论文目录 | |
摘要 | 第1-4
页 |
ABSTRACT | 第4-7
页 |
缩略表 | 第7-8
页 |
1 绪论 | 第8-13
页 |
· 炭疽芽胞杆菌及其致病作用 | 第8-10
页 |
· 病原学 | 第8
页 |
· 流行病学 | 第8-9
页 |
· 致病机制 | 第9-10
页 |
· S-层蛋白 | 第10-12
页 |
· S-层蛋白质的结构 | 第11
页 |
· S-层的功能 | 第11
页 |
· S-层的应用前景 | 第11-12
页 |
· 本研究的目的和意义 | 第12-13
页 |
2 材料和方法 | 第13-24
页 |
· 菌株、质粒和供试材料 | 第13
页 |
· 仪器设备与主要试剂 | 第13
页 |
· 主要仪器 | 第13
页 |
· 主要试剂及其它耗材 | 第13
页 |
· 培养基及试剂配制 | 第13-14
页 |
· 培养基及相关试剂配制 | 第13
页 |
· 其它溶液的配制 | 第13-14
页 |
· 炭疽芽胞杆菌SLP 缺失突变体的构建 | 第14-19
页 |
· 引物合成与DNA 测序 | 第14
页 |
· 重组质粒的构建及突变体的鉴定 | 第14-19
页 |
· 突变体和野生株生理生化特征测定 | 第19
页 |
· 突变体和野生株生长曲线的测定 | 第19
页 |
· 突变体和野生株生化生化特性测定 | 第19
页 |
· 野生株和突变株的毒力评价 | 第19-21
页 |
· A16R 和A16R△slp 芽胞的获取 | 第19-20
页 |
· A16R 和A16R△slp 芽胞毒力评价的细胞实验 | 第20
页 |
· A16R 和A16R△slp 毒力评价的动物实验 | 第20-21
页 |
· 突变体和野生株的比较蛋白质学研究 | 第21-24
页 |
· 炭疽杆菌A16R 和A16RΔslp 全菌蛋白的样品制备 | 第21
页 |
· 双向电泳 | 第21-22
页 |
· 图像扫描与分析 | 第22
页 |
· 胶内酶切 | 第22-23
页 |
· 酶解肽段混合物的MALDI-TOF 质谱检测 | 第23
页 |
· ESI-MS/MS 鉴定蛋白质 | 第23
页 |
· 数据库查询 | 第23-24
页 |
3 结果与讨论 | 第24-42
页 |
· 缺失突变体A16R△SLP 构建的过程验证 | 第24-28
页 |
· 重组质粒pKSV7-S 的构建 | 第24
页 |
· 重组质粒pKSV7-US 的构建 | 第24-25
页 |
· 打靶载体pKSV7-USD 构建 | 第25-26
页 |
· 缺失突变体A16R△slp 的PCR 鉴定 | 第26-27
页 |
· 假想S-层蛋白SLP 的缺失鉴定 | 第27-28
页 |
· 突变体和野生株生长状态的测定 | 第28-29
页 |
· 突变体和野生株部分生化特性比较结果 | 第29
页 |
· A16R 和A16R△SLP 芽胞镜检结果 | 第29-30
页 |
· A16R 和A16R△SLP 芽胞与CHO 细胞的相互作用 | 第30-31
页 |
· A16R 和A16R△SLP 繁殖体的毒力评价的动物实验 | 第31-32
页 |
· 野生株和突变体的比较蛋白质组学研究 | 第32-42
页 |
· A16R 和SLP 缺失突变体宽pH 梯度蛋白表达图谱 | 第32-34
页 |
· 野生株A16R 和突变株A16R△slp 不同时相双向电泳 | 第34-37
页 |
· 差异蛋白的质谱查询结果 | 第37
页 |
· 相关蛋白图谱的结果分析 | 第37-42
页 |
4 结论与展望 | 第42-43
页 |
· 结论 | 第42
页 |
· 展望 | 第42-43
页 |
致谢 | 第43-44
页 |
参考文献 | 第44-49
页 |
附录A 仪器设备 | 第49-50
页 |
附录B 主要试剂 | 第50-52
页 |
附录C 重组质粒PKSV7USD( PKSV7+UP+SPC+DOWN)的构建流程 | 第52-53
页 |
附录D 作者在攻读硕士期间发表的论文 | 第53
页 |