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Ⅱ型限制性内切酶pstI在合成生物学中的应用

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Ⅱ型限制性内切酶pstI在合成生物学中的应用
论文目录
 
摘要第1-4页
Abstract第4-7页
第一章 前言第7-19页
  · 合成生物学研究进展第7-12页
  · 限制修饰系统概述第12-17页
  · PET 表达系统第17页
  · 本课题的研究目的及研究内容第17-19页
第二章 材料与方法第19-33页
  · 实验材料第19-24页
    · 菌种和质粒第19-20页
    · 分子生物学常用的工具酶第20页
    · 常用试剂盒第20页
    · 常用生化试剂第20-22页
    · 常用的分子量标准第22页
    · 聚合酶链式反应(PCR)试剂第22-23页
    · 实验所用仪器第23-24页
  · 实验方法第24-33页
    · 菌种保存方法第24页
    · 常用培养基的配制第24页
    · 分子生物学常用溶液及缓冲液的配制第24-25页
    · 分子生物学常规操作第25页
    · PCR 方法第25-26页
    · 大肠杆菌感受态细胞的制备及转化第26-27页
    · 诱导表达第27页
    · SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第27-30页
    · 细菌总蛋白裂解液的制备第30页
    · 纯化目的蛋白第30-31页
    · 蛋白质含量的测定第31页
    · 活菌计数方法第31-32页
    · 显微镜观察第32-33页
第三章 结果与分析第33-43页
  · pET28a-pstI 质粒的构建第33-35页
    · pstI 基因的获得第34页
    · pET28a 质粒经HindIII/BamHI 双酶切获得载体片段第34-35页
    · 验证重组子的正确性第35页
  · pET28a-pstI 质粒在RosettaTM 菌中的表达第35-43页
    · 利用His-标签纯化PstI 蛋白第36-37页
    · 在体外验证纯化得到的PstI 蛋白的活性第37页
    · pET28a-pstI 质粒表达后对RosettaTM 宿主生长的影响第37-40页
    · pET28a-pstI 质粒表达后对宿主基因组的影响第40-43页
第四章 讨论第43-46页
第五章 结论第46-47页
参考文献第47-56页
个人简历及发表的学术论文第56-57页
致谢第57页

本篇论文共57页,点击这进入下载页面
 
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