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猪传染性胃肠炎病毒S基因乳腺特异性真核表达载体构建的研究

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猪传染性胃肠炎病毒S基因乳腺特异性真核表达载体构建的研究
论文目录
 
中文摘要第1-7 页
英文摘要第7-12 页
前言部分第12-33 页
  第一章 猪传染性胃肠炎病毒的研究进展第12-20 页
    1 猪传染性胃肠炎的概述第12 页
    2 猪传染性胃肠炎病毒研究进展第12-20 页
      · TGEV 形态学特征第12-13 页
      · TGEV 的理化特性第13 页
      · TGEV 的生物学特性第13 页
      · TGEV 的病原性第13-14 页
      · TGEV 的抗原性第14-15 页
      · TGEV 基因组结构第15-18 页
        · TGEV S 糖蛋白第15-16 页
        · TGEV M 糖蛋白第16-17 页
        · TGEV N 糖蛋白第17 页
        · TGEV 非结构蛋白第17-18 页
      · TGEV 繁殖机制第18-20 页
  第二章 DNA 疫苗研究进展第20-28 页
    1 基因疫苗研究进程简介第20-22 页
    2 DNA 疫苗的制备第22-23 页
      · 抗原编码基因的筛选第22 页
      · 质粒表达载体的构建第22-23 页
    3 基因免疫机制及优点第23-25 页
      · 基因免疫机制第23-24 页
      · 基因免疫的优点第24-25 页
    4 DNA 疫苗的安全性和存在问题第25-26 页
    5 DNA 疫苗应用前景第26-28 页
  第三章 猪传染性胃肠炎病毒 DNA 疫苗研究进展第28-33 页
    1 猪传染性胃肠炎病毒转基因疫苗研究进展第28-31 页
      · 可食用转基因植物疫苗第28-29 页
      · 基因工程亚单位疫苗第29 页
      · 合成肽疫苗第29-30 页
      · 基因缺失疫苗第30 页
      · RNA 复制子疫苗第30-31 页
      · 活载体重组病毒疫苗第31 页
    2 猪传染性胃肠炎可食疫苗可行性及前景第31-33 页
实验研究部分第33-56 页
  第四章 猪传染性胃肠炎病毒纤突蛋白 S 基因克隆第33-48 页
    1 材料和方法第33-41 页
      · 组织来源第33 页
      · 质粒和菌种第33-34 页
      · 试剂和仪器第34-35 页
      · 引物设计合成第35-36 页
      · TGEV 总 RNA 提取及检测第36-37 页
        · TGEV 总 RNA 提取第36 页
        · TGEV 总 RNA 完整性的检测第36-37 页
      · RT-PCR第37-39 页
        · 反转录合成 cDNA第37 页
        · 片段 S1 和 S2 的 PCR 扩增第37-38 页
        · PCR 产物的酶切鉴定第38-39 页
      · 扩增产物的 T-A 克隆第39-40 页
      · 重组质粒的酶切鉴定第40-41 页
      · 目的片断序列测定第41 页
      · S 基因全长序列 PCR 扩增第41 页
      · S 基因克隆第41 页
      · 重组质粒 pGEM-S 酶切和 PCR 鉴定第41 页
    2 结果与分析第41-44 页
      · TGEV 总 RNA 完整性的检测第41-42 页
      · TGEV S 基因分段扩增第42 页
      · S1 和 S2 PCR 产物的酶切结果第42 页
      · 重组质粒 pMD- S1 和 pMD- S2 的酶切鉴定第42-43 页
      · S 基因核酸序列分段测定及分析第43 页
      · S 基因全长序列 PCR 扩增及重组子鉴定第43-44 页
    3 讨论第44-47 页
      · 总 RNA 的完整性及 cDNA 的克隆第44 页
      · S 基因克隆策略与经验第44-45 页
      · S 基因 RT-PCR 引物设计第45-47 页
    4 小结第47-48 页
  第五章 猪传染性胃肠炎病毒纤突蛋白 S 基因乳腺特异性表达载体的构建第48-56 页
    1 材料和方法第48-50 页
      · 质粒和菌种第48-49 页
      · 工具酶和试剂第49 页
      · 仪器第49 页
      · 引物设计合成第49 页
      · S 基因的 PCR 扩增第49 页
      · S′基因克隆及重组子酶切鉴定第49 页
      · 真核表达载体构建第49-50 页
        · 质粒 pGEM-S′和 pG-BBCP 酶切鉴定第49-50 页
        · 重组质粒的克隆 pG-BBCPS′及鉴定第50 页
        · 真核表达载体 pEGFP-BCPS′构建及鉴定第50 页
    2 结果与分析第50-52 页
      · S′基因的 PCR 产物电泳第50 页
      · 重组子 pGEM-S′酶切鉴定第50-51 页
      · 质粒 pGEM-S′和 pG-BBCP 酶切鉴定第51 页
      · 重组质粒 pG-BBCPS′的克隆及鉴定第51-52 页
      · 真核表达载体 pEGFP-BCPS′构建及鉴定第52 页
    3 讨论第52-54 页
    4 小结第54-56 页
结论第56-57 页
参考文献第57-65 页
附录第65-75 页
致谢第75-76 页
个人简介第76 页

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