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植酸酶构象稳定性与催化活性的关系及抑制动力学研究

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植酸酶构象稳定性与催化活性的关系及抑制动力学研究
论文目录
 
摘要第1-8 页
ABSTRACT第8-11 页
英文缩略表第11-12 页
1 引言第12-19 页
  1.1 植酸酶的结构第13-14 页
  1.2 二硫键对蛋白质作用的研究现状第14-15 页
  1.3 寡糖链对蛋白质作用的研究进展第15-16 页
  1.4 植酸酶热稳定研究进展第16-17 页
  1.5 植酸酶酶活调解因子第17-18 页
  1.6 本研究的目的意义第18-19 页
2 材料与方法第19-23 页
  2.1 材料与仪器第19 页
    2.1.1 试验材料第19 页
    2.1.2 主要试剂与仪器第19 页
  2.2 试验方法第19-23 页
    2.2.1 植酸酶的分离与纯化第19 页
    2.2.2 蛋白质含量的测定第19-20 页
    2.2.3 植酸酶的变性和复性第20 页
    2.2.4 植酸酶的去糖基化第20 页
    2.2.5 金属离子对植酸酶的作用第20 页
    2.2.6 磷酸盐和钒酸盐对植酸酶的抑制作用第20-21 页
    2.2.7 植酸酶活力的测定方法第21-22 页
    2.2.8 荧光光谱和CD光谱的测定第22 页
    2.2.9 样品的DSC测定第22-23 页
3 结果与分析第23-46 页
  3.1 二硫键对植酸酶催化活性和构象的影响第23-27 页
    3.1.1 植酸酶于存在和不存在DTT的pH5.6和pH8.3缓冲液中复性第23-24 页
    3.1.2 植酸酶在有无还原剂DTT的pH 5.6和pH 8.3缓冲液中复性时构象的变化第24-27 页
      3.1.2.1 荧光光谱的变化第24-25 页
      3.1.2.2 CD光谱的变化第25-27 页
  3.2 去糖基化对植酸酶的稳定性的影响第27-31 页
    3.2.1 去糖基化对植酸酶变性温度的影响第27-28 页
    3.2.2 糖基化对植酸酶热稳定性的影响第28-29 页
    3:2.3 糖基化对植酸酶构象的影响第29-30 页
    3.2.4 糖基化对植酸酶的抗胰蛋白酶和胃蛋白酶的影响第30-31 页
  3.3 金属离子对植酸酶催化活性和构象的影响第31-37 页
    3.3.1 Mg~(2+)对植酸酶催化活性和热稳定性的作用第31-32 页
    3.3.2 Mg~(2+)对植酸酶构象的影响第32-35 页
    3.3.3 Mg~(2+)对植酸酶热变性温度的影响第35 页
    3.3.4 Cu~(2+)和Zn~(2+)对植酸酶的影响第35-37 页
  3.5 植酸对植酸酶的抑制作用第37-41 页
    3.5.1 植酸浓度对植酸酶活性的影响第37-38 页
    3.5.2 植酸抑制参数的测定第38-41 页
  3.6 钒酸盐对植酸酶的影响第41-43 页
  3.7 以pNPP为底物,磷酸盐及钒酸盐对植酸酶的影响第43-46 页
4 讨论第46-51 页
  4.1 二硫键对植酸酶构象、催化活性的作用第46-47 页
  4.2 去糖基化对植酸酶作用的探讨第47-48 页
  4.3 植酸酶的激活和抑制机理第48-50 页
  4.4 尚待进一步研究的问题第50-51 页
5 结论第51-52 页
参考文献第52-61 页
致谢第61-62 页
攻读学位期间发表的学术论文第62 页

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