论文目录 | |
中文摘要 | 第1-6
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英文摘要 | 第6-14
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第一章 鸡传染性支气管炎的研究进展 | 第14-26
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· 鸡传染性支气管炎的发生史 | 第14-16
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· IBV 的基因特点 | 第16-18
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· 基因组结构与功能 | 第16-17
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· IBV 的复制机制 | 第17-18
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· IBV 的诊断 | 第18-24
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· 流行病学 | 第18
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· 症状 | 第18-19
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· 病理变化 | 第19
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· IBV 的分离和鉴定 | 第19-21
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· IBV 血清学诊断 | 第21-23
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· 分子生物学技术 | 第23-24
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· IBV 的分型 | 第24-25
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· IBV 的变异机制 | 第25-26
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第二章 鸡传染性支气管炎病毒M 基因的研究进展 | 第26-31
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· IBV M 蛋白的分子结构 | 第26-27
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· M 蛋白与IBV 出芽位置 | 第27-29
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· M 蛋白的免疫保护性 | 第29
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· M 蛋白与疫苗的研制 | 第29
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· M 蛋白单克隆抗体研制 | 第29-30
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· M 蛋白的变异性 | 第30-31
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第三章 陕西省鸡传染性支气管炎病毒的分离与鉴定 | 第31-37
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· 材料 | 第31-32
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· 病料来源 | 第31
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· SPF 种蛋 | 第31
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· 非免疫鸡及鸡胚 | 第31
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· 参考病毒及阳性血清 | 第31
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· RT-PCR 主要试剂 | 第31-32
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· M 基因序列分析参考毒株 | 第32
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· 方法 | 第32-33
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· 病料处理 | 第32
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· 鸡胚接种及病变观察 | 第32
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· 血清学试验 | 第32-33
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· 分子生物学试验 | 第33
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· 动物回归试验 | 第33
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· 鸡胚接种及 EID50测定 | 第33
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· 结果 | 第33-36
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· HA 及 HI 试验 | 第33-34
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· 鸡胚发育情况 | 第34
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· 干扰NDV 试验 | 第34
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· 鸡胚中和试验 | 第34-35
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· RT-PCR 结果 | 第35
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· M 基因序列分析结果 | 第35
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· 动物回归试验 | 第35
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· 分离毒对鸡胚的致病力及 EID50测定 | 第35-36
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· 讨论 | 第36-37
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第四章 IBV 分离株 M 基因的克隆与遗传变异分析 | 第37-46
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· 材料 | 第37-38
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· 毒株 | 第37
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· 宿主菌与载体 | 第37
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· 试剂 | 第37
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· 主要实验仪器 | 第37-38
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· 方法 | 第38-42
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· 引物设计与合成 | 第38
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· IBV 总RNA 的提取 | 第38
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· IBV RNA cDNA 链的合成与 M 蛋白基因 PCR 扩增 | 第38
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· PCR 产物回收 | 第38-39
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· 克隆载体的构建 | 第39-40
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· 重组质粒的抽提 | 第40-41
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· 阳性质粒的筛选 | 第41
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· 阳性质粒M 基因测序 | 第41
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· 测序结果分析 | 第41-42
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· 结果与分析 | 第42-45
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· IBV 分离株 RNA 的 RT-PCR | 第42
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· 阳性质粒筛选结果 | 第42-43
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· IBV M 蛋白的同源性分析 | 第43-44
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· IBV M 蛋白二级结构和跨膜区分析 | 第44-45
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· 讨论 | 第45-46
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第五章 IBV 陕西分离株 M 蛋白 B 细胞抗原表位稳定性的分析 | 第46-52
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· 材料与方法 | 第46
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· 试验毒株及其M 蛋白核苷酸和氨基酸序列 | 第46
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· M 蛋白同源性、二级结构和 B 细胞抗原表位的预测分析 | 第46
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· 结果 | 第46-50
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· M 蛋白同源性分析结果 | 第46-47
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· M 蛋白二级结构预测结果 | 第47-48
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· M 蛋白 B 细胞抗原表位预测结果 | 第48-50
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· 讨论 | 第50-52
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第六章 IBV 分离株 G5 的 M 蛋白原核表达及鉴定 | 第52-65
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· 试验试剂与材料 | 第52-54
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· 主要试剂 | 第52-53
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· 主要试验材料 | 第53
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· 主要仪器 | 第53
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· 普通试剂的配制 | 第53
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· SDS-PAGE 常用试剂配制 | 第53-54
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· Western-blotting 常用试剂的配制 | 第54
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· 试验方法与步骤 | 第54-57
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· 引物的设计与合成 | 第54-55
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· 表达载体的构建 | 第55
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· 表达条件优化 | 第55
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· 表达产物的 SDS-PAGE 检测 | 第55-56
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· 表达产物鉴定 | 第56-57
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· 试验结果 | 第57-62
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· 克隆载体的构建 | 第57-58
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· 表达载体的构建 | 第58-59
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· 表达条件优化 | 第59-62
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· Western-blotting 鉴定结果 | 第62
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· 讨论 | 第62-65
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· M 蛋白表达系统的选择 | 第62-63
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· 表达条件的优化 | 第63-65
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结论 | 第65-66
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参考文献 | 第66-74
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附录 | 第74-75
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致谢 | 第75-76
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作者简介 | 第76
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