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猪PDK4基因启动子的克隆及其活性分析

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猪PDK4基因启动子的克隆及其活性分析
论文目录
 
摘要第1-8页
Abstract第8-10页
第一章 文献综述第10-16页
  · 研究问题的由来第10页
  · 丙酮酸脱氢酶激酶概述第10-13页
    · 丙酮酸脱氢酶复合体第10-12页
    · 丙酮酸脱氢酶激酶家族第12-13页
    · 丙酮酸脱氢酶激酶调节机制第13页
  · 丙酮酸脱氢酶激酶4第13-15页
    · PDK4概述第13-14页
    · PDK4调节机制第14-15页
    · PDK4与临床疾病的研究第15页
  · 猪PDK4基因研究现状第15-16页
第二章 引言第16-18页
第三章 材料与方法第18-34页
  · 实验材料第18-22页
    · DNA与RNA样品第18页
    · 主要仪器与设备第18-19页
    · 主要试剂、试剂盒第19-20页
    · 常用试剂及其配制第20-21页
    · 常用生物信息学网站和分析软件第21-22页
  · 试验方法第22-34页
    · 总RNA的提取及cDNA的制备、检测第22-24页
    · 基因组织表达荧光定量分析第24-25页
    · 猪基因组DNA的提取及浓度纯度测定第25-26页
    · PDK4基因启动子5’缺失载体的设计第26-28页
    · 目的基因启动子的克隆第28-29页
    · 启动子产物的纯化、克隆、鉴定和测序第29-30页
    · 细胞培养及转染第30-32页
    · 荧光素酶活性测定第32-34页
第四章 结果与分析第34-44页
  · 基因组DNA的提取第34页
  · 总RNA的提取及cDNA的制备、检测第34-36页
    · 总RNA的提取第34-35页
    · cDNA的制备与检测第35-36页
  · 猪PDK4基因的组织表达分析第36页
  · 猪PDK4基因TATA盒和CPG岛的预测第36-37页
  · PDK4基因启动子序列调控元件预测第37-39页
  · 猪PDK4基因启动子重组载体的构建第39页
  · PDK4启动子5’缺失载体转染MEF-3T3细胞后的荧光素活性分析第39-40页
  · PDK4启动子5’缺失载体转染PK15细胞后的荧光素活性分析第40-41页
  · 供猪PDK4基因缺失启动子活性定量研究的细胞系筛选第41-44页
第五章 讨论第44-50页
  · PDK4组织表达分析第44页
  · 载体的构建第44页
  · 瞬时转染第44-46页
    · 影响转染效率因素的优化第45页
    · 转染方法的选择第45-46页
    · 荧光素酶活性测定的优化第46页
    · 转染细胞的选择第46页
  · 转录因子分析第46-50页
    · C/EBPβ转录因子第46-47页
    · SP1转录因子第47页
    · MyoD转录因子第47-48页
    · MEF2转录因子第48-50页
参考文献第50-60页
致谢第60-62页
发表论文及参加课题一览表第62页

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