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注射用小牛血去蛋白提取物对缓解阿尔兹海默症功效的研究

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注射用小牛血去蛋白提取物对缓解阿尔兹海默症功效的研究
论文目录
 
中文摘要第1-6页
Abstract第6-15页
缩略词索引表第15-17页
第1章 绪论第17-29页
  1.1 注射用小牛血去蛋白提取物(DCBEI)第17-20页
    1.1.1 生物药物第17页
    1.1.2 DCBEI概述第17-18页
    1.1.3 DCBEI的作用机制第18-19页
    1.1.4 DCBEI的临床应用第19-20页
  1.2 阿尔兹海默症第20-22页
    1.2.1 神经退行性疾病第20-21页
    1.2.2 阿尔兹海默症第21-22页
  1.3 阿尔兹海默症发病机制的研究进展第22-25页
    1.3.1 胆碱能功能缺损学说第22页
    1.3.2 Aβ沉积及毒性作用学说第22-23页
    1.3.3 磷酸化Tau蛋白学说第23页
    1.3.4 自由基损伤学说第23-24页
    1.3.5 兴奋性氨基酸毒性学说第24页
    1.3.6 炎症反应学说第24-25页
    1.3.7 线粒体缺陷第25页
  1.4 阿尔兹海默症治疗药物现状第25-27页
    1.4.1 改善胆碱系统功能的药物第25-26页
    1.4.2 N-甲基-D-门冬氨酸(NMDA)受体拮抗剂第26页
    1.4.3 神经保护剂第26-27页
    1.4.4 改善脑代谢和脑循环第27页
    1.4.5 银杏叶提取物第27页
  1.5 选题背景及立题意义第27-29页
第2章 实验材料和方法第29-45页
  2.1 实验材料和仪器第29-35页
    2.1.1 实验细胞系第29页
    2.1.2 实验动物第29页
    2.1.3 实验仪器设备第29-31页
    2.1.4 实验试剂第31-32页
    2.1.5 Elisa试剂盒第32-33页
    2.1.6 实验溶液第33-35页
  2.2 实验方法第35-45页
    2.2.1 建立L-Glu诱导的海马神经元凋亡模型并测定细胞活性第35页
    2.2.2 细胞凋亡检测第35页
    2.2.3 细胞内总氧浓度测定第35页
    2.2.4 细胞内活性氧簇(ROS)活性测定第35-36页
    2.2.5 细胞内钙离子浓度分析第36页
    2.2.6 细胞内线粒体膜电位(MMP)检测第36页
    2.2.7 细胞内Caspase凋亡因子测定第36页
    2.2.8 蛋白免疫印迹(Western blot)实验第36-38页
    2.2.9 动物分组及给药第38页
    2.2.10 旷场测试第38-39页
    2.2.11 Morris水迷宫测试第39页
    2.2.12 跳台测试第39-40页
    2.2.13 Y迷宫测试第40页
    2.2.14 样本制备方法第40页
    2.2.15 中枢胆碱能相关指标测定第40页
    2.2.16 氧化应激相关指标测定第40页
    2.2.17 Aβ1-42表达水平检测第40-41页
    2.2.18 组织病理学观察第41页
    2.2.19 免疫组织化学实验第41页
    2.2.20 TUNEL凋亡检测第41-42页
    2.2.21 非标记定量(LFQ,label-free quantification)第42-43页
    2.2.22 小鼠血清神经递质代谢物LC-MS/MS定量第43-44页
    2.2.23 统计分析方法第44-45页
第3章 实验结果第45-71页
  3.1 DCBEI对L-Glu诱导原代海马神经元凋亡的保护功能第45-50页
    3.1.1 DCBEI改善L-Glu诱导的HT22细胞损伤第45页
    3.1.2 DCBEI抑制L-Glu诱导的HT22细胞凋亡第45-46页
    3.1.3 DCBEI减少Caspase家族因子活性第46页
    3.1.4 DCBEI降低细胞内总氧积累第46-47页
    3.1.5 DCBEI降低细胞内ROS积累第47页
    3.1.6 DCBEI改善L-Glu诱导的HT22细胞线粒体功能障碍第47-48页
    3.1.7 DCBEI调节Ca~(2+)超载第48-49页
    3.1.8 DCBEI调节线粒体凋亡第49-50页
  3.2 DCBEI对APP/PS1小鼠脑内Tau蛋白及Aβ沉积的清除作用第50-58页
    3.2.1 DCBEI对APP/PS1小鼠行为学的影响第50-52页
    3.2.2 DCBEI对胆碱能递质的调节作用第52-53页
    3.2.3 DCBEI对APP/PS1小鼠体内氧化应激状态的影响第53页
    3.2.4 DCBEI对APP/PS1小鼠体内Aβ沉积的影响第53-56页
    3.2.5 DCBEI对APP/PS1小鼠海马中Tau蛋白水平的调节第56页
    3.2.6 DCBEI调节海马中的4-羟基壬烯酸(4-NHE)水平第56-57页
    3.2.7 DCBEI降低海马神经元凋亡第57页
    3.2.8 DCBEI对APP/PS1小鼠脏器病理学影响第57-58页
  3.3 蛋白质谱分析第58-62页
    3.3.1 蛋白定量结果第58-59页
    3.3.2 蛋白丰度分布第59页
    3.3.3 定量重复性第59-60页
    3.3.4 蛋白表达差异倍数第60页
    3.3.5 生信分析第60-62页
    3.3.6 蛋白互作第62页
  3.4 代谢组学分析第62-65页
    3.4.1 代谢物标准品XIC图第63页
    3.4.2 稳定性评价第63-65页
    3.4.3 聚类分析第65页
    3.4.4 定量结果第65页
  3.5 蛋白互作网络及结果验证第65-71页
    3.5.1 各蛋白之间作用分析第65-67页
    3.5.2 结果验证第67-71页
第4章 结果讨论第71-75页
第5章 结论与展望第75-77页
  5.1 结论第75-76页
  5.2 展望第76-77页
参考文献第77-82页
作者简介及攻读硕士学位期间发表文章第82-84页
致谢第84页

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