论文目录 | |
| 摘要 | 第1-9
页 |
| ABSTRACT | 第9-12
页 |
| 1 文献综述 | 第12-28
页 |
| · 禽流感概述 | 第12-20
页 |
| · 禽流感与高致病性禽流感 | 第12-15
页 |
| · 禽流感的诊断与防制 | 第15-19
页 |
| · 禽流感的流行动态 | 第19-20
页 |
| · 禽流感病毒 | 第20-26
页 |
| · 禽流感单克隆抗体的制备情况 | 第26-28
页 |
| 2 材料与方法 | 第28-54
页 |
| · 实验材料 | 第28-36
页 |
| · 实验仪器 | 第28-29
页 |
| · 主要试剂及其配制 | 第29-36
页 |
| · 实验方法 | 第36-54
页 |
| · 基因工程表达载体的构建 | 第36-44
页 |
| · 重组工程菌 BL21/HA1 蛋白的表达和最佳条件摸索 | 第44-46
页 |
| · pET-28a(+)-HA1/BL21(DE3)可溶性His-Tag 融合蛋白的纯化 | 第46-50
页 |
| · 目的蛋白的Western Blot 鉴定 | 第50-52
页 |
| · pET-28a(+)/HA1 融合蛋白的活性检测及其初步应用 | 第52-54
页 |
| 3 结果与分析 | 第54-64
页 |
| · 目的基因PCR 扩增结果 | 第54-55
页 |
| · HA1 基因PCR 扩增产物 | 第54
页 |
| · HA1 基因PCR 扩增产物和pET-28a(+)双酶切产物的琼脂糖凝胶回收 | 第54-55
页 |
| · 重组质粒的鉴定 | 第55-56
页 |
| · HA1 基因重组子的PCR 和双酶切鉴定 | 第55-56
页 |
| · pET-28a(+)/HA1 融合蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中表达鉴定结果 | 第56
页 |
| · 重组质粒的测序鉴定 | 第56-57
页 |
| · PET-28A(+)/HA1 融合蛋白在大肠杆菌 BL21(DE3)中的最佳表达条件摸索 | 第57-58
页 |
| · pET-28a(+)/HA1 融合蛋白在不同IPTG 浓度下的诱导表达 | 第57
页 |
| · pET-28a(+)/HA1 融合蛋白经过不同诱导时间的表达 | 第57-58
页 |
| · pET-28a(+)/HA1 融合蛋白在不同诱导温度下的表达 | 第58
页 |
| · 表达蛋白的鉴定 | 第58-59
页 |
| · 目的蛋白的纯化 | 第59-64
页 |
| · 亲和层析纯化 | 第59-60
页 |
| · 包涵体纯化 | 第60-61
页 |
| · 离子交换层析和分子筛纯化 | 第61-63
页 |
| · HA1 蛋白活性试验结果 | 第63-64
页 |
| 4 讨论与结论 | 第64-70
页 |
| · 讨论 | 第64-69
页 |
| · 目的基因片段的的扩增 | 第64
页 |
| · 质粒DNA 的提取 | 第64-65
页 |
| · 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第65-66
页 |
| · 目的蛋白的纯化 | 第66-68
页 |
| · 融合蛋白活性的测定 | 第68-69
页 |
| · 结论 | 第69-70
页 |
| 参考文献 | 第70-75
页 |
| 致谢 | 第75-76
页 |
| 附录 | 第76-77页 |
