论文目录 | |
| 符号说明 | 第1-8页 |
| 中文摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 1 引言 | 第12-26页 |
| 1.1 鸭病毒性肝炎概述 | 第12-14页 |
| 1.1.1 DHAV-1 病毒学分类 | 第12页 |
| 1.1.2 DHAV-1 病原特性 | 第12-13页 |
| 1.1.3 DHAV-1 流行病学 | 第13页 |
| 1.1.4 临床症状和病理变化 | 第13-14页 |
| 1.2 DHAV-1 分子生物学研究 | 第14-15页 |
| 1.2.1 DHAV-1 基因组主要结构 | 第14页 |
| 1.2.2 结构蛋白 | 第14-15页 |
| 1.2.3 非结构蛋白 | 第15页 |
| 1.3 DHAV-1 的培养特性 | 第15-16页 |
| 1.3.1 DHAV-1 在胚胎中的增殖 | 第15-16页 |
| 1.3.2 DHAV-1 在细胞中的培养 | 第16页 |
| 1.4 鸭甲肝病毒感染和致病的分子机制 | 第16-17页 |
| 1.5 DHAV-1 疫苗的研究现状 | 第17-18页 |
| 1.5.1 弱毒疫苗 | 第18页 |
| 1.5.2 灭活疫苗 | 第18页 |
| 1.6 诊断 | 第18-23页 |
| 1.6.1 病毒的分离和鉴定 | 第18-19页 |
| 1.6.2 血清学 | 第19页 |
| 1.6.3 鉴别诊断 | 第19-20页 |
| 1.6.4 分子生物学诊断 | 第20页 |
| 1.6.5 血清学捡测手段 | 第20-23页 |
| 1.6.5.1 血清中和试验（Virus-neutralization test,VN） | 第20-21页 |
| 1.6.5.2 琼脂免疫扩散试验 | 第21页 |
| 1.6.5.3 间接血凝试验 | 第21页 |
| 1.6.5.4 酶联免疫吸附试验（ELISA） | 第21-23页 |
| 1.6.5.5 其他血清学诊断方法 | 第23页 |
| 1.7 预防与控制 | 第23-24页 |
| 1.8 治疗 | 第24页 |
| 1.9 研究目的和意义 | 第24-26页 |
| 2 材料与方法 | 第26-34页 |
| 2.1 材料 | 第26-27页 |
| 2.1.1 病料和菌株 | 第26页 |
| 2.1.2 实验动物 | 第26页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第26页 |
| 2.1.4 主要试剂 | 第26页 |
| 2.1.5 实验所用溶液配制 | 第26-27页 |
| 2.1.6 引物设计和合成 | 第27页 |
| 2.2 方法 | 第27-34页 |
| 2.2.1 DHAV-15 株毒在SPF鸡胚上的传代试验 | 第27-28页 |
| 2.2.2 各毒株各代次鸡胚传代毒 3C基因的测序 | 第28-34页 |
| 2.2.2.1 病毒RNA的提取 | 第28页 |
| 2.2.2.2 病毒的RT-PCR鉴定 | 第28-29页 |
| 2.2.2.3 PCR扩增 | 第29-30页 |
| 2.2.2.4 PCR产物的回收 | 第30页 |
| 2.2.2.5 连接 | 第30-31页 |
| 2.2.2.6 DH5a大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第31页 |
| 2.2.2.7 转化 | 第31-32页 |
| 2.2.2.8 质粒DNA的提取 | 第32页 |
| 2.2.2.9 重组质粒的双酶切鉴定 | 第32页 |
| 2.2.2.10 阳性克隆序列测定 | 第32-33页 |
| 2.2.2.11 3C序列分析 | 第33页 |
| 2.2.2.12 动物回归试验 | 第33-34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-47页 |
| 3.1 传代后胚体死亡规律 | 第34-35页 |
| 3.2 DHAV-1 鸡胚传代毒的 3C序列测定 | 第35页 |
| 3.3 阳性质粒的双酶切鉴定结果 | 第35-36页 |
| 3.4 5 株DHAV-1 病毒传代后各代次 3C蛋白克隆测序后基因及氨基酸序列比对的结果及分析 | 第36-47页 |
| 3.4.1 1A传代后各代次 3C蛋白克隆测序后基因及氨基酸序列比对的结果及分析 | 第36-37页 |
| 3.4.2 2A传代后各代次 3C蛋白克隆测序后基因及氨基酸序列比对的结果及分析 | 第37-39页 |
| 3.4.3 3A传代后各代次 3C蛋白克隆测序后基因及氨基酸序列比对的结果及分析 | 第39-41页 |
| 3.4.4 4A传代后各代次 3C蛋白克隆测序后基因及氨基酸序列比对的结果及分析 | 第41-43页 |
| 3.4.5 5A传代后各代次 3C蛋白克隆测序后基因及氨基酸序列比对的结果及分析 | 第43-45页 |
| 3.4.6 动物回归试验结果 | 第45-47页 |
| 4 讨论 | 第47-50页 |
| 5 结论 | 第50-51页 |
| 6 参考文献 | 第51-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第60页 |
