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秦岭大熊猫IFN-γ基因的克隆、表达及免疫活性研究

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秦岭大熊猫IFN-γ基因的克隆、表达及免疫活性研究
论文目录
 
摘要第1-5 页
ABSTRACT第5-10 页
第一章 IFN-γ研究进展第10-19 页
  · IFN-γ的发现第10 页
  · IFN-γ的产生及分子结构第10-12 页
  · IFN-γ受体及作用机制第12-14 页
  · IFN-γ主要生物学功能第14-16 页
    · 抗病毒作用第14 页
    · 免疫调节作用第14-15 页
    · 抗肿瘤作用第15-16 页
  · IFN-γ的基因工程研究进展第16-17 页
  · IFN-γ在动物疾病防控中的作用第17-18 页
  · 存在的问题和展望第18-19 页
第二章 秦岭大熊猫的进化史等研究进展第19-24 页
  · 秦岭大熊猫的进化史第19-20 页
  · 秦岭大熊猫形态特征第20 页
  · 秦岭大熊猫生活习性第20-21 页
  · 秦岭大熊猫分布地域第21 页
  · 秦岭大熊猫分子学研究进展第21 页
  · 秦岭大熊猫保护措施第21-22 页
  · 大熊猫疾病研究概况第22 页
  · 大熊猫IFN-γ研究的目的和意义第22-24 页
第三章 秦岭大熊猫IFN-γ基因原核表达载体的构建第24-45 页
  · 材料第24-27 页
    · 菌种和载体第24 页
    · 主要试剂第24 页
    · 主要仪器第24-25 页
    · 主要溶液配方第25-27 页
  · 方法第27-37 页
    · 引物的设计与合成第27-28 页
    · 秦岭大熊猫外周血淋巴细胞的分离与诱导培养第28 页
    · 淋巴细胞总RNA 的提取及第一链cDNA 的合成第28 页
    · PCR 扩增第28-29 页
    · PCR 扩增产物的凝胶电泳第29-30 页
    · PCR 扩增产物的回收第30 页
    · 目的片段与载体的连接第30 页
    · 感受态细胞的制备第30-31 页
    · 连接产物的转化第31 页
    · 菌液PCR 鉴定第31-32 页
    · 碱裂解法小量提取质粒第32 页
    · 重组质粒的鉴定第32-33 页
    · 原核表达载体的构建第33-35 页
    · 重组质粒的鉴定第35 页
    · 重组菌的诱导表达第35 页
    · 重组菌最佳诱导条件的确定第35-36 页
    · 表达产物的检测第36-37 页
  · 结果第37-42 页
    · RT-nested PCR 扩增结果第37 页
    · 重组质粒pGEM-T-IFN-γ的测序结果与序列分析结果第37-38 页
    · 重组表达载体pET32a-IFN-γ的鉴定第38-40 页
    · 表达产物的SDS-PAGE 电泳检测第40-41 页
    · 表达条件的优化第41 页
    · Western blot 分析第41-42 页
  · 讨论第42-44 页
    · 秦岭大熊猫IFN-γ基因的扩增第42 页
    · 秦岭大熊猫IFN-γ基因表达重组质粒的构建第42 页
    · 目的蛋白的表达第42-43 页
    · 表达条件的优化第43 页
    · 重组蛋白的大小及表达量第43-44 页
    · 重组蛋白的反应原性鉴定第44 页
  · 小结第44-45 页
第四章 IFN-γ重组蛋白的纯化第45-50 页
  · 材料第45 页
    · 主要试剂第45 页
    · 主要仪器设备第45 页
    · 用于蛋白纯化溶液的配制第45 页
  · 方法第45-47 页
    · 重组蛋白的大量诱导表达第45 页
    · 目的蛋白存在情况检测第45-46 页
    · 镍柱的处理第46 页
    · 镍柱的再生第46 页
    · 目的蛋白的纯化第46-47 页
    · 纯化蛋白的浓缩第47 页
    · 重组蛋白浓度的测定第47 页
  · 结果第47-48 页
    · 重组蛋白的制备及纯化第47-48 页
    · 重组蛋白浓度的计算第48 页
  · 讨论第48-49 页
    · 目的蛋白存在形式检测第48-49 页
    · 目的蛋白的纯化第49 页
  · 小结第49-50 页
第五章 重组IFN-γ蛋白多克隆抗体制备及其活性检测第50-55 页
  · 材料第50 页
    · 主要试剂及实验动物第50 页
    · 主要仪器设备第50 页
  · 方法第50-51 页
    · 多克隆抗体制备第50 页
    · 重组蛋白活性检测第50-51 页
  · 结果第51-53 页
    · 抗体制备结果第51 页
    · 重组蛋白活性检测结果第51-53 页
  · 讨论第53-54 页
    · 多克隆抗体制备第53 页
    · 抗体检测方法第53-54 页
    · 重组蛋白活性检测第54 页
  · 小结第54-55 页
结论第55-56 页
参考文献第56-62 页
附录第62-63 页
致谢第63-64 页
作者简介第64-65 页
硕士期间发的文章第65 页

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