论文目录 | |
摘要 | 第1-11页 |
主要符号表 | 第11-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-26页 |
1 棉花细胞质雄性不育的研究进展 | 第12-14页 |
· 细胞学研究 | 第12-13页 |
· 生理生化研究 | 第13-14页 |
· 分子水平研究 | 第14页 |
2 细胞质雄性不育与细胞凋亡 | 第14-16页 |
· 细胞凋亡过程 | 第15页 |
· 植物生殖生长过程中的细胞凋亡 | 第15-16页 |
· 绒毡层细胞的降解 | 第16页 |
· 绒毡层与细胞质雄性不育 | 第16页 |
3 细胞质雄性不育与活性氧 | 第16-20页 |
· 活性氧的产生 | 第17-19页 |
· 活性氧诱导细胞发生凋亡 | 第19-20页 |
· 活性氧的防御与清除机制 | 第20页 |
· 活性氧与细胞质雄性不育 | 第20页 |
4 交替氧化酶(AOX)的研究进展 | 第20-24页 |
· AOX的结构 | 第21页 |
· AOX1基因的克隆 | 第21-22页 |
· 交替氧化酶的功能 | 第22-24页 |
· AOX与能量代谢 | 第22页 |
· AOX与活性氧 | 第22-23页 |
· AOX与细胞凋亡 | 第23-24页 |
5 本研究的目的意义 | 第24-25页 |
6 技术路线 | 第25-26页 |
第二章 棉花细胞质雄性不育生理生化研究 | 第26-34页 |
1 材料与方法 | 第26-29页 |
· 材料 | 第26页 |
· 花蕾的采集 | 第26页 |
· 实验仪器与主要试剂 | 第26-27页 |
· 过氧化氢含量测定试剂 | 第26页 |
· 丙二醛含量测定试剂 | 第26-27页 |
· 类胡萝卜素含量测定试剂 | 第27页 |
· 实验仪器 | 第27页 |
· 实验方法 | 第27-29页 |
· 过氧化氢含量测定 | 第27-28页 |
· 丙二醛含量测定 | 第28页 |
· 类胡萝卜素含量测定 | 第28-29页 |
2 结果与分析 | 第29-32页 |
· 棉花晋A不育系败育过程中活性氧指标的变化 | 第29-30页 |
· 棉花亚棉A不育系败育过程中活性氧指标的变化 | 第30-31页 |
· 棉花晋A不育系败育过程中类胡萝卜素含量的变化 | 第31-32页 |
· 棉花亚棉A不育系败育过程中类胡萝卜素含量的变化 | 第32页 |
3 讨论 | 第32-34页 |
· 活性氧物质代谢失调与细胞质雄性不育 | 第32页 |
· 活性氧清除系统紊乱与细胞质雄性不育 | 第32-34页 |
第三章 晋A不育系及其保持系细胞凋亡检测和过氧化氢的亚细胞定位 | 第34-46页 |
1 材料与方法 | 第34-38页 |
· 材料 | 第34页 |
· 花蕾的采集 | 第34页 |
· 实验仪器与主要试剂 | 第34-35页 |
· 主要试剂 | 第34-35页 |
· 实验仪器 | 第35页 |
· 实验方法 | 第35-38页 |
· 石蜡切片的制作 | 第35页 |
· DAPI染色 | 第35-36页 |
· TUNEL细胞凋亡检测 | 第36-37页 |
· 超薄切片制作 | 第37-38页 |
2 结果与分析 | 第38-43页 |
· 晋A不育系及其保持系晋B花药发育的显微结构观察 | 第38-40页 |
· 晋A不育系及其保持系晋B花粉败育的TUNEL细胞凋亡检测 | 第40-41页 |
· 晋A不育系及其保持系晋B花粉败育过程中过氧化氢的亚细胞定位 | 第41-43页 |
3 讨论 | 第43-46页 |
· 绒毡层细胞与细胞质雄性不育 | 第43-44页 |
· 细胞凋亡与细胞质雄性不育 | 第44页 |
· 过氧化氢过度积累与细胞质雄性不育 | 第44-46页 |
第四章 交替氧化酶基因及cDNA的克隆及分析 | 第46-66页 |
1 材料与方法 | 第46-51页 |
· 材料 | 第46-47页 |
· 黄化苗的培育 | 第46页 |
· 花蕾的采集 | 第46页 |
· 不同发育时期花蕾的划分 | 第46-47页 |
· 实验仪器与主要试剂(试剂盒) | 第47页 |
· 主要试剂(试剂盒) | 第47页 |
· 实验仪器 | 第47页 |
· 试验方法 | 第47-51页 |
· 引物设计 | 第47-48页 |
· DNA的提取 | 第48-49页 |
· RNA的提取 | 第49页 |
· cDNA的合成 | 第49-50页 |
· PCR反应 | 第50页 |
· 凝胶电泳检测 | 第50-51页 |
· 切胶回收 | 第51页 |
· 载体连接、大肠杆菌转化 | 第51页 |
· 序列生物信息学分析 | 第51页 |
2 结果与分析 | 第51-65页 |
· 提取DNA与RNA质量检测 | 第51-52页 |
· 晋A、亚棉A不育系及各自对应保持系晋B、亚棉B AOX1基因及cDNA的克隆 | 第52-53页 |
· 晋A不育系及保持系晋B交替氧化酶AOX1基因及cDNA测序结果及序列分析 | 第53-58页 |
· AOX1基因cDNA同源性分析 | 第58-59页 |
· AOX1蛋白同源性分析 | 第59页 |
· AOX1基因cDNA编码蛋白质结构预测 | 第59-63页 |
· AOX1基因编码蛋白质一级结构分析 | 第59-62页 |
· AOX1基因编码蛋白质二级结构分析 | 第62-63页 |
· 亚棉A及保持系亚棉B交替氧化酶AOX1基因及cDNA测序结果及序列分析 | 第63页 |
· 亚棉AAOX1基因cDNA编码蛋白质结构分析 | 第63-64页 |
· 亚棉A AOX1基因编码蛋白质一级结构分析 | 第63-64页 |
· AOX1基因编码蛋白质二级结构分析 | 第64页 |
· 晋A与亚棉AAOX1基因组DNA、cDNA及蛋白差异比较 | 第64-65页 |
3 讨论 | 第65-66页 |
· AOX基因多样性 | 第65-66页 |
第五章 棉花AOX1基因表达分析 | 第66-73页 |
1 材料与方法 | 第66-68页 |
· 材料 | 第66页 |
· 花蕾的采集 | 第66页 |
· 不同发育时期花蕾的划分 | 第66页 |
· 实验仪器与主要试剂(试剂盒) | 第66-67页 |
· 主要试剂(试剂盒) | 第66-67页 |
· 实验仪器 | 第67页 |
· 实验方法 | 第67-68页 |
2 结果与分析 | 第68-70页 |
· 晋A不育系及其保持系晋B小孢子败育过程中AOX1基因表达量的变化 | 第68-69页 |
· 亚棉A不育系及其保持系亚棉B花药败育过程中AOX1基因表达量的变化 | 第69-70页 |
3 讨论 | 第70-73页 |
· 抗氰呼吸与细胞质雄性不育 | 第70页 |
· 交替氧化酶与细胞质雄性不育 | 第70-71页 |
· 反向调节与细胞质雄性不育 | 第71-73页 |
第六章 全文讨论 | 第73-75页 |
第七章 全文结论 | 第75-77页 |
参考文献 | 第77-83页 |
Abstract | 第83-85页 |
致谢 | 第85页 |