI)第59-60 页
　　　　　　· 血清抗体水平第60 页
　　　　　　· 攻毒实验第60 页
　　　　　　· 统计学处理第60-61 页
　　　　　　3 结果第61 页
　　　　　　· WBC和DLC的检测结果第61-62 页
　　　　　　· 吞噬活性检测结果第62 页
　　　　　　· 血清抗菌活力(Ua)第62-63 页
　　　　　　· 血清溶菌酶活性(UI)第63-64 页
　　　　　　· 血清抗体水平第64-65 页
　　　　　　· 疫苗的保护效果第65 页
　　　　二、池塘小网箱饲养条件下海豚链球菌疫苗对罗非鱼免疫效果的研究第65 页
　　　　1 材料第65-66 页
　　　　　　· 试验动物及日常饲养管理第65-66 页
　　　　2 方法第66-67 页
　　　　　　· 试验分组与处理第66 页
　　　　　　· 超氧化物歧化酶(SOD)活力第66-67 页
　　　　3 结果第67-72 页
　　　　　　· WBC和DLC的检测结果第67-68 页
　　　　　　· 吞噬活性检测结果第68 页
　　　　　　· 血清抗菌活力(Ua)第68-69 页
　　　　　　· 血清溶菌酶活性(UI)第69 页
　　　　　　· 超氧化物歧化酶(SOD)活力第69-70 页
　　　　　　· 血清抗体水平第70-71 页
　　　　　　· 疫苗的保护效果第71-72 页
　　　　三、网箱小试的免疫保护效果第72 页
　　　　1 材料第72 页
　　　　2 方法第72-73 页
　　　　3 结果第73 页
　　　　四、讨论第73 页
　　　　· 疫苗免疫对罗非鱼细胞免疫功能的影响第73-74 页
　　　　· 疫苗免疫对罗非鱼体液免疫功能的影响第74 页
　　　　· 疫苗免疫对罗非鱼非特异免疫功能的影响第74-75 页
　　　　· 疫苗免疫对罗非鱼抗病能力的影响第75 页
　　　　· 不同免疫途径对罗非鱼免疫功能的影响第75-77 页
　　研究四 罗非鱼血清免疫球蛋白的纯化及分子量的初步分析第77-85 页
　　　　1 材料第77-79 页
　　　　　　· 试验动物第77 页
　　　　　　· 试剂第77-78 页
　　　　　　· SDS-PAGE试剂的配制第78 页
　　　　　　· Western-blot试剂的配制第78-79 页
　　　　　　· 主要仪器第79 页
　　　　2 方法第79-81 页
　　　　　　· 血清制备第79 页
　　　　　　· 饱和硫酸铵分步盐析第79 页
　　　　　　· Sephadex G-200柱层析第79-80 页
　　　　　　· Ig纯化效果的检测第80 页
　　　　　　· 兔抗罗非鱼Ig多克隆抗体的制备第80 页
　　　　　　· 鲟鱼血清Ig的免疫印迹鉴定第80-81 页
　　　　3 结果第81-83 页
　　　　　　· 两种提取方法的SDS-PAGE检测结果第81 页
　　　　　　· 兔抗罗非鱼Ig血清效价ELISA结果第81 页
　　　　　　· 罗非鱼纯化血清Ig结构的初步分析第81-83 页
　　　　4 讨论第83-85 页
参考文献第85-90 页
结论第90-91 页
附图第91-92 页
　　· 罗非鱼发病的病理症状第91 页
　　· 罗非鱼血细胞图片第91-92 页
致谢第92-93 页
个人简历第93 页
攻读硕士期间发表的学术论文、获奖及参加的学术活动情况第93页

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