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梨褐皮芽变果皮多胺代谢与相关基因克隆表达及pBll21-SPMS转化载体构建
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梨褐皮芽变果皮多胺代谢与相关基因克隆表达及pBll21-SPMS转化载体构建
论文目录
摘要
第1-5页
Abstract
第5-9页
1 文献综述
第9-15页
· 梨果皮褐色研究进展
第9-10页
· 多胺研究进展
第10-13页
· 多胺的生物合成与降解代谢途径
第10-12页
· 多胺合成过程中相关酶基因研究进展
第12-13页
· 转基因研究进展
第13-15页
2 引言
第15-17页
· 研究目的和意义
第15页
· 研究的内容
第15-16页
· 技术路线
第16-17页
3 材料与方法
第17-31页
· 试验材料
第17页
· 试验仪器
第17页
· 主要试剂
第17-18页
· RNA提取试剂
第17页
· PCR反应体系及酶切所需试剂
第17-18页
· 琼脂糖电泳试剂
第18页
· 菌株及载体
第18页
· 试验方法
第18-31页
· 多胺含量的测定
第18-19页
· 梨皮中总RNA的提取以及质量检测
第19-20页
· 总RNA的提取
第19-20页
· 总RNA的检测
第20页
· 总RNA反转录成cDNA与其浓度的测定
第20页
· 多胺合成相关基因的克隆与生物信息学分析
第20-23页
· 多胺合成相关基因的克隆
第20-23页
· 多胺合成相关基因生物信息学分析
第23页
· 多胺合成相关基因表达分析
第23-24页
· 梨多胺SPMS基因载体的构建
第24-28页
· 多胺SPMS基因全长的获得
第24页
· SPMS基因加入酶切位点及保护碱基
第24-25页
· DNA片段回收,连接与转化
第25页
· SPMS基因菌液PCR检测
第25-26页
· PGEM-T-SPMS测序鉴定
第26页
· pBll21的活化
第26页
· PGEM-T-SPMS及pBll21质粒的抽提
第26页
· pBll21及PGEM-T-SPMS质粒的酶切
第26-27页
· 连接
第27页
· pBll21-SPMS连接产物的转化大肠杆菌
第27-28页
· pBll21-SPMS菌液检测与酶切验证
第28页
· 根癌农杆菌EHA105感受态细胞的制备与转化
第28-29页
· YEB培养基与拟南芥营养液的配置
第28-29页
· 根癌农杆菌EHA105感受态细胞的制备
第29页
· 转化农杆菌
第29页
· 拟南芥的栽培及转化
第29-31页
· 拟南芥播种及管理
第29-30页
· 农杆菌介导的拟南芥转化
第30-31页
4 结果与分析
第31-46页
· ‘砀山酥梨’与‘锈酥’果皮中三种多胺含量
第31-33页
· 总RNA的提取及cDNA检测
第33-34页
· 总RNA的检测
第33页
· cDNA浓度的检测
第33-34页
· 多胺合成中相关基因的克隆与表达分析
第34-41页
· 多胺合成过程中相关酶基因克隆及生物信息学分析
第34-40页
· 多胺合成中相关基因的表达分析
第40-41页
· SPMS基因表达载体构建
第41-46页
· 加入酶切位点后所获基因全长
第41-42页
· PGEM-T-SPMS菌液检测及酶切验证
第42-43页
· 表达载体的制备
第43-44页
· 重组子pBll21-SPMS菌液PCR检测
第44页
· 重组子pBll21-SPMS酶切验证
第44-45页
· 转化农杆菌EHA105
第45-46页
5 讨论
第46-48页
· 木质素或木栓质与果皮褐色的关系
第46页
· 多胺与木质素或木栓质的关系
第46-48页
6 结论
第48-49页
参考文献
第49-54页
致谢
第54-55页
作者简介
第55页
本篇论文共
55
页,
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