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蛋白重组乳酸菌构建及其免疫效果评价
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蛋白重组乳酸菌构建及其免疫效果评价
论文目录
摘要
第1-7页
abstract
第7-8页
主要缩写词
第9-14页
引言
第14-15页
第一章 文献综述
第15-23页
1.1 鸡传染性法氏囊病毒
第15-17页
1.1.1 IBD的流行病学
第15页
1.1.2 鸡传染性法氏囊病临床症状
第15页
1.1.3 鸡传染性法氏囊病防控
第15-16页
1.1.4 鸡传染性法氏囊病相关疫苗的研究
第16-17页
1.2 黏膜免疫
第17-18页
1.3 乳酸菌概述
第18页
1.3.1 乳酸菌的定义、分类及分布
第18页
1.3.2 乳酸菌的益生特性
第18页
1.4 递呈活载体乳酸菌的研究
第18-20页
1.4.1 表达外源蛋白的方法
第18-19页
1.4.2 重组乳酸菌诱导机体免疫应答的机制
第19-20页
1.5 锚定蛋白AcmA概述
第20页
1.6 母源抗体概述
第20-23页
第二章 试验研究
第23-70页
试验一 r-L.Lactis-Usp_(45)-VP_2-RCK-AcmA_2的构建及免疫效果的评价
第23-38页
1.材料与方法
第23-32页
1.1 材料
第23-25页
1.1.1 实验材料
第23页
1.1.2 实验仪器
第23-24页
1.1.3 实验试剂
第24-25页
1.2 方法
第25-32页
1.2.1 引物的设计与合成
第25页
1.2.2 目的片段的扩增
第25-26页
1.2.3 目的基因的回收
第26页
1.2.4 NZ3900菌株感受态细胞的制备
第26页
1.2.5 提取pNZ8149质粒
第26-27页
1.2.6 载体重组构建
第27-28页
1.2.7 电转化重组质粒构建重组乳酸菌
第28页
1.2.8 重组菌株的筛选与鉴定
第28-29页
1.2.9 重组乳酸乳球菌的诱导
第29页
1.2.10 细胞壁上的蛋白提取
第29页
1.2.11 流式细胞仪分析重组乳酸菌的阳性率
第29页
1.2.12 融合蛋白表达含量的测定
第29-30页
1.2.13 融合蛋白稳定性检测
第30页
1.2.14 动物实验设计
第30页
1.2.15 血清抗体滴度的检测
第30-31页
1.2.16 中和抗体(血清)检测
第31页
1.2.17 黏膜sIgA抗体滴度的检测
第31-32页
1.2.19 统计分析
第32页
2 结果
第32-36页
2.1 目的基因片段
第32页
2.2 重组菌株的筛选与鉴定
第32-33页
2.3 重组菌株诱导表达的结果
第33页
2.4 流式细胞仪分析重组乳酸菌的阳性率
第33-34页
2.5 融合蛋白表达含量的检测
第34页
2.6 重组乳酸菌表达融合蛋白的稳定性检测
第34-35页
2.7 ELISA抗体和中和抗体的检测结果
第35页
2.8 黏膜sIgA抗体滴度的检测结果
第35-36页
2.9 攻毒保护率
第36页
3.讨论
第36-37页
4.小结
第37-38页
试验二 优化OmpH主动递呈重组乳酸菌活载体平台
第38-52页
1.材料与方法
第38-44页
1.1 材料
第38-40页
1.1.1 实验材料
第38页
1.1.2 实验仪器
第38-39页
1.1.3 实验试剂
第39-40页
1.2 方法
第40-44页
1.2.1 引物设计
第40页
1.2.2 目的片段的扩增
第40-41页
1.2.3 目的基因PCR产物的纯化回收
第41页
1.2.4 构建重组载体
第41-42页
1.2.5 重组质粒电转化构建重组乳酸菌
第42页
1.2.6 重组菌株的筛选与鉴定
第42-43页
1.2.7 重组乳酸乳球菌的诱导
第43页
1.2.8 融合蛋白表达含量的测定
第43页
1.2.9 融合蛋白稳定性检测
第43页
1.2.10 正交实验法在优化重组乳酸乳球菌诱导表达中的应用
第43-44页
2.结果
第44-49页
2.1 目的基因片段的扩增
第44-45页
2.2 重组菌株的筛选与鉴定
第45-46页
2.3 重组菌株的诱导表达
第46页
2.4 融合蛋白表达含量的检测
第46-48页
2.5 融合蛋白的稳定性检测
第48-49页
2.6 重组乳酸乳球菌株表达蛋白的正交实验结果
第49页
3.讨论
第49-50页
4.小结
第50-52页
试验三 高水平母源抗体下重组乳酸菌r-L.Lactis-VP_2-RCK的免疫效果
第52-70页
1.材料与方法
第52-57页
1.1 材料
第52-54页
1.1.1 实验材料
第52页
1.1.2 实验仪器
第52-53页
1.1.3 实验试剂
第53-54页
1.2 方法
第54-57页
1.2.1 重组菌株的诱导及表达
第54页
1.2.2 母源抗体衰减规律的检测
第54页
1.2.3 动物实验设计
第54页
1.2.4 血清抗体滴度的检测
第54-55页
1.2.5 血清中和抗体滴度的检测
第55页
1.2.8 RNA提取和反转录
第55页
1.2.9 相对荧光定量PCR检测
第55-56页
1.2.10 淋巴细胞数量检测
第56-57页
2.结果
第57-68页
2.1 重组菌株表达
第57页
2.2 母源抗体衰减规律
第57-58页
2.3 中和抗体的检测结果
第58-59页
2.4 法氏囊囊体比
第59-60页
2.5 法氏囊中细胞因子在mRNA水平的差异表达
第60-61页
2.6 胸腺中细胞因子在mRNA水平的差异
第61-62页
2.7 脾脏中细胞因子在mRNA水平的差异表达
第62-63页
2.8 外周血淋巴细胞CD4~+/CD8~+分析结果
第63-66页
2.9 脾细胞CD4~+/CD8~+分析结果
第66-68页
3.讨论
第68-69页
4.小结
第69-70页
全文结论
第70-71页
创新点
第71-72页
参考文献
第72-79页
致谢
第79-80页
作者简介
第80-81页
导师评阅表
第81
本篇论文共
81
页,
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