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hLF和Lys基因双T-DNA植物表达载体的构建及转化水稻的研究

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hLF和Lys基因双T-DNA植物表达载体的构建及转化水稻的研究
论文目录
 
中文摘要第1-9页
Abstract第9-11页
本文主要缩写词表第11-12页
1 文献综述第12-30页
  1.1 水稻转基因技术研究进展第12-19页
    1.1.1 水稻转化受体系统第12-13页
    1.1.2 转基因水稻的转化方法第13-18页
    1.1.3 转基因植物的检测方法第18页
    1.1.4 转基因水稻面临的问题第18-19页
  1.2 无选择标记转基因植物研究进展第19-24页
    1.2.1 标记基因第19-20页
    1.2.2 去除转基因植物中选择标记基因的必要性第20-21页
    1.2.3 去除选择标记基因的策略第21-24页
  1.3 外源基因在水稻品质遗传改良上的应用第24-28页
    1.3.1 淀粉品质改良第25页
    1.3.2 蛋白质改良第25-27页
    1.3.3 水稻微量元素改良第27-28页
  1.4 本研究的目的和意义第28-30页
2 材料与方法第30-43页
  2.1 材料第30-31页
    2.1.1 水稻受体材料第30页
    2.1.2 菌株第30页
    2.1.3 质粒载体第30页
    2.1.4 主要试剂第30页
    2.1.5 PCR扩增引物第30-31页
    2.1.6 主要仪器设备第31页
  2.2 实验方法第31-43页
    2.2.1 水稻愈伤组织的诱导第31-32页
    2.2.2 菌种的活化及质粒的提取、酶切、回收、连接和转化第32-33页
    2.2.3 植物表达载体构建第33-38页
    2.2.4 植物表达载体转化农杆菌第38-40页
    2.2.5 农杆菌介导转化水稻第40-41页
    2.2.6 转基因植株的分子检测第41-43页
3 结果与分析第43-52页
  3.1 台粳九号高频再生体系的建立第43-44页
  3.2 hLF、Lys双T-DNA表达载体的构建第44-48页
    3.2.1 hLF基因双T-DNA表达载体的构建第44-46页
    3.2.2 Lys基因双T-DNA无选择标记表达载体的构建第46-48页
    3.2.3 Lys和hLF双基因无选择标记共表达载体的构建第48页
  3.3 植物表达载体导入农杆菌第48-49页
  3.4 农杆菌介导转化台粳九号第49-52页
    3.4.1 农杆菌介导的hLF基因转化台粳九号第49-50页
    3.4.2 农杆菌介导的Lys基因转化台粳九号第50-51页
    3.4.3 农杆菌介导的hLF和Lys双价基因共转化台粳九号第51-52页
4 讨论第52-54页
  4.1 转基因受体材料的选择第52页
  4.2 双T-DNA植物表达载体的构建第52-53页
    4.2.1 启动子的选择第52页
    4.2.2 双T-DNA共转化去除选择标记基因第52-53页
  4.3 农杆菌的种类、生长状态和浓度第53-54页
5 主要结论与展望第54-55页
  5.1 主要结论第54页
  5.2 后继研究展望第54-55页
6 参考文献第55-60页
附录1 本研究所采用的培养基配方第60-63页
附录2 大肠杆菌质粒的小量提取第63-64页
附录3 琼脂糖凝胶电泳回收目的片段第64-65页
附录4 PCR产物或者酶切片段等DNA纯化回收第65-66页
致谢第66页

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