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PL3基因编辑水稻编辑位点检测方法的研究

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PL3基因编辑水稻编辑位点检测方法的研究
论文目录
 
摘要第1-12页
Abstract第12页
第一章 引言第13-19页
    1.1 基因编辑技术第13-16页
        1.1.1 基因编辑技术的原理与分类第13页
        1.1.2 CRISPR/Cas9技术在植物育种中的应用第13-14页
        1.1.3 CRISPR/Cas9技术在水稻中的应用第14页
        1.1.4 国际基因组编辑植物安全评价及监管现状第14-15页
        1.1.5 我国基因组编辑作物安全管理第15-16页
    1.2 基因编辑作物检测方法第16-18页
        1.2.1 焦磷酸测序技术第16页
        1.2.2 高分辨率溶解曲线技术第16-17页
        1.2.3 数字PCR技术第17-18页
    1.3 研究目的与内容第18-19页
        1.3.1 研究目的第18页
        1.3.2 研究内容第18页
        1.3.3 技术路线图第18-19页
第二章 试验材料与DNA分子鉴定第19-23页
    2.1 试验材料第19页
    2.2 试验仪器第19页
    2.3 试验试剂第19页
    2.4 DNA分子鉴定第19-21页
        2.4.1 基因组DNA提取第19-20页
        2.4.2 引物设计第20页
        2.4.3 DNA分子验证第20-21页
    2.5 结果与分析第21-23页
        2.5.1 基因型PCR结果分析第21-22页
        2.5.2 测序结果分析第22-23页
第三章 PL3基因编辑水稻焦磷酸测序检测技术研究第23-30页
    3.1 试验仪器和试剂第23页
        3.1.1 试验仪器第23页
        3.1.2 试验试剂第23页
    3.2 试验方法第23-26页
        3.2.1 引物设计第23-24页
        3.2.2 PL3基因编辑水稻焦磷酸测序引物有效性检测第24-25页
        3.2.3 PL3基因编辑水稻焦磷酸测序基因分型定性检测第25页
        3.2.4 PL3基因编辑水稻焦磷酸测序基因分型定量检测第25-26页
    3.3 结果与分析第26-29页
        3.3.1 PL3基因编辑水稻焦磷酸测序引物有效性检测第26页
        3.3.2 PL3基因编辑水稻焦磷酸测序基因分型定性检测第26-27页
        3.3.3 PL3基因编辑水稻焦磷酸测序基因分型定量检测第27-29页
    3.4 小结第29-30页
第四章 PL3基因编辑水稻高分辨率溶解曲线检测技术研究第30-38页
    4.1 试验仪器和试剂第30页
        4.1.1 试验仪器第30页
        4.1.2 试验试剂第30页
    4.2 试验方法第30-34页
        4.2.1 引物设计第30页
        4.2.2 引物有效性检测第30-31页
        4.2.3 基因分型定性检测第31页
        4.2.4 退火温度和引物浓度优化第31-34页
        4.2.5 基因分型定量检测第34页
    4.3 试验结果与分析第34-37页
        4.3.1 PL3基因编辑水稻高分辨率溶解曲线检测引物有效性第34页
        4.3.2 PL3基因编辑水稻高分辨率溶解曲线检测基因分型定性检测第34-35页
        4.3.3 PL3基因编辑水稻高分辨率溶解曲线检测体系优化第35-36页
        4.3.4 PL3基因编辑水稻高分辨率溶解曲线检测基因分型定量检测第36-37页
    4.4 小结第37-38页
第五章 PL3基因编辑水稻双重数字PCR检测技术研究第38-48页
    5.1 试验仪器和试剂第38页
        5.1.1 试验仪器第38页
        5.1.2 试验试剂第38页
    5.2 试验方法第38-41页
        5.2.1 引物和探针设计第38页
        5.2.2 反应体系的建立及稳定性试验第38-39页
        5.2.3 方法特异性试验第39-40页
        5.2.4 引物、探针及退火温度的优化第40页
        5.2.5 定量范围检测第40页
        5.2.6 最低检出限LOQ验证第40-41页
    5.3 结果与分析第41-47页
        5.3.1 PL3基因编辑水稻双重数字PCR检测的稳定性和特异性第41-43页
        5.3.2 PL3基因编辑水稻双重数字PCR检测的条件优化第43-45页
        5.3.3 PL3基因编辑水稻双重数字PCR检测的定量范围第45-47页
    5.4 小结第47-48页
第六章 讨论与结论第48-50页
    6.1 讨论第48-49页
    6.2 结论第49-50页
参考文献第50-53页
致谢第53页

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