论文目录 | |
中文摘要 | 第1-5
页 |
英文摘要 | 第5-6
页 |
目录 | 第6-8
页 |
1 引言 | 第8-16
页 |
· 表皮生长因子(EGF)概述 | 第8-12
页 |
· EGF的结构与功能关系 | 第8-9
页 |
· EGF受体 | 第9-10
页 |
· EGF家族 | 第10-11
页 |
· EGF的生物学效应及应用 | 第11-12
页 |
· 多克隆抗体技术 | 第12-15
页 |
· 抗原和抗体 | 第12-14
页 |
· 多克隆抗体的制备 | 第14
页 |
· 多克隆抗体与单克隆抗体的比较 | 第14-15
页 |
· 多克隆抗体的应用 | 第15
页 |
· 选题依据及意义 | 第15-16
页 |
2 材料与方法 | 第16-23
页 |
· 实验材料 | 第16-17
页 |
· 动物材料 | 第16
页 |
· 质粒和菌种 | 第16
页 |
· 化学试剂 | 第16
页 |
· hEGF引物 | 第16-17
页 |
· 实验方法 | 第17-23
页 |
· 原核表达载体pGEX-2T-hEGF的构建 | 第17-21
页 |
· 目的基因hEGF的人工合成 | 第17-18
页 |
· 目的基因hEGF与pGEM-T载体的连接 | 第18
页 |
· 重组质粒pGEM-T-hEGF的鉴定 | 第18-20
页 |
· 目的基因hEGF与载体pGEX-2T的连接 | 第20
页 |
· 重组质粒pGEX-2T-hEGF的鉴定 | 第20-21
页 |
· GST-hEGF融合蛋白在大肠杆菌中的诱导表达 | 第21
页 |
· GST-hEGF融合蛋白抗体的制备及抗体效价的检测 | 第21-23
页 |
· 利用聚丙烯凝胶电泳纯化的微量GST-hEGF融合蛋白免疫BALB/c小鼠 | 第21-22
页 |
· GST-hEGF融合蛋白抗体的Western-blot检测 | 第22-23
页 |
3 结果 | 第23-28
页 |
· 目的基因hEGF的人工合成 | 第23
页 |
· 重组质粒pGEM-T-hEGF的构建 | 第23-24
页 |
· 重组质粒pGEM-T-hEGF的鉴定 | 第24
页 |
· 原核表达质粒pGEX-2T-hEGF的构建 | 第24-25
页 |
· 原核表达质粒pGEX-2T-hEGF的鉴定 | 第25
页 |
· GST-hEGF融合蛋白在大肠杆菌中的诱导表达 | 第25-26
页 |
· IPTG诱导蛋白的表达 | 第25-26
页 |
· 利用SDS-PAGE聚丙烯凝胶电泳确定GST及GST-hEGF融合蛋白相对分子量 | 第26
页 |
· GST-hEGF融合蛋白抗体的制备及抗体检测 | 第26-28
页 |
· GST-hEGF融合蛋白抗体的制备 | 第26
页 |
· GST-hEGF融合蛋白抗体效价的Western-blot检测 | 第26-28
页 |
4 讨论 | 第28-30
页 |
· 原核表达质粒pGEX-2T-hEGF的构建 | 第28
页 |
· 利用SDS-PAGE聚丙烯凝胶电泳制备GST-hEGF融合蛋白的多克隆抗体 | 第28-29
页 |
· GST-hEGF融合蛋白抗体的检测 | 第29-30
页 |
5 结论 | 第30-31
页 |
参考文献 | 第31-34
页 |
致谢 | 第34
页 |