论文目录 | |
摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
第一章 绪论 | 第10-34页 |
1 细胞内氧化还原状态平衡的生理学意义及检测方法简介 | 第10-32页 |
· 细胞内氧化还原状态平衡的生物学意义 | 第10-11页 |
· 还原性物质(硫醇)的荧光检测方法简介 | 第11-20页 |
· 细胞内活性氧自由基(H2O2)的荧光检测方法简介 | 第20-28页 |
· 用于可逆检测细胞内氧化还原状态的荧光探针的简介 | 第28-32页 |
2 氧化还原状态变化与肿瘤细胞凋亡研究 | 第32-34页 |
第二章 用于可逆检测活细胞内氧化还原状态变化的近红外荧光探针的设计合成及细胞成像 | 第34-58页 |
1 引言 | 第34-35页 |
2 实验部分 | 第35-42页 |
· 仪器与试剂 | 第35-36页 |
· 试剂纯化 | 第36-37页 |
· 探针 Cy-O-ebselen 的合成路线 | 第37页 |
· 羟基依卟硒啉(Ebselen-OH)的合成与表征 | 第37-38页 |
· 探针 Cy-O-ebselen 的合成与表征[110] | 第38-39页 |
· 探针光谱性质的测定 | 第39页 |
· 探针的荧光量子产率(Φμ)的测量 | 第39-40页 |
· 干扰物种的配制方法 | 第40页 |
· 探针选择性的测定 | 第40页 |
· 探针与巯基类物质反应活性的测定 | 第40页 |
· 细胞培养和共聚焦成像 | 第40-41页 |
· 探针的光漂白实验 | 第41页 |
· 探针用于细胞内线粒体的定位 | 第41页 |
· 细胞毒性实验 | 第41-42页 |
3 结果与讨论 | 第42-57页 |
· 探针的光谱性质 | 第42页 |
· pH 值对探针反应的影响 | 第42-43页 |
· 探针对 GSH 和 H2O2的响应 | 第43-44页 |
· 探针的可逆性与反应的动力学曲线 | 第44-45页 |
· 利用质谱对探针与 GSH 和 H2O2反应过程中间产物的验证 | 第45-48页 |
· 探针选择性实验 | 第48-50页 |
· 探针与巯基类物质的反应活性 | 第50页 |
· 探针的毒性实验 | 第50-53页 |
· 检测细胞内的 GSH 以及多个氧化还原循环的荧光成像 | 第53-55页 |
· 探针定位线粒体的实验 | 第55页 |
· 探针的光漂白实验 | 第55-57页 |
· 结论 | 第57-58页 |
第三章 利用可逆探针研究氧化还原状态变化对肿瘤细胞凋亡过程的影响 | 第58-69页 |
1 引言 | 第58-60页 |
2 材料与方法 | 第60-63页 |
· 仪器与试剂 | 第60-61页 |
· 细胞培养和共聚焦成像 | 第61页 |
· Cy-O-ebselen 用于实时监测由氧化还原状态的改变引起的 HepG2 和 HL-7702 细胞凋亡过程 | 第61页 |
· Cy-O-ebselen 用于 HepG2 细胞可逆凋亡过程中氧化还原状态变化的检测 | 第61页 |
· DAPI对 HepG2 细胞凋亡逆转过程中细胞核的染色 | 第61-62页 |
· 罗丹明 123 对 HepG2细胞凋亡过程中线粒体膜电位的测定 | 第62页 |
· Western-blot 检测 HepG2 中细胞色素 C 和 caspase-3 在凋亡过程的表达 | 第62-63页 |
3 结果与讨论 | 第63-68页 |
· Cy-O-ebselen 探针原位可视化检测 HepG2 和 HL-7702 细胞可逆凋亡过程 | 第63-64页 |
· 用 Cy-O-ebselen 探针可视化检测 HepG2 细胞可逆凋亡过程 | 第64-66页 |
· HepG2 细胞凋亡过程中细胞核的变化 | 第66页 |
· 罗丹明 123 对 HepG2细胞线粒体膜电位(ΔΨ)的检测 | 第66-67页 |
· HepG2 细胞可逆凋亡过程中细胞色素 C 和 caspase-3 表达的检测 | 第67-68页 |
4 结论 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-79页 |
附 合成产物谱图 | 第79-83页 |
作者发表的学术论文及参加课题 | 第83-84页 |
致谢 | 第84页 |