论文目录 | |
| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-24页 |
| · 干扰素刺激基因ISG15 | 第10-11页 |
| · ISG15蛋白的结构 | 第11页 |
| · ISG15的类泛素化修饰系统 | 第11-13页 |
| · ISG15与细胞内的蛋白 | 第13页 |
| · ISG15及其泛素化修饰系统的抗病毒作用 | 第13-21页 |
| · ISG15与流感病毒 | 第13-16页 |
| · ISG15与辛德毕斯病毒 | 第16页 |
| · ISG15与单纯疱疹病毒 | 第16页 |
| · ISG15与埃博拉病毒 | 第16-17页 |
| · ISG15与乙肝病毒、水泡型口炎病毒、淋巴脉络丛脑炎病毒 | 第17-18页 |
| · ISG15与丙肝病毒 | 第18-19页 |
| · ISG15与日本脑炎病毒 | 第19-20页 |
| · ISG15与冠状病毒 | 第20页 |
| · ISG15与人免疫缺陷病毒 | 第20-21页 |
| · 猪瘟病毒对宿主细胞干扰素途径的调节作用 | 第21-22页 |
| · 本研究的目的与意义 | 第22-24页 |
| 第二章 材料与方法 | 第24-44页 |
| · 实验材料 | 第24-28页 |
| · 主要仪器与设备 | 第24页 |
| · 实验动物 | 第24页 |
| · 实验试剂 | 第24-28页 |
| · 实验方法 | 第28-44页 |
| · 技术路线 | 第28页 |
| · 引物设计 | 第28页 |
| · ISG15基因的克隆 | 第28-32页 |
| · ISG15原核与真核表达载体的构建 | 第32-34页 |
| · ISG15多克隆抗体的制备 | 第34-40页 |
| · ISG15稳定表达细胞系的构建 | 第40-43页 |
| · 感染CSFV的PK-15细胞ISG15的表达状况 | 第43-44页 |
| 第三章 结果与分析 | 第44-58页 |
| · ISG15基因的克隆 | 第44-45页 |
| · ISG15基因原核与真核表达载体的构建 | 第45-46页 |
| · ISG15多克隆抗体的制备 | 第46-52页 |
| · 原核表达载体pGEX-ISG15的表达 | 第46-47页 |
| · ISG15重组蛋白表达形式的鉴定 | 第47页 |
| · ISG15重组蛋白的Ni-NTA树脂亲和纯化 | 第47-48页 |
| · 纯化的ISG15重组蛋白的鉴定 | 第48-49页 |
| · 免疫后的多克隆血清与重组ISG15蛋白的反应性 | 第49-51页 |
| · ISG15多克隆抗体与PK-15细胞中ISG15蛋白的反应性 | 第51-52页 |
| · ISG15稳定表达细胞系的构建 | 第52-55页 |
| · ISG15真核表达载体转染PK-15细胞 | 第52-53页 |
| · IFA鉴定ISG15稳定表达的PK-15细胞系 | 第53-54页 |
| · Western-blot鉴定ISG15稳定表达的PK-15细胞系 | 第54-55页 |
| · CSFV与ISG15相互作用的初步探索 | 第55-58页 |
| · 间接免疫荧光检测PK-15细胞感染CSFV病毒后ISG15的表达状况 | 第55-56页 |
| · Western-blot检测PK-15细胞感染CSFV病毒后ISG15的表达状况 | 第56-58页 |
| 第四章 讨论 | 第58-63页 |
| · ISG15原核表达的策略 | 第58页 |
| · 重组蛋白的纯化 | 第58-60页 |
| · 多克隆抗体的效价 | 第60页 |
| · 稳定表达ISG15蛋白的PK-15细胞系的构建 | 第60页 |
| · CSFV感染PK-15细胞后ISG15表达 | 第60-63页 |
| 第五章 结论 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-71页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
