论文目录 | |
摘要 | 第1-7
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Abstract | 第7-10
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第一章 绪论 | 第10-21
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· 拟除虫菊酯类农药 | 第10-12
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· 拟除虫菊酯类杀虫剂的发展 | 第10-11
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· 菊酯类农药的致毒机理 | 第11-12
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· 我国菊酯类农约现状 | 第12
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· 农药残留及危害 | 第12-15
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· 现状 | 第12-13
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· 解决方法 | 第13-15
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· 微物生物修复农药残留 | 第15-20
页 |
· 降解拟除虫菊酯类农药的微生物种类 | 第15-16
页 |
· 微生物降解农药的途径 | 第16-20
页 |
· 本研究的目的与意义 | 第20-21
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第二章 构建不动杆菌(ACINETOBACTER.SP)基因组文库 | 第21-34
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· 材料与试剂 | 第21-22
页 |
· 材料 | 第21
页 |
· 实验仪器 | 第21
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· 化学试剂 | 第21-22
页 |
· 实验方法 | 第22-28
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· 受体菌E.coli JM110和含有pGEM-3Z质粒JM110对菊酯类农药的降解情况和酯酶活性测定 | 第22-24
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· 基因组DNA提取 | 第24
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· 质粒DNA提取(碱裂解法) | 第24-25
页 |
· 基因组DNA部分酶切体系 | 第25
页 |
· 载体DNA完全酶切体系 | 第25-26
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· 感受态制备 | 第26
页 |
· 转化 | 第26
页 |
· 实验路线图 | 第26-27
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· 随机挑选重组验证文库包含外源片段大小 | 第27-28
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· 实验结果 | 第28-32
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· 受体菌E.coli JM110和JM110(含pGEM-3Z)对高效氯氰的降解能力及其在平板上生长情况的检测 | 第28
页 |
· E.coli JM110和JM110(含pGEM-3Z)的酯酶活性测定 | 第28-29
页 |
· 总DNA,pGEM-3Z质粒的提取 | 第29-30
页 |
· 细菌基因组DNA部分酶切和载体pGEM-3Z完全酶切 | 第30-31
页 |
· 目的片段与载体的连接、转化 | 第31-32
页 |
· 随机挑选重组验证库外源片段大小 | 第32
页 |
· 讨论 | 第32-34
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第三章 文库筛选获得农药降解重组子2-4-38及其降解性能 | 第34-42
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· 材料与试剂 | 第34
页 |
· 实验材料 | 第34
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· 实验试剂 | 第34
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· 实验方法 | 第34-36
页 |
· 阳性克隆筛选 | 第34-35
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· 重组子降解性能的检测 | 第35-36
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· 实验结果 | 第36-41
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· 具菊酯降解能力重组子的筛选 | 第36
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· 重组子2-4-38质粒提取及酶切验证 | 第36
页 |
· 重组子,原始菌株,和JM110(含有pGEM-3z)的酯酶比活力 | 第36-37
页 |
· 重组子降解能力的测定 | 第37-41
页 |
· 讨论 | 第41-42
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第四章 重组子2-4-38基因亚克隆与序列测定 | 第42-58
页 |
· 材料与试剂 | 第42
页 |
· 实验材料 | 第42
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· 实验试剂 | 第42
页 |
· 实验方法 | 第42-44
页 |
· p2-4-38外源片段基因亚克隆 | 第42-43
页 |
· 序列分析与BLAST比对 | 第43
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· 基因克隆 | 第43-44
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· 实验结果 | 第44-57
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· ·kb基因片断的亚克隆及序列分析 | 第44-45
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· 2kb基因片断的亚克隆 | 第45-46
页 |
· 两个亚克隆之间序列扩增与测定 | 第46-47
页 |
· 基因序列拼接、分析、比对与注册 | 第47-54
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· 基因克隆 | 第54-57
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· 讨论 | 第57-58
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第五章 全文结论与展望 | 第58-68
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1、全文结论 | 第58
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2、对后续工作的建议 | 第58-68
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致谢 | 第68-69
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作者简历 | 第69页 |