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鸡致病性大肠杆菌菌毛免疫原性及其FimA和FimH基因的研究
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鸡致病性大肠杆菌菌毛免疫原性及其FimA和FimH基因的研究
论文目录
中文摘要
第1-9 页
英文摘要
第9-11 页
英文缩略词表
第11-12 页
前言 鸡大肠杆菌菌毛研究进展
第12-19 页
实验一、山东省鸡致病性大肠杆菌血清型鉴定及其菌毛抗原的分类和提取方法研究
第19-27 页
1、 材料与方法
第19-21 页
1.1 菌株及血清型鉴定
第19 页
1.2 MSHA/MRHA试验
第19-20 页
1.3 菌毛表达试验
第20 页
1.4 菌毛提取
第20 页
1.5 蛋白质含量测定
第20-21 页
1.6 SDS-PAGE
第21 页
2、 结果
第21-24 页
3、 讨论
第24-27 页
实验二、鸡致病性大肠杆菌(O_2、O_(24)和O_(78))Ⅰ型菌毛免疫原性研究
第27-35 页
1、 材料与方法
第27-30 页
1.1 材料
第27-28 页
1.1.1 菌种
第27 页
1.1.2 试验动物
第27-28 页
1.1.3 培养基
第28 页
1.2 方法
第28-30 页
1.2.1 细菌培养
第28 页
1.2.2 菌毛提取
第28 页
1.2.3 亚单位苗的制备
第28 页
1.2.4 无菌检验
第28 页
1.2.5 亚单位苗安全性试验
第28-29 页
1.2.6 亚单位免疫效力测定试验
第29-30 页
1.2.6.1 血清型O78一次免疫与二次免疫效果比较
第29 页
1.2.6.2 单价菌毛亚单位油乳苗交叉免疫试验
第29 页
1.2.6.3 多价菌毛亚单位油乳苗免疫试验
第29-30 页
2、 结果
第30-33 页
2.1 提取菌毛的电镜观察及SDS-PAGE
第30-31 页
2.2 亚单位苗无菌检验
第31 页
2.3 亚单位苗安全性检查
第31 页
2.4 亚单位苗免疫力测定
第31-33 页
2.4.1 一次免疫与二次免疫效果比较
第31 页
2.4.2 单价菌毛亚单位油乳苗交叉免疫试验
第31 页
2.4.3 多价菌毛亚单位油乳苗免疫试验
第31-33 页
3、 讨论
第33-35 页
实验三、鸡大肠杆菌Ⅰ型菌毛FimA基因的克隆与分析
第35-50 页
1、 材料与方法
第35-40 页
1.1 材料
第35-36 页
1.1.1 试剂
第35-36 页
1.1.2 试验菌株
第36 页
1.1.3 质粒和菌株
第36 页
1.1.4 引物设计
第36 页
1.2 方法
第36-40 页
1.2.1 大肠杆菌基因组DNA的提取
第36 页
1.2.2 PCR法扩增菌毛结构基因FimA
第36-37 页
1.2.3 PCR产物回收纯化
第37 页
1.2.4 连接
第37-38 页
1.2.5 感受态细胞的制备
第38 页
1.2.6 质粒的转化和扩增
第38-39 页
1.2.7 质粒的少量提取
第39 页
1.2.8 重组质粒酶切鉴定
第39-40 页
1.2.9 序列测定
第40 页
1.2.10 序列分析
第40 页
2、 结果
第40-42 页
2.1 PCR法扩增菌毛结构基因FimA
第40 页
2.2 阳性克隆的酶切鉴定
第40-42 页
2.3 序列测定与分析
第42 页
2.4 抗原性图谱分析
第42 页
3、 讨论
第42-50 页
实验四、鸡大肠杆菌Ⅰ型菌毛FimH基因的克隆与分析
第50-62 页
1、 材料与方法
第50-55 页
1.1 材料
第50-51 页
1.1.1 试验菌株
第50 页
1.1.2 质粒和菌株
第50-51 页
1.1.3 引物设计
第51 页
1.2 方法
第51-55 页
1.2.1 大肠杆菌基因组DNA的提取
第51 页
1.2.2 PCR法扩增菌毛结构基因FimH
第51-52 页
1.2.3 PCR产物回收纯化
第52 页
1.2.4 连接
第52 页
1.2.5 感受态细胞的制备
第52-53 页
1.2.6 质粒的转化和扩增
第53 页
1.2.7 质粒的少量提取
第53-54 页
1.2.8 重组质粒酶切鉴定
第54 页
1.2.9 序列测定
第54-55 页
1.2.10 序列分析
第55 页
2、 结果
第55-57 页
2.1 PCR法扩增菌毛结构基因FimH
第55 页
2.2 阳性克隆的酶切鉴定
第55 页
2.3 序列测定与分析
第55-57 页
3、 讨论
第57-62 页
结论
第62-63 页
参考文献
第63-72 页
附录
第72-75 页
致谢
第75-76 页
攻读学位期间发表的论文
第76 页
本篇论文共
76
页,
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。
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