论文目录 | |
摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-17页 |
第一章 隐孢子虫病研究概况 | 第17-47页 |
· 隐孢子虫病原学与分类学研究进展 | 第17-26页 |
· 隐孢子虫病的分子流行病学研究进展 | 第26-32页 |
· 隐孢子虫检测方法的研究进展 | 第32-36页 |
· 隐孢子虫体外培养研究进展 | 第36-43页 |
· 隐孢子虫转基因技术研究进展 | 第43页 |
· 隐孢子虫病的治疗与预防 | 第43-44页 |
· 展望 | 第44-47页 |
第二章 隐孢子虫P23 基因的原核表达 | 第47-67页 |
· 实验材料 | 第47-51页 |
· 质粒与菌株 | 第47页 |
· 主要试剂 | 第47-48页 |
· 血清 | 第48页 |
· 主要溶液的配制 | 第48-50页 |
· 主要仪器 | 第50-51页 |
· 实验方法 | 第51-62页 |
· 重组质粒pMD18-T-P23 的鉴定 | 第51-54页 |
· 原核表达质粒pGEX-P23 的构建与鉴定 | 第54-57页 |
· 重组质粒pGEX-P23 的表达与表达产物的纯化 | 第57-61页 |
· rP23 的Western blot分析 | 第61-62页 |
· 结果 | 第62-66页 |
· 重组质粒pMD18-T-P23 的鉴定 | 第62-63页 |
· 原核表达质粒pGEX-P23 的鉴定 | 第63-64页 |
· 重组质粒 pGEX-P23 转化菌的表达及表达产物的纯化 | 第64-65页 |
· rP23 的 Western blot 分析结果 | 第65-66页 |
· 讨论 | 第66-67页 |
第三章 隐孢子虫抗体间接ELISA检测方法的建立 | 第67-83页 |
· 材料与方法 | 第67-69页 |
· 质粒与菌株 | 第67页 |
· 主要试剂 | 第67页 |
· 血清及粪便样品 | 第67-68页 |
· 主要溶液的配制 | 第68页 |
· 主要仪器 | 第68-69页 |
· 实验方法 | 第69-73页 |
· rP23-ELISA间接诊断方法的建立 | 第69-70页 |
· 田间样品检测 | 第70-73页 |
· 结果 | 第73-80页 |
· 间接ELISA检测方法的建立 | 第73-78页 |
· 田间样品检测及敏感性、特异性试验 | 第78-80页 |
· 讨论 | 第80-83页 |
第四章 微小隐孢子虫在HCT-8 细胞上的培养研究 | 第83-99页 |
· 实验材料 | 第83-85页 |
· 细胞与菌株 | 第83页 |
· 主要试剂 | 第83-84页 |
· 主要溶液的配制 | 第84页 |
· 主要仪器 | 第84-85页 |
· 实验方法 | 第85-89页 |
· HCT-8 细胞的培养 | 第85页 |
· HCT-8 细胞培养方法的优化 | 第85-86页 |
· 微小隐孢子虫卵囊收集与纯化 | 第86-87页 |
· 微小隐孢子虫的体外培养 | 第87页 |
· 微小隐孢子虫体外培养各阶段形态的免疫荧光观察 | 第87-89页 |
· 实验结果 | 第89-95页 |
· HCT-8 细胞培养方法的优化 | 第89-92页 |
· 微小隐孢子虫收集与纯化 | 第92-93页 |
· 微小隐孢子虫卵囊活力检测 | 第93页 |
· 微小隐孢子虫体外培养各阶段形态的免疫荧光观察 | 第93-95页 |
· 讨论 | 第95-99页 |
第五章 微小隐孢子虫体内瞬时转染系统的初步研究 | 第99-123页 |
· 实验材料 | 第99-101页 |
· 细胞与菌株 | 第99-100页 |
· 主要试剂 | 第100页 |
· 主要溶液的配制 | 第100-101页 |
· 主要仪器 | 第101页 |
· 实验方法 | 第101-115页 |
· 启动子序列的克隆 | 第101-106页 |
· EGFP表达盒转染质粒(含有TUB-3'UTR)的构建 | 第106-109页 |
· EGFP表达盒转染载体(除TUB-3'UTR)的构建 | 第109-111页 |
· 电穿孔转染 | 第111-113页 |
· 转染隐孢子虫EGFP表达检测 | 第113-115页 |
· 结果 | 第115-120页 |
· 启动子序列的克隆 | 第115-117页 |
· EGFP表达盒转染载体的构建 | 第117页 |
· 转染隐孢子虫EGFP表达检测 | 第117-120页 |
· 讨论 | 第120-123页 |
第六章 全文结论 | 第123-125页 |
·隐孢子虫 P23 基因的原核表达 | 第123页 |
·隐孢子虫抗体间接 ELISA 诊断方法的建立 | 第123页 |
·微小隐孢子虫在 HCT-8 细胞上的培养研究 | 第123页 |
·微小隐孢子虫体内瞬时转染系统的初步研究 | 第123-125页 |
参考文献 | 第125-139页 |
致谢 | 第139-140页 |
作者简历 | 第140页 |