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猪圆环病毒2型陕西株的分离鉴定及其ORF2基因的序列分析
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猪圆环病毒2型陕西株的分离鉴定及其ORF2基因的序列分析
论文目录
 
摘要第1-9 页
ABSTRACT第9-11 页
第一章 猪圆环病毒研究进展第11-31 页
　　· 病原学第11-18 页
　　　　· 猪圆环病毒的发现和命名第11-12 页
　　　　· 猪圆环病毒的病毒学分类地位第12-13 页
　　　　· PCV 形态学特性与理化特性第13 页
　　　　· PCV 的细胞培养特性第13-14 页
　　　　· PCV2 的分子生物学特征第14-18 页
　　· 流行病学第18-20 页
　　　　· 猪圆环病毒的全球流行和分布状况第18-19 页
　　　　· PCV 感染的传染源第19 页
　　　　· PCV 感染传播途径第19-20 页
　　　　· PCV 感染的易感动物第20 页
　　· PCV2 感染的症状与病理变化第20-25 页
　　　　· 症状第20-21 页
　　　　· 病理变化第21-25 页
　　· 猪圆环病毒感染的诊断第25-28 页
　　　　· 病毒分离第25-26 页
　　　　· 间接免疫荧光试验第26 页
　　　　· 聚合酶链反应第26-27 页
　　　　· 酶联免疫吸附试验第27 页
　　　　· 原位核酸杂交试验第27-28 页
　　· 猪圆环病毒感染的防制第28-29 页
　　　　· 疫苗研究第28-29 页
　　　　· 目前的防治措施第29 页
　　· 本研究的目的意义第29-31 页
第二章 猪圆环病毒2 型陕西株的分离与鉴定第31-39 页
　　· 实验材料第31-32 页
　　　　· 主要试验仪器第31-32 页
　　　　· 主要试剂和耗材第32 页
　　　　· 病料第32 页
　　　　· 病毒分离用细胞第32 页
　　· 试验方法第32-35 页
　　　　· 细胞培养用液的配制第32-33 页
　　　　· PCR 检测试剂的配制第33 页
　　　　· 病料的采集和处理第33 页
　　　　· 病料PCR 检测第33-34 页
　　　　· 细胞培养第34 页
　　　　· 病毒分离第34 页
　　　　· PCR 检测第34-35 页
　　　　· 间接免疫荧光检测第35 页
　　· 结果第35-37 页
　　　　· 样品的采集第35-36 页
　　　　· PCR 检测第36 页
　　　　· 病毒分离第36 页
　　　　· PCR 检测第36-37 页
　　　　· 间接免疫荧光检测第37 页
　　· 讨论第37-39 页
第三章 PCV2 陕西分离株ORF2 基因的变异分析第39-53 页
　　· 实验材料第39-40 页
　　　　· 毒株第39 页
　　　　· 菌种、载体第39 页
　　　　· 主要试剂及培养基的配制第39-40 页
　　　　· 主要仪器第40 页
　　· 实验方法第40-45 页
　　　　· 引物设计第40-41 页
　　　　· 病毒DNA 的提取第41 页
　　　　· PCR 扩增反应第41 页
　　　　· PCR 产物的鉴定第41 页
　　　　· PCR 产物的纯化回收第41 页
　　　　· 回收产物与pMD 18-T Vector 连接第41-42 页
　　　　· 感受态细胞的制备（CaC12 法）第42 页
　　　　· 连接产物的转化第42 页
　　　　· 重组质粒的提取第42-44 页
　　　　· 重组质粒的PCR 鉴定第44 页
　　　　· 重组质粒的酶切鉴定第44 页
　　　　· 重组质粒的序列测定第44-45 页
　　　　· 分离毒株ORF2 的变异分析第45 页
　　　　· 分离毒株Rep 蛋白的特性分析第45 页
　　· 结果第45-51 页
　　　　· 目的基因的扩增第45 页
　　　　· 重组质粒的PCR 鉴定结果第45 页
　　　　· 重组质粒的酶切鉴定结果第45-46 页
　　　　· 分离毒株ORF2 基因的核苷酸序列测定结果第46 页
　　　　· PCV2 不同毒株ORF2 基因的核苷酸序列同源性分析第46 页
　　　　· PCV2 不同毒株ORF2 基因推导的氨基酸序列同源性分析第46-47 页
　　　　· 氨基酸序列比对第47-49 页
　　　　· PCV2 ORF2 基因进化分析第49 页
　　　　· PCV2 Rep 蛋白的特性分析（抗原性、亲水性、表面抗原位点预测）第49-51 页
　　· 讨论第51-53 页
结论第53-54 页
参考文献第54-63 页
附录：重组质粒PMD-T-ORF2 测序报告第63-68 页
致谢第68-69 页
作者简介第69 页

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