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罗非鱼源无乳链球菌灭活苗免疫效果的研究和XtgS基因缺失株的构建及特性分析

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罗非鱼源无乳链球菌灭活苗免疫效果的研究和XtgS基因缺失株的构建及特性分析
论文目录
 
摘要第1-10页
ABSTRACT第10-13页
缩略词第13-15页
第一篇 文献综述第15-23页
第一章 无乳链球菌的研究进展第15-21页
1 病原学第15页
2 流行病学第15-16页
3 毒力因子(virulent factor)第16页
4 疫苗的防控第16-21页
  4.1 无乳链球菌疫苗的种类第16-19页
    4.1.1 灭活疫苗第16-17页
    4.1.2 弱毒疫苗第17页
    4.1.3 重组疫苗第17-18页
    4.1.4 DNA疫苗第18-19页
  4.2 疫苗的免疫接种方式第19页
  4.3 佐剂的影响第19-20页
  4.4 其余影响疫苗效果的因素第20页
  4.5 结论第20-21页
第二章 DNA结合蛋白的研究进展第21-23页
1 蛋白结构的预测手段第21页
2 DBP的结构类型第21-22页
3 DBP的功能第22页
4 结论第22-23页
第二篇 试验研究第23-71页
第三章 罗非鱼源无乳链球菌灭活苗免疫效果的研究第23-39页
1 材料与方法第24-27页
  1.1 试验材料第24-25页
    1.1.1 菌株第24页
    1.1.2 主要试剂第24页
    1.1.3 主要仪器第24页
    1.1.4 试验用鱼第24-25页
  1.2 试验方法第25-27页
    1.2.1 菌株的活化及形态观察第25页
    1.2.2 生化试验第25页
    1.2.3 毒力LD_(50)测定第25页
    1.2.4 疫苗的研制第25-26页
    1.2.5 疫苗的安全性试验第26页
    1.2.6 灭活苗对罗非鱼的免疫攻毒试验第26页
    1.2.7 灭活苗免疫罗非鱼后的样品采集第26页
    1.2.8 肝脏酶活检测第26页
    1.2.9 RT-PCR第26-27页
2 结果与分析第27-35页
  2.1 形态观察第27-28页
  2.2 菌株鉴定第28-30页
  2.3 毒力LD_(50)的计算第30-31页
  2.4 疫苗的研制第31页
    2.4.1 纯粹检查结果第31页
    2.4.2 活菌检查结果第31页
  2.5 疫苗安全性的检查结果第31页
  2.6 疫苗有效性检测结果第31-33页
  2.7 肝脏酶活指标的计算第33-35页
    2.7.1 各酶活指标(SOD、LZM、T-AOC及CAT)的计算第33-34页
    2.7.2 丙二醛(MDA)的计算第34-35页
  2.8 RT-PCR的结果第35页
3 讨论第35-37页
4 结论第37-39页
第四章 无乳链球菌GD201008-001DNA结合蛋白XtgS缺失株的构建及其生物学特性分析第39-59页
1 材料与方法第40-46页
  1.1 试验材料第40-42页
    1.1.1 菌株、质粒与引物第40-41页
    1.1.2 主要试剂与仪器第41-42页
    1.1.3 分子生物学软件第42页
    1.1.4 试验动物第42页
  1.2 XtgS基因缺失质粒的构建第42-43页
  1.3 感受态细胞的制备第43页
  1.4 电转化第43页
  1.5 缺失株的筛选第43-44页
  1.6 Real-time PCR分析第44页
  1.7 △XtgS缺失株和野生株生物学性状的比较第44-46页
    1.7.1 遗传稳定性分析与形态学比较第44页
    1.7.2 生长曲线的测定第44页
    1.7.3 最小抑菌浓度(MIC)的测定第44-45页
    1.7.4 细胞粘附试验第45页
    1.7.5 全血存活的比较第45页
    1.7.6 死亡曲线的测定第45页
    1.7.7 脏器分布及部分炎性细胞因子的测定第45-46页
2 结果与分析第46-54页
  2.1 缺失株的构建与鉴定第46-47页
  2.2 荧光定量第47-48页
  2.3 △XtgS缺失株和野生株生物学性状的比较第48-54页
    2.3.1 遗传稳定性分析与形态学比较第48-49页
    2.3.2 生长曲线的比较第49-50页
    2.3.3 最小抑菌浓度(MIC)第50页
    2.3.4 粘附试验第50-51页
    2.3.5 全血存活的计算第51-52页
    2.3.6 死亡曲线的比较第52-53页
    2.3.7 脏器分布第53-54页
    2.3.8 血清炎性细胞因子的比较第54页
3 讨论第54-59页
第五章 无乳链球菌鱼源株GD201008-001和人源株A909特性的比较第59-71页
1 材料与方法第59-61页
  1.1 试验材料第59-60页
    1.1.1 菌株第59-60页
    1.1.2 主要试剂与仪器第60页
    1.1.3 试验动物第60页
    1.1.4 分子生物学软件第60页
  1.2 试验方法第60-61页
    1.2.1 形态学比较第60页
    1.2.2 生化试验第60页
    1.2.3 生长曲线的测定第60页
    1.2.4 全血存活的测定第60-61页
    1.2.5 脏器分布的测定第61页
    1.2.6 斑马鱼LD50的测定第61页
    1.2.7 组织切片的准备及切片的观察第61页
2 结果与分析第61-66页
  2.1 形态观察结果第61-62页
  2.2 生化鉴定第62-63页
  2.3 生长曲线的比较第63-64页
  2.4 脏器分布第64页
  2.5 全血存活试验第64-65页
  2.6 斑马鱼LD50的计算第65-66页
  2.7 切片的观察比较第66页
3 讨论第66-71页
参考文献第71-83页
全文总结第83-85页
致谢第85-87页
硕士期间发表的论文第87页

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