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传染性法氏囊病病毒山东株的分离鉴定及其鸡胚毒的免疫效果

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传染性法氏囊病病毒山东株的分离鉴定及其鸡胚毒的免疫效果
论文目录
 
一、中文摘要第1-10 页
二、英文摘要第10-12 页
三、缩略语英汉对照表第12-13 页
四、引言第13-24 页
  1.1 概述第13 页
  1.2 IBDV的病原特性第13-14 页
  1.3 流行病学第14-16 页
    1.3.1 自然宿主第14-15 页
    1.3.2 传播媒介第15 页
    1.3.3 潜伏期和症状第15-16 页
    1.3.4 发病率和死亡率第16 页
  1.4 血清型第16 页
  1.5 IBDV的抵抗力第16-17 页
  1.6 致病机理第17-18 页
  1.7 免疫抑制第18 页
  1.8 VP2蛋白及其功能第18-20 页
  1.9 IBDV的变异第20-21 页
  1.10 诊断第21 页
  1.11 预防与控制第21-24 页
五、研究内容第24-57 页
  试验一 IBDV野毒株的分离鉴定第24-28 页
    1 材料和方法第24-25 页
      1.1 IBDV原始病料第24 页
      1.2 IBDV琼脂免疫扩散试验(AGID)标准抗原及血清第24 页
      1.3 SPF鸡胚和SPF鸡第24 页
      1.4 免疫胶体金试纸膜第24 页
      1.5 病毒的处理第24 页
      1.6 病毒的分离第24-25 页
      1.7 琼脂免疫扩散试验第25 页
        1.7.1 琼脂板的制备第25 页
        1.7.2 琼脂免疫扩散试验步骤第25 页
      1.8 免疫胶体金试纸膜检测IBDV第25 页
      1.9 分离株致病性的测定第25 页
      1.10 病理组织学观察第25 页
    2 结果第25-27 页
      2.1 发病鸡的临床症状及流行病学第25-26 页
      2.2 病毒分离结果第26 页
      2.3 琼脂扩散试验第26 页
      2.4 免疫胶体金试纸膜检测结果第26 页
      2.5 动物回归试验结果第26 页
      2.6 组织病理学观察第26-27 页
    3 讨论第27-28 页
  实验二 IBDV SD0306 VP2基因高变区的克隆与序列分析第28-42 页
    1 材料第28-29 页
      1.1 病毒第28 页
      1.2 菌种第28 页
      1.3 试剂第28 页
      1.4 溶液配制第28-29 页
        1.4.1 DEPC-H_2O第28 页
        1.4.2 100mg/mL氨苄霉素第28 页
        1.4.3 LB培养液(基)第28-29 页
        1.4.4 SOB培养基第29 页
        1.4.5 SOC培养基第29 页
    2 方法第29-35 页
      2.1 野毒株原代毒核酸RNA的提取第29-30 页
      2.2 VP2高变区的扩增第30-31 页
        2.2.1 引物的设计与合成第30 页
        2.2.2 RT-PCR第30 页
        2.2.3 Nested-PCR第30-31 页
        2.2.4 PCR扩增鉴定第31 页
      2.3 PCR产物的回收第31 页
      2.4 VP2高变区的克隆与鉴定第31-33 页
        2.4.1 PCR产物与pMD18-T vector的连接第32 页
        2.4.2 感受态细胞的制备——氯化钙法第32-33 页
        2.4.3 连接产物的转化第33 页
      2.5 重组质粒的提取与鉴定第33-35 页
        2.5.1 SDS碱裂解法小量提取质粒第33-35 页
        2.5.2 重组质粒的琼脂糖凝胶电泳鉴定第35 页
        2.5.3 重组质粒的双酶切鉴定第35 页
      2.6 阳性质粒测序与序列分析第35 页
    3 结果第35-41 页
      3.1 RT-PCR结果第35-36 页
      3.2 目的基因的克隆和测序第36-41 页
        3.2.1 重组质粒的酶切鉴定第36-37 页
        3.2.2 序列分析第37-41 页
    4 讨论第41-42 页
  试验三 IBDV SD0306在SPF鸡胚上的传代致弱第42-51 页
    1 材料和方法第42-43 页
      1.1 病毒第42 页
      1.2 SPF鸡胚和SPF鸡第42 页
      1.3 克隆与测序试剂及受体菌第42 页
      1.4 IBDV SD0306在SPF在鸡胚上的传代第42 页
      1.5 E11及E15 EID_(50)的测定第42-43 页
      1.6 鸡胚毒回归SPF鸡试验第43 页
      1.7 鸡胚毒VP2高变区的克隆与序列分析第43 页
    2 结果第43-49 页
      2.1 IBDV SD0306在SPF鸡胚上的增殖第43 页
      2.2 E11、E15鸡胚的EID_(50)第43 页
      2.3 动物回归试验第43-44 页
      2.4 IBDV SD0306鸡胚毒VP2基因高变区的序列分析结果第44-49 页
    3 讨论第49-51 页
  试验四 IBDV鸡胚毒免疫效果的研究第51-57 页
    1 材料与方法第51-52 页
      1.1 实验材料第51 页
      1.2 实验分组第51 页
      1.3 母源抗体水平和免疫后抗体效价的检测第51 页
      1.4 计算免疫器官指数及观察病理组织切片第51-52 页
      1.5 人工感染用毒株及攻毒途径第52 页
      1.6 统计学分析第52 页
    2 结果第52-55 页
      2.1 母源抗体水平与免疫后的IBDV抗体效价第52-53 页
      2.2 疫苗免疫后对免疫器官的影响第53-54 页
        2.2.1 囊重比与囊指数第53-54 页
        2.2.2 免疫器官的组织损伤第54 页
      2.3 NDV抗体水平的检测结果第54 页
      2.4 E15对攻毒的免疫保护作用第54-55 页
    3 讨论第55-57 页
六、结论第57-58 页
七、参考文献第58-69 页
八、致谢第69-70 页
九、攻读学位期间发表论文情况第70-71 页
十、附图第71-75 页

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