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猪链球菌2型宿主结合蛋白的鉴定及免疫保护力分析

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猪链球菌2型宿主结合蛋白的鉴定及免疫保护力分析
论文目录
 
摘要第1-9页
ABSTRACT第9-12页
英文缩略词表第12-14页
绪论第14-16页
第一篇 文献综述第16-30页
第一章 猪链球菌概述及宿主结合蛋白研究进展第16-30页
1 猪链球菌概述第16-17页
  1.1 猪链球菌病原学与血清分型第16页
  1.2 猪链球菌流行病学第16-17页
2 细胞外基质与细胞外基质结合蛋白第17-21页
  2.1 纤连蛋白与纤连蛋白结合蛋白第18-19页
  2.2 层粘连蛋白与层粘连蛋白结合蛋白第19页
  2.3 FN/LN结合蛋白在其他细菌上的免疫保护力研究第19-21页
3 猪链球菌疫苗研究进展第21-26页
  3.1 全菌苗第21-22页
  3.2 母源性被动免疫第22页
  3.3 减毒活疫苗第22-23页
  3.4 亚单位疫苗第23-26页
4 FH和FHBPs的研究进展第26-30页
  4.1 补体系统替代途径概述第26-27页
  4.2 FH和FHBPs的研究进展第27-30页
第二篇 试验研究第30-62页
第二章 猪链球菌FN/LN结合蛋白的重组表达与纯化第30-38页
1 材料与方法第31-34页
  1.1 菌株与质粒第31页
  1.2 主要试剂与仪器第31-32页
  1.3 细菌培养与基因组提取第32页
  1.4 引物设计与表达菌株构建第32-33页
  1.5 诱导表达与蛋白纯化第33页
  1.6 多克隆抗体制备及抗体效价检测第33-34页
2 结果第34-36页
  2.1 ef-tu,ldh,fba,enolase,kar和oppa基因表达菌株的获得第34-35页
  2.2 亲和层析技术纯化得到HIS标签融合蛋白第35-36页
3 讨论第36-38页
第三章 重组FN/LN结合蛋白的体外特性分析第38-44页
1 材料与方法第39-40页
  1.1 菌株及生物材料第39页
  1.2 主要试剂及主要仪器第39页
  1.3 全血存活试验评价蛋白在细菌抗杀伤过程中的作用第39页
  1.4 蛋白EF-Tu、FBA和LDH的免疫原性分析第39-40页
2 结果第40-42页
  2.1 EF-Tu、FBA和LDH抗血清明显降低了SS2在全血中的存活第40-41页
  2.2 重组蛋白EF-Tu、FBA和LDH具有良好的免疫原性第41-42页
3 讨论第42-44页
第四章 重组蛋白在两种品系小鼠模型上的保护性评价第44-52页
1 材料与方法第45-46页
  1.1 菌株与生物材料第45页
  1.2 主要试剂与主要仪器第45页
  1.3 BALB/c和ICR小鼠免疫第45-46页
  1.4 抗体效价测定第46页
  1.5 小鼠攻毒试验第46页
2 结果第46-49页
  2.1 重组蛋白诱导机体产生较高水平的抗体滴度第46-48页
  2.2 重组蛋白的动物保护力评价第48-49页
3 讨论第49-52页
第五章 结合宿主FH的SS分泌蛋白筛选及初步功能研究第52-62页
1 材料与方法第53-57页
  1.1 菌株第53页
  1.2 主要试剂与仪器第53-54页
  1.3 ZY05719分泌蛋白提取第54页
  1.4 等电聚焦分析第54-55页
  1.5 SDS-PAGE第55页
  1.6 MALDI-TOF-MS鉴定蛋白质斑点第55页
  1.7 FHBPs蛋白纯化及多抗制备第55-57页
  1.8 间接免疫荧光试验分析FHBPs与细胞的结合特性第57页
2 结果第57-61页
  2.1 运用2D-Far-Western blotting的实验方法筛选到3种FHBPs第57-58页
  2.2 成功构建得到3个蛋白的表达菌株并纯化得到融合蛋白第58-59页
  2.3 EXO、HDH和Hp07325粘附HEp-2细胞和bEnd.3细胞第59-61页
3 讨论第61-62页
全文总结第62-64页
参考文献第64-82页
致谢第82-84页
发表及待发表文章第84页

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猪链球菌2型 ECM FN/LN结合蛋白 亚单位疫苗 FHBPs
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