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人类未知功能蛋白质的克隆、表达、纯化和结晶
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人类未知功能蛋白质的克隆、表达、纯化和结晶
论文目录
 
摘要第1-5 页
Abstract第5-8 页
引言第8-9 页
　　本论文的研究背景和立题依据第8 页
　　本论文的研究内容和意义第8-9 页
第一章 文献综述第9-17 页
　　一、蛋白质的结构第9-12 页
　　　　(一) 蛋白质的一级结构第9 页
　　　　(二) 蛋白质的二级结构第9-12 页
　　　　(三) 蛋白质的三级结构第12 页
　　　　(四) 蛋白质的四级结构第12 页
　　二、蛋白质晶体学第12-14 页
　　　　(一) 蛋白质晶体学的发展第12-13 页
　　　　(二) 蛋白质结晶原理第13 页
　　　　(三) 蛋白质晶体学特点第13-14 页
　　　　(四) 蛋白质晶体学发展及应用第14 页
　　三、结构基因组学第14-17 页
　　　　(一) 高效率的结构基因组学第14-15 页
　　　　(二) Gateway~(TM)基因克隆技术第15-17 页
第二章 实验材料与方法第17-26 页
　　一、实验材料第17 页
　　　　(一) 菌株及其培养试剂第17 页
　　　　(二) 原始质粒第17 页
　　　　(三) 主要试剂及试剂盒第17 页
　　　　(四) 实验设备及仪器第17 页
　　二、实验方法第17-26 页
　　　　(一) 目标基因的选择第17-18 页
　　　　(二) Gateway~(TM)构建表达载体第18-20 页
　　　　(三) PCR 检测表达载体第20-21 页
　　　　(四) 重组质粒的表达及检测第21-22 页
　　　　(五) 表达产物的可溶性鉴定第22 页
　　　　(六) 蛋白质纯化方法第22-24 页
　　　　(七) Bradford 法测定蛋白浓度第24 页
　　　　(八) 坐滴法蛋白质晶体生长条件筛选第24-25 页
　　　　(九) 悬滴法优化蛋白质晶体第25 页
　　　　(十) 衍射数据的收集和处理第25 页
　　　　(十一) 生物信息学检索及分析第25-26 页
第三章 结果与分析第26-37 页
　　一、目标基因选择第26-30 页
　　二、GATEWAY~(TM)构建表达载体PCR 检测第30 页
　　三、目的基因的表达检测第30-33 页
　　　　(一) BL21(DE3)表达目的基因第30-32 页
　　　　(二) E.Coli Rosetta（DE3）表达目的基因第32-33 页
　　四、目的蛋白的可溶性检测第33 页
　　五、蛋白质的纯化第33-36 页
　　　　(一) Ni 亲和层析筛选可纯化蛋白第34-35 页
　　　　(二) Superdex75 凝胶过滤进一步纯化蛋白第35-36 页
　　六、蛋白质晶体生长条件的筛选及优化第36-37 页
　　　　(一) 蛋白质晶体生长条件的筛选第36 页
　　　　(二) 蛋白质晶体生长条件的优化第36-37 页
第四章 讨论第37-42 页
　　一、GATEWAY~(TM)技术克隆目的基因第37 页
　　二、蛋白质表达检测及可溶性分析第37-39 页
　　　　(一) 目的基因的表达及可溶性分析第37-38 页
　　　　(二) 表达蛋白质氨基酸组成与表达能力，可溶性之间关系第38-39 页
　　三、蛋白质的纯化策略第39-40 页
　　四、晶体初筛，优化及X 射线初级衍射第40 页
　　五、高通量结构基因组学筛选第40-42 页
第五章 结论第42-43 页
参考文献第43-46 页
致谢第46-47 页
在学期间公开发表论文及著作情况第47 页

本篇论文共47页，点击这进入下载页面。
 
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