论文目录 | |
中文摘要 | 第1-7
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英文摘要 | 第7-12
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前言部分 | 第12-33
页 |
第一章 猪传染性胃肠炎病毒的研究进展 | 第12-20
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1 猪传染性胃肠炎的概述 | 第12
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2 猪传染性胃肠炎病毒研究进展 | 第12-20
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· TGEV 形态学特征 | 第12-13
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· TGEV 的理化特性 | 第13
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· TGEV 的生物学特性 | 第13
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· TGEV 的病原性 | 第13-14
页 |
· TGEV 的抗原性 | 第14-15
页 |
· TGEV 基因组结构 | 第15-18
页 |
· TGEV S 糖蛋白 | 第15-16
页 |
· TGEV M 糖蛋白 | 第16-17
页 |
· TGEV N 糖蛋白 | 第17
页 |
· TGEV 非结构蛋白 | 第17-18
页 |
· TGEV 繁殖机制 | 第18-20
页 |
第二章 DNA 疫苗研究进展 | 第20-28
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1 基因疫苗研究进程简介 | 第20-22
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2 DNA 疫苗的制备 | 第22-23
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· 抗原编码基因的筛选 | 第22
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· 质粒表达载体的构建 | 第22-23
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3 基因免疫机制及优点 | 第23-25
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· 基因免疫机制 | 第23-24
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· 基因免疫的优点 | 第24-25
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4 DNA 疫苗的安全性和存在问题 | 第25-26
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5 DNA 疫苗应用前景 | 第26-28
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第三章 猪传染性胃肠炎病毒 DNA 疫苗研究进展 | 第28-33
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1 猪传染性胃肠炎病毒转基因疫苗研究进展 | 第28-31
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· 可食用转基因植物疫苗 | 第28-29
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· 基因工程亚单位疫苗 | 第29
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· 合成肽疫苗 | 第29-30
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· 基因缺失疫苗 | 第30
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· RNA 复制子疫苗 | 第30-31
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· 活载体重组病毒疫苗 | 第31
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2 猪传染性胃肠炎可食疫苗可行性及前景 | 第31-33
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实验研究部分 | 第33-56
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第四章 猪传染性胃肠炎病毒纤突蛋白 S 基因克隆 | 第33-48
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1 材料和方法 | 第33-41
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· 组织来源 | 第33
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· 质粒和菌种 | 第33-34
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· 试剂和仪器 | 第34-35
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· 引物设计合成 | 第35-36
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· TGEV 总 RNA 提取及检测 | 第36-37
页 |
· TGEV 总 RNA 提取 | 第36
页 |
· TGEV 总 RNA 完整性的检测 | 第36-37
页 |
· RT-PCR | 第37-39
页 |
· 反转录合成 cDNA | 第37
页 |
· 片段 S1 和 S2 的 PCR 扩增 | 第37-38
页 |
· PCR 产物的酶切鉴定 | 第38-39
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· 扩增产物的 T-A 克隆 | 第39-40
页 |
· 重组质粒的酶切鉴定 | 第40-41
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· 目的片断序列测定 | 第41
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· S 基因全长序列 PCR 扩增 | 第41
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· S 基因克隆 | 第41
页 |
· 重组质粒 pGEM-S 酶切和 PCR 鉴定 | 第41
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2 结果与分析 | 第41-44
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· TGEV 总 RNA 完整性的检测 | 第41-42
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· TGEV S 基因分段扩增 | 第42
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· S1 和 S2 PCR 产物的酶切结果 | 第42
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· 重组质粒 pMD- S1 和 pMD- S2 的酶切鉴定 | 第42-43
页 |
· S 基因核酸序列分段测定及分析 | 第43
页 |
· S 基因全长序列 PCR 扩增及重组子鉴定 | 第43-44
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3 讨论 | 第44-47
页 |
· 总 RNA 的完整性及 cDNA 的克隆 | 第44
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· S 基因克隆策略与经验 | 第44-45
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· S 基因 RT-PCR 引物设计 | 第45-47
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4 小结 | 第47-48
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第五章 猪传染性胃肠炎病毒纤突蛋白 S 基因乳腺特异性表达载体的构建 | 第48-56
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1 材料和方法 | 第48-50
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· 质粒和菌种 | 第48-49
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· 工具酶和试剂 | 第49
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· 仪器 | 第49
页 |
· 引物设计合成 | 第49
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· S 基因的 PCR 扩增 | 第49
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· S′基因克隆及重组子酶切鉴定 | 第49
页 |
· 真核表达载体构建 | 第49-50
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· 质粒 pGEM-S′和 pG-BBCP 酶切鉴定 | 第49-50
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· 重组质粒的克隆 pG-BBCPS′及鉴定 | 第50
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· 真核表达载体 pEGFP-BCPS′构建及鉴定 | 第50
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2 结果与分析 | 第50-52
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· S′基因的 PCR 产物电泳 | 第50
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· 重组子 pGEM-S′酶切鉴定 | 第50-51
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· 质粒 pGEM-S′和 pG-BBCP 酶切鉴定 | 第51
页 |
· 重组质粒 pG-BBCPS′的克隆及鉴定 | 第51-52
页 |
· 真核表达载体 pEGFP-BCPS′构建及鉴定 | 第52
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3 讨论 | 第52-54
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4 小结 | 第54-56
页 |
结论 | 第56-57
页 |
参考文献 | 第57-65
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附录 | 第65-75
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致谢 | 第75-76
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个人简介 | 第76
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