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鸡传染性支气管炎病毒陕西分离株N基因的克隆与分子遗传变异研究

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鸡传染性支气管炎病毒陕西分离株N基因的克隆与分子遗传变异研究
论文目录
 
摘要第1-6 页
ABSTRACT第6-12 页
第一章 鸡传染性支气管炎病毒分子生物学及核蛋白研究进展第12-24 页
  · IBV 分类地位及形态特征第12-13 页
  · IBV 基因组第13-16 页
    · S 基因第14 页
    · M 基因第14-15 页
    · 非结构域第15-16 页
  · N 基因研究进展第16-23 页
    · N 基因遗传变异研究第16-17 页
    · N 蛋白的结构特征第17-18 页
    · N 蛋白的生物学功能第18-20 页
    · N 蛋白的免疫学特性研究第20-21 页
    · N 蛋白与IBV 基因工程疫苗第21-22 页
    · N 蛋白在血清抗体水平监测中的应用第22 页
    · N 蛋白单克隆抗体研究第22-23 页
  · 结语第23-24 页
第二章 鸡传染性支气管炎病毒陕西分离株N 基因的克隆及分子遗传变异分析第24-42 页
  · 材料第24-26 页
    · 毒株第24-25 页
    · 载体及菌种第25 页
    · 试剂及溶液配制第25-26 页
    · 主要仪器第26 页
  · 方法第26-30 页
    · IBV 各分离毒株的引物设计第26 页
    · 病毒增殖第26 页
    · 病毒总RNA 提取第26-27 页
    · 分离株 N 基因 RT-PCR第27 页
    · RT-PCR 产物的纯化回收第27 页
    · RT-PCR 产物与T 载体连接第27-28 页
    · 大肠杆菌感受态细胞的制备第28 页
    · 转化第28 页
    · 重组质粒的提取第28-29 页
    · IBV 分离株N 基因重组质粒的鉴定第29 页
    · 各分离株N 基因序列测定与测定结果的鉴定第29 页
    · IBV 分离株N 基因核苷酸序列及推导氨基酸序列分析第29 页
    · IBV 分离株N 基因系统发生进化关系分析第29-30 页
  · 结果第30-39 页
    · 各毒株N 基因扩增结果第30 页
    · N 基因克隆筛选的限制性酶切鉴定结果第30-31 页
    · 各毒株N 基因序列测定结果第31-36 页
    · 参考毒株在GenBank 中的登录号第36 页
    · 各毒株N 基因与参考毒株核苷酸序列及氨基酸推导序列同源性比对第36-37 页
    · IBV 分离株的N 蛋白氨基酸变异特征分析第37-38 页
    · IBV 分离株的N 基因系统发生进化关系分析第38-39 页
  · 讨论第39-40 页
  · 小结第40-42 页
第三章 鸡肾型传染性支气管炎病毒W118 株主要结构基因的分子遗传特征第42-51 页
  · 材料与方法第42-44 页
    · 毒株第42 页
    · 载体及菌种第42 页
    · 试剂第42 页
    · 引物设计第42-43 页
    · 病毒RNA 提取及RT-PCR第43 页
    · IBV W118 株S1、M 和N 基因克隆与鉴定第43 页
    · IBV W118 株S1、M 和N 基因序列测定第43 页
    · S1、M 和N 基因推倒氨基酸序列分析第43 页
    · S1、M 和N 基因与参考毒株序列比较及系统发生进化关系分析第43-44 页
  · 结果第44-48 页
    · IBV W118 株S1、M 和N 基因的扩增、克隆及鉴定第44 页
    · IBV W118 株S1、M 和N 基因的核苷酸序列测定第44 页
    · W118 株S1、M 和N 基因的分子特征及与参考毒株的比较分析第44-46 页
    · IBV W118 株与参考毒株S1 基因的同源性比较与进化树分析第46-47 页
    · IBV W118 株与参考毒株M 基因的同源性比较与系统进化分析第47 页
    · IBV W118 株与参考毒株N 基因的同源性比较与进化树分析第47-48 页
  · 讨论第48-49 页
    · W118 株S1、M 和N 基因变异特点第48-49 页
    · W118 株与其它参考毒株的可能关系、可能来源及研究意义第49 页
  · 小结第49-51 页
第四章 传染性支气管炎病毒W118 株N 蛋白在大肠杆菌中的表达及其结构预测分析第51-59 页
  · 材料与方法第51-54 页
    · 菌株和质粒第51 页
    · 酶与试剂第51-52 页
    · 阳性血清及酶标抗体第52 页
    · W118 株N 蛋白二级结构预测和抗原表位分析第52 页
    · 引物的设计与合成第52 页
    · N 基因的扩增与pMD18-T 载体连接第52 页
    · 原核重组表达载体的构建与鉴定第52 页
    · N 蛋白在大肠杆菌中的表达第52-53 页
    · 表达蛋白的鉴定第53-54 页
  · 结果第54-57 页
    · W118 株N 蛋白二级结构和抗原表位第54-55 页
    · 重组原核表达载体N-pET32a 的酶切鉴定第55-56 页
    · 重组原核表达载体序列测定第56 页
    · 表达蛋白的SDS-PAGE 检测第56 页
    · 表达蛋白的Western-blot 检测第56-57 页
  · 讨论第57-58 页
  · 小结第58-59 页
第五章 鸡传染性支气管炎病毒W118株N基因自杀性DNA免疫质粒的构建第59-77 页
  · 材料与方法第59-60 页
    · 质粒及菌株第59 页
    · 酶与试剂第59-60 页
    · 引物的设计与合成第60 页
    · N 基因的扩增与pMD18-T 载体连接第60 页
    · N 基因DNA 免疫质粒的构建第60 页
    · N 基因DNA 免疫质粒序列测定第60 页
  · 结果第60-61 页
    · N 基因的扩增第60-61 页
    · N 基因重组质粒的酶切鉴定第61 页
    · N 基因DNA 免疫质粒的酶切鉴定第61 页
    · N 基因DNA 免疫质粒的测序鉴定第61 页
  · 讨论第61-62 页
  · 小结第62-77 页
致谢第77-78 页
作者简介第78 页

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