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鸡致病性大肠杆菌菌毛免疫原性及其FimA和FimH基因的研究

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鸡致病性大肠杆菌菌毛免疫原性及其FimA和FimH基因的研究
论文目录
 
中文摘要第1-9 页
英文摘要第9-11 页
英文缩略词表第11-12 页
前言 鸡大肠杆菌菌毛研究进展第12-19 页
实验一、山东省鸡致病性大肠杆菌血清型鉴定及其菌毛抗原的分类和提取方法研究第19-27 页
  1、 材料与方法第19-21 页
    1.1 菌株及血清型鉴定第19 页
    1.2 MSHA/MRHA试验第19-20 页
    1.3 菌毛表达试验第20 页
    1.4 菌毛提取第20 页
    1.5 蛋白质含量测定第20-21 页
    1.6 SDS-PAGE第21 页
  2、 结果第21-24 页
  3、 讨论第24-27 页
实验二、鸡致病性大肠杆菌(O_2、O_(24)和O_(78))Ⅰ型菌毛免疫原性研究第27-35 页
  1、 材料与方法第27-30 页
    1.1 材料第27-28 页
      1.1.1 菌种第27 页
      1.1.2 试验动物第27-28 页
      1.1.3 培养基第28 页
    1.2 方法第28-30 页
      1.2.1 细菌培养第28 页
      1.2.2 菌毛提取第28 页
      1.2.3 亚单位苗的制备第28 页
      1.2.4 无菌检验第28 页
      1.2.5 亚单位苗安全性试验第28-29 页
      1.2.6 亚单位免疫效力测定试验第29-30 页
        1.2.6.1 血清型O78一次免疫与二次免疫效果比较第29 页
        1.2.6.2 单价菌毛亚单位油乳苗交叉免疫试验第29 页
        1.2.6.3 多价菌毛亚单位油乳苗免疫试验第29-30 页
  2、 结果第30-33 页
    2.1 提取菌毛的电镜观察及SDS-PAGE第30-31 页
    2.2 亚单位苗无菌检验第31 页
    2.3 亚单位苗安全性检查第31 页
    2.4 亚单位苗免疫力测定第31-33 页
      2.4.1 一次免疫与二次免疫效果比较第31 页
      2.4.2 单价菌毛亚单位油乳苗交叉免疫试验第31 页
      2.4.3 多价菌毛亚单位油乳苗免疫试验第31-33 页
  3、 讨论第33-35 页
实验三、鸡大肠杆菌Ⅰ型菌毛FimA基因的克隆与分析第35-50 页
  1、 材料与方法第35-40 页
    1.1 材料第35-36 页
      1.1.1 试剂第35-36 页
      1.1.2 试验菌株第36 页
      1.1.3 质粒和菌株第36 页
      1.1.4 引物设计第36 页
    1.2 方法第36-40 页
      1.2.1 大肠杆菌基因组DNA的提取第36 页
      1.2.2 PCR法扩增菌毛结构基因FimA第36-37 页
      1.2.3 PCR产物回收纯化第37 页
      1.2.4 连接第37-38 页
      1.2.5 感受态细胞的制备第38 页
      1.2.6 质粒的转化和扩增第38-39 页
      1.2.7 质粒的少量提取第39 页
      1.2.8 重组质粒酶切鉴定第39-40 页
      1.2.9 序列测定第40 页
      1.2.10 序列分析第40 页
  2、 结果第40-42 页
    2.1 PCR法扩增菌毛结构基因FimA第40 页
    2.2 阳性克隆的酶切鉴定第40-42 页
    2.3 序列测定与分析第42 页
    2.4 抗原性图谱分析第42 页
  3、 讨论第42-50 页
实验四、鸡大肠杆菌Ⅰ型菌毛FimH基因的克隆与分析第50-62 页
  1、 材料与方法第50-55 页
    1.1 材料第50-51 页
      1.1.1 试验菌株第50 页
      1.1.2 质粒和菌株第50-51 页
      1.1.3 引物设计第51 页
    1.2 方法第51-55 页
      1.2.1 大肠杆菌基因组DNA的提取第51 页
      1.2.2 PCR法扩增菌毛结构基因FimH第51-52 页
      1.2.3 PCR产物回收纯化第52 页
      1.2.4 连接第52 页
      1.2.5 感受态细胞的制备第52-53 页
      1.2.6 质粒的转化和扩增第53 页
      1.2.7 质粒的少量提取第53-54 页
      1.2.8 重组质粒酶切鉴定第54 页
      1.2.9 序列测定第54-55 页
      1.2.10 序列分析第55 页
  2、 结果第55-57 页
    2.1 PCR法扩增菌毛结构基因FimH第55 页
    2.2 阳性克隆的酶切鉴定第55 页
    2.3 序列测定与分析第55-57 页
  3、 讨论第57-62 页
结论第62-63 页
参考文献第63-72 页
附录第72-75 页
致谢第75-76 页
攻读学位期间发表的论文第76 页

本篇论文共76页,点击这进入下载页面
 
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