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昆虫病原真菌金龟子绿僵菌中性海藻糖酶基因对耐热性的作用研究

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昆虫病原真菌金龟子绿僵菌中性海藻糖酶基因对耐热性的作用研究
论文目录
 
摘要第1-4页
ABSTRACT第4-8页
1 绪论第8-14页
  · 研究背景第8-12页
    · 蝗虫对农业的危害第8页
    · 国内外防蝗治灾的措施第8-9页
    · 绿僵菌杀蝗剂的优缺点第9-10页
    · 海藻糖及真菌海藻糖酶第10-12页
  · 研究目的及意义第12-13页
  · 研究内容和技术路线第13页
  · 本研究的创新性第13-14页
2 金龟子绿僵菌中性海藻糖酶的超表达及RNA 干扰第14-37页
  · 技术路线第14-16页
    · 金龟子绿僵菌中性海藻糖酶的超表达载体构建第14-15页
    · 金龟子绿僵菌中性海藻糖酶的RNA 干扰载体构建第15-16页
    · 超表达载体与干扰载体基因枪法转化金龟子绿僵菌及转化菌株筛选验证第16页
  · 材料和方法第16-28页
    · 试验菌株与质粒第16页
    · 主要试剂第16页
    · 主要溶液配制第16-17页
    · 主要仪器与设备第17页
    · 抗除草剂筛选的超表达载体的构建第17-23页
    · 抗除草剂筛选的RNA 干扰载体的构建第23-24页
    · 金龟子绿僵菌中性海藻糖酶基因全长和RNAi 片段的PCR 扩增和克隆第24-26页
    · 金龟子绿僵菌中性海藻糖酶基因的超表达载体和RNAi 载体的构建第26页
    · 中性海藻糖酶基因超表达载体和RNA 干扰载体转化金龟子绿僵菌分生孢子第26-27页
    · 转化菌株的筛选及鉴定第27-28页
  · 结果与分析第28-33页
    · Bar 基因启动子片段、Bar 基因片段、Bar 基因终止子片段的PCR 扩增、回收纯化及连接和测序第28-29页
    · 金龟子绿僵菌CQMa102 中性海藻糖酶基因全长及干扰片段的扩增和测序第29页
    · 含抗除草剂筛选的金龟子绿僵菌CQMa102 中性海藻糖酶基因超表达载体的构建第29-31页
    · 含抗除草剂筛选的金龟子绿僵菌CQMa102 中性海藻糖酶基因RNA 干扰载体的构建第31-32页
    · 绿僵菌中性海藻糖酶基因的超表达及RNA 干扰转化菌株的筛选结果第32-33页
  · 讨论第33-37页
    · 关于真菌的遗传转化方法第33-34页
    · 关于基因枪转化法第34页
    · RNA 干扰技术第34-36页
    · 超表达第36-37页
3 中性海藻糖酶基因 mRNA 含量、海藻糖含量、中性海藻糖 酶酶活与菌株耐热性第37-48页
  · 技术路线第37页
  · 材料和方法第37-41页
    · 试验菌株第37页
    · 主要试剂第37页
    · 主要仪器与设备第37页
    · 对数生长期NTL mRNA 含量比较分析第37-39页
    · 转化菌株和出发菌株孢子内海藻糖含量及中性海藻糖酶活的测定第39-40页
    · 转化菌株和出发菌株孢子耐热性的比较分析第40-41页
  · 结果与分析第41-44页
    · 转化菌株与出发菌株中性海藻糖酶基因mRNA 含量比较分析第41-43页
    · 转化菌株与出发菌株中性海藻糖含量与中性海藻糖酶酶活分析第43页
    · 转化菌株与出发菌株的耐热性比较分析第43-44页
  · 讨论第44-48页
    · 荧光定量PCR第44-46页
    · 海藻糖与耐热性第46-48页
4 毒力测试第48-50页
  · 技术路线第48页
  · 材料和方法第48-49页
    · 试验菌株与供试昆虫第48页
    · 主要试剂第48页
    · 分生孢子的准备第48页
    · 转化菌株与出发菌株对东亚飞蝗的活性测试第48-49页
  · 结果与分析第49页
  · 讨论第49-50页
5 结论与展望第50-51页
致谢第51-52页
参考文献第52-58页
附录第58页

本篇论文共58页,点击这进入下载页面
 
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