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脑心肌炎病毒2C蛋白抑制IFN-β信号通路

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脑心肌炎病毒2C蛋白抑制IFN-β信号通路
论文目录
 
摘要第1-9页
ABSTRACT第9-11页
绪论第11-12页
第一章 脑心肌炎病毒研究进展第12-28页
1 病毒分类第12-13页
2 病毒生物学特性第13-17页
  2.1 理化特性第13-14页
  2.2 培养特性第14页
  2.3 基因组结构及编码蛋白第14-17页
3 致病机理第17-18页
4 反向遗传技术第18-21页
参考文献第21-28页
第二章 I型干扰素信号通路研究进展第28-40页
1 干扰素的分类第28页
2 I型干扰素的产生及其转导机理第28-31页
3 微RNA科病毒逃避宿主先天性免疫应答机制第31-34页
参考文献第34-40页
第三章 I型干扰素信号通路重要分子的克隆与表达第40-52页
1 材料与方法第40-45页
  1.1 菌株,细胞及载体第40-41页
  1.2 主要试剂第41页
  1.3 I型干扰素信号通路重要分子表达质粒的构建与鉴定第41-45页
    1.3.1 1RNA的提取及cDNA的合成第41页
    1.3.2 PCR扩增及产物回收及纯化第41-43页
    1.3.3 片段与载体的酶切、连接及转化第43页
    1.3.4 质粒的提取第43-44页
    1.3.5 重组质粒双酶切及测序鉴定第44页
    1.3.6 质粒转染第44页
    1.3.7 Western blot第44-45页
2 结果第45-46页
  2.1 目的片段PCR扩增第45页
  2.2 重组质粒双酶切及测序鉴定第45-46页
  2.3 Western blot鉴定第46页
3 讨论第46-48页
参考文献第48-52页
第四章 脑心肌炎病毒2C蛋白对IFN-β信号通路的影响第52-72页
1 材料与方法第53-57页
  1.1 菌株,细胞及载体第53页
  1.2 主要试剂第53页
  1.3 双荧光素酶报告基因检测系统试验第53-54页
  1.4 荧光定量PCR检测方法第54-55页
  1.5 免疫共沉淀实验第55页
  1.6 EMCV非结构蛋白及2C截短体重组质粒的构建第55-57页
    1.6.1 PCR扩增及产物回收及纯化第55-57页
    1.6.2 片段与载体的连接及转化第57页
    1.6.3 重组质粒双酶切鉴定第57页
2 结果第57-64页
  2.1 EMCV非结构蛋白PCR扩增及表达质粒的构建与鉴定第57-58页
  2.2 2C截短基因PCR扩增及其截短体的构建与鉴定第58-59页
  2.3 EMCV非结构蛋白抑制IFN-β活性比较第59-60页
  2.4 2C蛋白对IFN-β产生及效应基因转录水平的影响第60-61页
  2.5 比较2C蛋白与IFN-β信号通路分子互作对IFN-β启动子活性影响第61-62页
  2.6 2C蛋白与MDA5在293A细胞中存在互作第62-63页
  2.7 N端1-31位氨基酸介导2C抑制I型IFN-β产生第63-64页
3 讨论第64-67页
参考文献第67-72页
第五章 表达猪圆环病毒2型ORF2基因的重组脑心肌炎病毒的构建与鉴定第72-86页
1 材料与方法第73-76页
  1.1 菌株,细胞及载体第73页
  1.2 主要试剂第73页
  1.3 感染性cDNA克隆质粒pCMV rNJ08/cap的构建第73-74页
  1.4 病毒拯救第74页
  1.5 分子遗传标记鉴定第74-75页
  1.6 Western Blot第75页
  1.7 间接免疫荧光试验(IFA)第75页
  1.8 病毒生长曲线第75-76页
  1.9 病毒蚀斑试验第76页
  1.10 病毒稳定性鉴定第76页
2 结果第76-80页
  2.1 质粒构建和病毒拯救第76-77页
    2.1.1 pCMV rNJ08/Cap第76页
    2.1.2 病毒拯救第76-77页
  2.2 拯救病毒分子遗传标记鉴定第77页
  2.3 Western Blot第77-78页
  2.4 间接免疫荧光试验(IFA)第78页
  2.5 病毒生长曲线第78-79页
  2.6 病毒蚀斑试验第79页
  2.7 病毒稳定性鉴定第79-80页
3 讨论第80-82页
参考文献第82-86页
全文总结第86-88页
致谢第88-90页
在读期间发表论文第90页

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