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MGC5306蛋白多克隆抗体的制备与鉴定及亚细胞结构的定位

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MGC5306蛋白多克隆抗体的制备与鉴定及亚细胞结构的定位
论文目录
 
摘要第1-6 页
ABSTRACT第6-10 页
第一章 文献综述第10-15 页
  · MGC5306 的研究进展第10-14 页
    · MGC5306 的细胞定位第10 页
    · MGC5306 的基因结构第10-11 页
    · MGC5306 与其他蛋白的相互作用第11-12 页
    · MGC5306 的生物学功能第12 页
    · MGC5306 在肿瘤发生中的潜在作用第12-14 页
  · 抗体制备的研究概况第14 页
  · 本研究目的与意义第14-15 页
第二章 MGC5306 蛋白原核表达载体的构建、表达及纯化第15-32 页
  · 实验材料第15 页
  · 实验试剂第15-17 页
    · 有关原核表达载体的构建第15-16 页
    · 有关蛋白表达与纯化第16-17 页
  · 实验仪器第17-18 页
  · 实验方法第18-25 页
    · 引物的设计与合成第18 页
    · 通过PCR 扩增引物第18 页
    · 凝胶中回收质粒pEGFP-N1-MGC5306 的PCR 产物第18-19 页
    · 酶切质粒pEGFP-N1-MGC5306 的PCR 回收产物第19 页
    · 酶切载体质粒pGEX-4T-1 (+)第19-20 页
    · DNA 快速纯化回收试剂盒从溶液中回收酶切产物第20 页
    · 酶切后PCR 产物与pGEX-4T-1 (+)载体连接第20 页
    · CaCl 2 法制备感受态细胞(DH5α)第20-21 页
    · 转化第21 页
    · 抽提重组质粒pGEX-4T-1-MGC5306第21 页
    · 重组质粒pGEX-4T-1-MGC5306 酶切鉴定第21-22 页
    · 表达条件的优化和目的基因的原核表达第22-23 页
    · 菌体表达总蛋白的Western Blot 分析第23 页
    · 验证表达蛋白是否为可溶性蛋白第23-24 页
    · 融合蛋白的大量制备及纯化第24-25 页
  · 结果与分析第25-29 页
    · MGC5306(98-204AA)基因的扩增第25 页
    · pGEX-4T-1-MGC5306 原核表达载体的构建与鉴定第25-27 页
    · 表达蛋白是否为可溶性蛋白的验证第27-28 页
    · 在不同的温度下IPTG 诱导重组质粒pGEX-4T-1-MGC5306第28 页
    · 不同IPTG 浓度下诱导重组质粒pGEX-4T-1-MGC5306第28-29 页
    · 重组质粒pGEX-4T-1-MGC5306 在大肠杆菌E.coli.BL21(DE3) plysS 中的诱导表达和纯化第29 页
  · 讨论第29-31 页
    · 有关MGC5306 基因的PCR 扩增与载体的选择第29-30 页
    · 有关目的蛋白的诱导表达和纯化第30-31 页
  · 结论第31-32 页
第三章 MGC5306 蛋白多克隆抗体制备及鉴定第32-38 页
  · 材料和试剂第32-33 页
  · 实验仪器第33 页
  · 实验方法第33-34 页
    · 兔抗MGC5306 蛋白多克隆抗体的制备第33 页
    · 用ELISA 方法来检测抗血清的效价第33-34 页
    · 对抗血清进行纯化第34 页
    · 原核表达蛋白的Western Blotting 检测第34 页
  · 结果与分析第34-36 页
    · Western Blot 方法检测多克隆抗体第34-35 页
    · 用ELISA 方法来检测抗体的效价第35-36 页
  · 讨论第36-37 页
    · 有关多克隆抗体的制备和提高抗血清效价的方法第36-37 页
    · 关于ELISA 实验第37 页
    · 有关多克隆抗体的鉴定和Western blot 检测第37 页
  · 结论第37-38 页
第四章 MGC5306 蛋白真核表达载体的构建及亚细胞结构的定位第38-44 页
  · 材料第38 页
  · 试剂和仪器第38-39 页
    · 有关真核表达载体构建第38 页
    · 亚细胞结构定位方面第38-39 页
  · 方法第39-41 页
    · 真核表达载体pDsRED-C1-MGC5306 的构建第39 页
    · 对Hela 细胞进行传代培养第39-40 页
    · Hela 细胞的脂质体瞬时转染(24 孔板/6 孔板)第40 页
    · MGC5306 蛋白的亚细胞结构定位第40-41 页
  · 结果与分析第41-42 页
    · 真核表达载体pDsRed-C1-MGC5306 构建示意图第41 页
    · 真核表达载体pDsRED-C1-MGC5306 的构建及鉴定第41-42 页
    · MGC5306 蛋白在Hela 细胞中的亚细胞结构定位第42 页
  · 讨论第42-43 页
  · 结论第43-44 页
结论第44-45 页
参考文献第45-49 页
附图第49-51 页
致谢第51-52 页
作者简介第52 页

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