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重组人角质细胞生长因子-2（hKGF-2）融合蛋白的高效表达、纯化及其活性检测
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重组人角质细胞生长因子-2（hKGF-2）融合蛋白的高效表达、纯化及其活性检测
论文目录
 
摘要第1-5 页
Abstract第5-8 页
一、前言第8-22 页
　　· 人角质细胞生长因子-2概况第8-13 页
　　　　· KGF-2的来源和基因结构第8-9 页
　　　　· KGF-2的受体第9-10 页
　　　　· KGF-2的生物学功能第10-13 页
　　　　· KGF-2的致癌性研究第13 页
　　· 小泛素相关修饰物SUMO简介第13-20 页
　　　　· SUMO的分类和结构第14-15 页
　　　　· SUMO的生化反应途径第15-17 页
　　　　· SUMO化的生物学功能第17-20 页
　　· 研究背景与技术路线第20-22 页
二、实验材料与设备第22-28 页
　　· 主要设备和器材第22-23 页
　　· 常用试剂第23 页
　　· DNA及蛋白材料第23 页
　　· 实验菌株及细胞株第23 页
　　· 培养基与抗生素第23-24 页
　　· 实验试剂第24-28 页
三、方法与步骤第28-42 页
　　· 引物的设计第28 页
　　· 重组质粒的构建第28-34 页
　　· 重组质粒的鉴定第34-35 页
　　· KGF-2融合蛋白在大肠杆菌中的表达第35-38 页
　　· 融合蛋白的纯化第38-39 页
　　· Western Blotting第39 页
　　· BCA法测定蛋白浓度第39-40 页
　　· 生物学活性检测(MTT法)第40-42 页
四、结果分析第42-57 页
　　· 目的基因的扩增第42-45 页
　　· 重组质粒的构建及鉴定第45-46 页
　　· 融和蛋白的表达第46-52 页
　　· SUMO-KGF-2的分离纯化第52 页
　　· SUMO-KGF-2的酶切和KGF-2的纯化第52-53 页
　　· Western blotting鉴定第53-54 页
　　· BCA法测定蛋白浓度第54-55 页
　　· 融和蛋白SUMO-KGF-2和单体蛋白KGF-2促分裂活性分析第55-57 页
五、讨论第57-61 页
　　· 原核表达载体的选择第57 页
　　· 大肠杆菌表达菌株的选择第57-58 页
　　· 融合标签和分子伴侣的选择第58-59 页
　　· 目的蛋白的表达第59 页
　　· 目的蛋白的纯化第59-60 页
　　· 生物活性的检测第60-61 页
六、结论第61-62 页
参考文献第62-69 页
附录第69-72 页
致谢第72页

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