论文目录 | |
摘要 | 第1-5
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ABSTRACT | 第5-9
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第一章 文献综述 | 第9-22
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· 关于PML-NBS | 第9-15
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· 概念 | 第9-11
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· 研究进展 | 第11-15
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· 蛋白质(类)泛素化 | 第15-21
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· 蛋白质(类)泛素化的研究进展 | 第15-16
页 |
· 小泛素类似修饰物SUMO | 第16-17
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· SUMO 化修饰 | 第17-18
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· SUMO 化的生物学功能 | 第18-21
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· 本研究目的与意义 | 第21-22
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第二章 材料与方法 | 第22-37
页 |
· 材料 | 第22-26
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· 实验材料及试剂 | 第22
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· 试验试剂 | 第22-26
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· 主要仪器设备 | 第26-27
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· 试验方法 | 第27-37
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· 技术路线 | 第27
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· 引物的设计及合成 | 第27-28
页 |
· 人PMLⅢ基因原核表达载体的构建 | 第28
页 |
· 用DNA 胶回收试剂盒法从凝胶中回收PCR 产物 | 第28-29
页 |
· 酶切质粒pGEX-4T-1-PML-Ⅲ的PCR 回收产物 | 第29
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· 酶切载体质粒pGEX-4T-1 (+) | 第29
页 |
· 用DNA 快速纯化回收试剂盒从溶液中回收酶切产物 | 第29
页 |
· 酶切后PCR 产物与pGEX-4T-1 (+)载体连接 | 第29-30
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· Inoue 法制备超级感受态细胞(DH5α) | 第30
页 |
· 转化 | 第30-37
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第三章 结果 | 第37-47
页 |
· 人PMLⅢ基因N 端1-6008P 片段的扩增 | 第37
页 |
· 人PMLⅢ基因原核表达载体PGEX-4T-1(+)-PMLⅢ的构建和鉴定 | 第37-38
页 |
· 重组质粒PGEX-4T-1(+)-PMLⅢ在大肠杆菌中的表达及纯化 | 第38-39
页 |
· 融合蛋白GST-PML 的纯化及融合蛋白酶切鉴定 | 第39-41
页 |
· 兔抗人PML 多克隆抗体鉴定 | 第41-42
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· ELISA 检测 | 第41
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· Western blot 检测 | 第41-42
页 |
· 人PML-Ⅲ基因真核表达载体PCMV-MYC/HA- PML-Ⅲ的构建和鉴定 | 第42-44
页 |
· PMLⅢ蛋白在亚细胞结构的定位分布 | 第44-45
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· PMLⅢ蛋白和SUMO 蛋白在细胞内共定位的研究 | 第45-47
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第四章 讨论 | 第47-49
页 |
· PMLⅢ基因扩增片段和载体的选择 | 第47
页 |
· 原核表达系统的选择 | 第47
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· 兔抗人PMLⅢ多克隆抗体的制备 | 第47-48
页 |
· 多克隆抗体的鉴定 | 第48
页 |
· SUMO-1 对PML 的修饰 | 第48-49
页 |
第五章 总结及展望 | 第49-50
页 |
参考文献 | 第50-55
页 |
附录 | 第55-62
页 |
致谢 | 第62-63
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作者简介 | 第63
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