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乌头GGPS基因克隆分析及双酯型生物碱生物合成途径分析

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乌头GGPS基因克隆分析及双酯型生物碱生物合成途径分析
论文目录
 
摘要第1-6页
Abstract第6-9页
缩略词表第9-13页
1 文献综述第13-19页
  1.1 附子及其生物活性研究第13-14页
  1.2 二萜生物碱研究第14-16页
  1.3 植物GGPS基因研究第16-17页
  1.4 植物基因克隆第17页
  1.5 实时荧光定量PCR第17-18页
  1.6 乌头碱类生物碱检测第18页
  1.7 研究目的及意义第18-19页
2 材料与方法第19-37页
  2.1 实验材料第19-21页
    2.1.1 植物材料第19-20页
    2.1.2 质粒、菌株第20页
    2.1.3 试剂第20-21页
    2.1.4 仪器与设备第21页
    2.1.5 引物合成与序列测定第21页
  2.2 GGPS基因全长克隆第21-29页
    2.2.1 组织培养第21-22页
    2.2.2 合成cDNA第一链第22-23页
    2.2.3 简并引物设计第23-24页
    2.2.4 核心序列PCR扩增第24-26页
    2.2.5 3'RACE第26-28页
    2.2.6 基因全长PCR扩增第28-29页
    2.2.7 GGPS基因生物信息学分析第29页
  2.3 基因组织表达分析第29-34页
    2.3.1 RNA提取及反转录第29-31页
    2.3.2 qPCR引物设计第31-32页
    2.3.3 半定量PCR第32-33页
    2.3.4 qPCR第33-34页
  2.4 双酯型生物碱含量分析第34-37页
    2.4.1 色谱条件第34页
    2.4.2 提取方法第34页
    2.4.3 方法学考察第34-36页
    2.4.4 含量测定第36-37页
  2.5 相关性分析第37页
3 结果与分析第37-58页
  3.1 RNA提取及反转录第37-38页
  3.2 GGPS基因克隆第38-40页
    3.2.1 组织培养第38页
    3.2.2 核心序列扩增第38-39页
    3.2.3 3'RACE第39-40页
    3.2.4 基因全长扩增第40页
  3.3 GGPS生物信息学分析第40-46页
    3.3.1 序列比对第40-41页
    3.3.2 蛋白质翻译第41-43页
    3.3.3 多重序列比对第43-44页
    3.3.4 分子系统进化分析第44-45页
    3.3.5 蛋白质理化性质与3D结构预测第45-46页
  3.4 GGPS基因组织表达分析第46-51页
    3.4.1 内参基因核心片段的获得及引物设计第46-47页
    3.4.2 半定量PCR第47-48页
    3.4.3 qPCR第48-51页
  3.5 双酯型生物碱含量分析第51-57页
    3.5.1 方法学考察第51-55页
    3.5.2 含量测定分析第55-57页
  3.6 相关性分析第57-58页
4 讨论及结论第58-60页
  4.1 乌头GGPS基因克隆第58页
  4.2 乌头GGPS基因的表达分析第58-59页
  4.3 乌头乌头碱含量分析第59页
  4.4 乌头GGPS基因与乌头碱生物合成第59-60页
参考文献第60-66页
致谢第66页

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