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Ⅱ型限制性内切酶pstI在合成生物学中的应用
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Ⅱ型限制性内切酶pstI在合成生物学中的应用
论文目录
摘要
第1-4页
Abstract
第4-7页
第一章 前言
第7-19页
· 合成生物学研究进展
第7-12页
· 限制修饰系统概述
第12-17页
· PET 表达系统
第17页
· 本课题的研究目的及研究内容
第17-19页
第二章 材料与方法
第19-33页
· 实验材料
第19-24页
· 菌种和质粒
第19-20页
· 分子生物学常用的工具酶
第20页
· 常用试剂盒
第20页
· 常用生化试剂
第20-22页
· 常用的分子量标准
第22页
· 聚合酶链式反应(PCR)试剂
第22-23页
· 实验所用仪器
第23-24页
· 实验方法
第24-33页
· 菌种保存方法
第24页
· 常用培养基的配制
第24页
· 分子生物学常用溶液及缓冲液的配制
第24-25页
· 分子生物学常规操作
第25页
· PCR 方法
第25-26页
· 大肠杆菌感受态细胞的制备及转化
第26-27页
· 诱导表达
第27页
· SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)
第27-30页
· 细菌总蛋白裂解液的制备
第30页
· 纯化目的蛋白
第30-31页
· 蛋白质含量的测定
第31页
· 活菌计数方法
第31-32页
· 显微镜观察
第32-33页
第三章 结果与分析
第33-43页
· pET28a-pstI 质粒的构建
第33-35页
· pstI 基因的获得
第34页
· pET28a 质粒经HindIII/BamHI 双酶切获得载体片段
第34-35页
· 验证重组子的正确性
第35页
· pET28a-pstI 质粒在RosettaTM 菌中的表达
第35-43页
· 利用His-标签纯化PstI 蛋白
第36-37页
· 在体外验证纯化得到的PstI 蛋白的活性
第37页
· pET28a-pstI 质粒表达后对RosettaTM 宿主生长的影响
第37-40页
· pET28a-pstI 质粒表达后对宿主基因组的影响
第40-43页
第四章 讨论
第43-46页
第五章 结论
第46-47页
参考文献
第47-56页
个人简历及发表的学术论文
第56-57页
致谢
第57页
本篇论文共
57
页,
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。
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