论文目录 | |
摘要 | 第1-7
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Abstract | 第7-13
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第一章 引言 | 第13-27
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· 猪圆环病毒概述 | 第13-21
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· 猪圆环病毒的发现及分离 | 第13
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· 猪圆环病毒的物理化学特性和基因组结构 | 第13-14
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· 流行病学 | 第14-15
页 |
· 猪圆环病毒相关疾病临床症状和致病机理 | 第15-17
页 |
· 诊断 | 第17-20
页 |
· 防制 | 第20-21
页 |
· 实时定量PCR 技术 | 第21-22
页 |
· 实时定量PCR 的定量原理 | 第21
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· 荧光物质分类 | 第21-22
页 |
· 环介导的等温扩增技术 | 第22-27
页 |
· 反应原理 | 第23-25
页 |
· 引物设计原则 | 第25-26
页 |
· 操作流程 | 第26-27
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第二章 猪圆环病毒2 型间接ELISA 检测方法的建立 | 第27-43
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· 材料与方法 | 第27-34
页 |
· 材料 | 第27-30
页 |
· 方法 | 第30-34
页 |
· 结果 | 第34-42
页 |
· 重组质粒的鉴定 | 第34
页 |
· 重组质粒的表达 | 第34-35
页 |
· 表达产物的Western blotting 鉴定 | 第35-36
页 |
· 重组蛋白的可溶性表达分析及纯化 | 第36
页 |
· 重组蛋白纯化后Western blotting 鉴定 | 第36-37
页 |
· 重组蛋白定量 | 第37-38
页 |
· 间接ELISA 条件优化结果 | 第38-41
页 |
· 批内及批间检测结果 | 第41
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· 临床样品的检测与验证 | 第41-42
页 |
· 讨论 | 第42-43
页 |
第三章 检测猪圆环病毒2 型 SYBR Green I 实时定量 PCR 方法的建立 | 第43-49
页 |
· 材料与方法 | 第43-45
页 |
· 毒株、细胞、菌株及质粒 | 第43
页 |
· 试剂与仪器 | 第43
页 |
· PCV2 ORF2 全基因的扩增和克隆 | 第43-44
页 |
· PCR 反应 | 第44
页 |
· 实时定量PCR 实验 | 第44-45
页 |
· 结果 | 第45-48
页 |
· pGEX-6P-1-ORF2 重组质粒的构建 | 第45
页 |
· 实时定量PCR 结果 | 第45-48
页 |
· 讨论 | 第48-49
页 |
第四章猪圆环病毒2 型LAMP 检测方法的建立 | 第49-57
页 |
· 材料与方法 | 第49-52
页 |
· 病毒与菌株 | 第49
页 |
· 引物 | 第49
页 |
· 试剂与试剂盒 | 第49-50
页 |
· 主要仪器设备 | 第50
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· 病毒模板的制备 | 第50-51
页 |
· LAMP 反应体系优化 | 第51-52
页 |
· 结果 | 第52-56
页 |
· 引物验证结果 | 第52-54
页 |
· 镁离子浓度优化结果 | 第54
页 |
· 内外引物比例优化结果 | 第54-55
页 |
· 灵敏度检测结果 | 第55
页 |
· 特异性检测结果 | 第55-56
页 |
· 讨论 | 第56-57
页 |
第五章 全文结论 | 第57-58
页 |
· 猪圆环病毒 2 型 ELISA 检测方法的建立 | 第57
页 |
· 猪圆环病毒 2 型实时定量 PCR 检测方法的建立 | 第57
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· 猪圆环病毒 2 型 LAMP 检测方法的建立 | 第57-58
页 |
参考文献 | 第58-67
页 |
致谢 | 第67-68
页 |
作者简介 | 第68页 |