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Sirtuin 3增强小细胞肺癌NCI-H446化疗敏感性的实验研究

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Sirtuin 3增强小细胞肺癌NCI-H446化疗敏感性的实验研究
论文目录
 
前言第1-7页
中文摘要第7-10页
Abstract第10-17页
英文缩写词表第17-18页
第1章 文献综述第18-26页
  1.1 小细胞肺癌的化学治疗第18-20页
    1.1.1 化学治疗第18页
    1.1.2 顺铂的作用机理第18-19页
    1.1.3 p53与化疗抵抗性第19-20页
  1.2 SIRT3与肿瘤第20-22页
    1.2.1 SIRT3概述第20页
    1.2.2 SIRT3的功能第20-21页
    1.2.3 SIRT3与肺癌第21-22页
    1.2.4 SIRT3与p53第22页
  1.3 p53与肿瘤第22-26页
    1.3.1 p53的突变与肿瘤第22-23页
    1.3.2 突变型p53的靶向治疗第23-24页
    1.3.3 突变型p53的乙酰化第24页
    1.3.4 突变型p53的泛素化第24-26页
第2章 材料与方法第26-34页
  2.1 实验材料第26-28页
    2.1.1 实验材料与试剂第26-27页
    2.1.2 细胞第27页
    2.1.3 实验动物第27页
    2.1.4 实验仪器第27-28页
  2.2 实验方法第28-33页
    2.2.1 细胞培养第28页
    2.2.2 MTT确定SIRT3联合顺铂的最佳浓度第28-29页
    2.2.3 流式细胞术检测细胞凋亡第29页
    2.2.4 流式细胞术检测线粒体膜电势第29页
    2.2.5 Western blot检测蛋白表达水平第29-30页
    2.2.6 免疫荧光检测蛋白定位第30-31页
    2.2.7 荧光定量法检测SIRT3去乙酰化活性第31页
    2.2.8 免疫沉淀检测蛋白之间的相互作用第31页
    2.2.9 加入蛋白酶体抑制剂MG132检测突变型p53蛋白表达第31-32页
    2.2.10 裸鼠皮下移植瘤模型建立及治疗第32页
    2.2.11 免疫组织化学检测肿瘤组织中蛋白表达第32-33页
    2.2.12 TUNEL检测肿瘤组织凋亡情况第33页
    2.2.13 Western Blot检测肿瘤组织中蛋白表达第33页
  2.3 统计分析第33-34页
第3章 实验结果第34-45页
  3.1 SIRT3增强小细胞肺癌NCI-H446对顺铂化疗敏感性的体外研究第34-37页
    3.1.1 MTT确定SIRT3联合顺铂的最佳浓度第34-35页
    3.1.2 流式细胞术检测细胞凋亡第35页
    3.1.3 流式细胞术检测线粒体膜电势第35-36页
    3.1.4 Western blot检测凋亡蛋白表达水平变化第36-37页
  3.2 SIRT3去乙酰化突变型p53,增加其泛素酶体降解,促进细胞凋亡第37-41页
    3.2.1 Western blot检测突变型p53蛋白表达水平第37页
    3.2.2 检测过表达SIRT3的NCI-H446细胞中SIRT3蛋白去乙酰化酶活性第37-38页
    3.2.3 免疫荧光确定SIRT3与突变型p53的定位第38-39页
    3.2.4 免疫沉淀检测SIRT3与突变型p53的结合第39-41页
  3.3 SIRT3增强小细胞肺癌NCI-H446对顺铂化疗敏感性的体内研究第41-45页
    3.3.1 SIRT3联合顺铂对裸鼠小细胞肺癌移植瘤的抑制作用第41-42页
    3.3.2 TUNEL检测肿瘤组织凋亡第42-43页
    3.3.3 免疫组织化学检测肿瘤组织中SIRT3及突变型p53的变化第43页
    3.3.4 Western blot检测肿瘤组织中蛋白表达水平变化第43-45页
第4章 讨论第45-49页
第5章 结论第49-50页
参考文献第50-58页
作者简介及在读期间所取得的科研成果第58-59页
致谢第59页

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