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猪PDK4基因启动子的克隆及其活性分析
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猪PDK4基因启动子的克隆及其活性分析
论文目录
摘要
第1-8页
Abstract
第8-10页
第一章 文献综述
第10-16页
· 研究问题的由来
第10页
· 丙酮酸脱氢酶激酶概述
第10-13页
· 丙酮酸脱氢酶复合体
第10-12页
· 丙酮酸脱氢酶激酶家族
第12-13页
· 丙酮酸脱氢酶激酶调节机制
第13页
· 丙酮酸脱氢酶激酶4
第13-15页
· PDK4概述
第13-14页
· PDK4调节机制
第14-15页
· PDK4与临床疾病的研究
第15页
· 猪PDK4基因研究现状
第15-16页
第二章 引言
第16-18页
第三章 材料与方法
第18-34页
· 实验材料
第18-22页
· DNA与RNA样品
第18页
· 主要仪器与设备
第18-19页
· 主要试剂、试剂盒
第19-20页
· 常用试剂及其配制
第20-21页
· 常用生物信息学网站和分析软件
第21-22页
· 试验方法
第22-34页
· 总RNA的提取及cDNA的制备、检测
第22-24页
· 基因组织表达荧光定量分析
第24-25页
· 猪基因组DNA的提取及浓度纯度测定
第25-26页
· PDK4基因启动子5’缺失载体的设计
第26-28页
· 目的基因启动子的克隆
第28-29页
· 启动子产物的纯化、克隆、鉴定和测序
第29-30页
· 细胞培养及转染
第30-32页
· 荧光素酶活性测定
第32-34页
第四章 结果与分析
第34-44页
· 基因组DNA的提取
第34页
· 总RNA的提取及cDNA的制备、检测
第34-36页
· 总RNA的提取
第34-35页
· cDNA的制备与检测
第35-36页
· 猪PDK4基因的组织表达分析
第36页
· 猪PDK4基因TATA盒和CPG岛的预测
第36-37页
· PDK4基因启动子序列调控元件预测
第37-39页
· 猪PDK4基因启动子重组载体的构建
第39页
· PDK4启动子5’缺失载体转染MEF-3T3细胞后的荧光素活性分析
第39-40页
· PDK4启动子5’缺失载体转染PK15细胞后的荧光素活性分析
第40-41页
· 供猪PDK4基因缺失启动子活性定量研究的细胞系筛选
第41-44页
第五章 讨论
第44-50页
· PDK4组织表达分析
第44页
· 载体的构建
第44页
· 瞬时转染
第44-46页
· 影响转染效率因素的优化
第45页
· 转染方法的选择
第45-46页
· 荧光素酶活性测定的优化
第46页
· 转染细胞的选择
第46页
· 转录因子分析
第46-50页
· C/EBPβ转录因子
第46-47页
· SP1转录因子
第47页
· MyoD转录因子
第47-48页
· MEF2转录因子
第48-50页
参考文献
第50-60页
致谢
第60-62页
发表论文及参加课题一览表
第62页
本篇论文共
62
页,
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。
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