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猪输血传播病毒流行病学调查与Cap蛋白表达及感染性克隆构建

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猪输血传播病毒流行病学调查与Cap蛋白表达及感染性克隆构建
论文目录
 
摘要第1-8页
Abstract第8-15页
第一章 绪论第15-22页
  · 病原学第15-18页
    · 分类第15页
    · 形态结构与理化性质第15-16页
    · 培养特性第16页
    · 流行病学调查第16-18页
  · TTV 分子生物学第18-19页
    · TTV 基因组特征第18-19页
  · 猪输血传播病毒诊断技术的研究进展第19-21页
    · 病原学诊断方法第19-20页
    · 血清学诊断方法第20-21页
    · 电镜技术第21页
  · 研究的目的和意义第21-22页
第二章 猪输血传播病毒与猪圆环病毒混合感染的检测及PTTV 遗传变异分析第22-30页
  · 材料和方法第23-25页
    · 病料第23页
    · 主要试剂第23页
    · 样品处理及DNA 提取第23页
    · PTTV1、PTTV2、PCV1 和PCV2 的PCR 检测第23-24页
    · PTTV1 和PTTV2 全基因组扩增第24页
    · 病毒基因组克隆及质粒鉴定第24页
    · 病毒基因组测序及分析第24-25页
  · 结果第25-29页
    · 临床送检病料检测第25-26页
    · PTTV1 和PTTV2 基因序列扩增第26-27页
    · PTTV1 和PTTV2 基因组同源性分析第27页
    · PTTV1 和PTTV2 系统进化树构建第27-28页
    · PTTV1 和PTTV2 不同毒株遗传变异分析第28页
    · PTTV1 和PTTV2 基因结构分析第28-29页
  · 讨论第29-30页
第三章 猪输血传播病毒2 型重组Cap 蛋白在杆状病毒中的表达第30-37页
  · 材料和方法第30-31页
    · 实验材料第30页
    · 主要试剂第30-31页
    · 重组质粒的构建第31页
    · DNA 转染和病毒蚀斑克隆第31页
    · 重组蛋白质表达分析第31页
  · 结果第31-36页
    · PTTV2-ORF1 基因的扩增与克隆第31-32页
    · 重组质粒序列分析第32页
    · 重组杆状病毒的克隆筛选第32-33页
    · 重组蛋白的表达及纯化第33-35页
    · 重组蛋白的免疫活性鉴定第35-36页
  · 讨论第36-37页
第四章 猪输血传播病毒2 型(PTTV2)ORF1 基因的原核表达第37-42页
  · 材料方法第37-39页
    · 实验材料第37页
    · 主要试剂第37-38页
    · 表达质粒的构建第38页
    · 重组质粒在Rosetta(DE3)感受态细胞里的诱导表达第38页
    · 重组蛋白的Western-blot 分析第38页
    · 重组蛋白的包涵体纯化第38-39页
  · 结果第39-41页
    · PTTV2-ORF1 基因的扩增及重组质粒酶切鉴定第39页
    · 重组质粒序列分析第39页
    · 重组蛋白SDS-PAGE 及Western-blot 检测第39-40页
    · PTTV2-Cap 融合表达蛋白的纯化第40-41页
  · 讨论第41-42页
第五章 猪输血传播病毒2 型感染性克隆的构建及病毒拯救第42-48页
  · 材料和方法第42-44页
    · 实验材料第42-43页
    · 样品处理及DNA 提取第43页
    · 引物设计及PCR 扩增第43页
    · 融合PCR 构建PTTV2 基因组第43-44页
    · DNA 转染和细胞传代第44页
    · 细胞培养物DNA 提取及PCR 检测第44页
  · 结果第44-47页
    · PTTV2 基因组分段扩增及其电泳结果第44-45页
    · 融合长片段的获得第45页
    · PTTV2 基因组的获得及其重组质粒的构建第45-46页
    · PTTV 基因组体外环化及转染PK-15 细胞和ST 细胞第46-47页
  · 讨论第47-48页
第六章 结论第48-49页
参考文献第49-52页
附录1第52-55页
附录2第55-56页
附录3第56-57页
致谢第57-58页
作者简历第58页

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