教育论文网

表达RGD和MEL基因重组减毒沙门氏菌的构建及其对黑色素瘤的靶向治疗作用

硕士博士毕业论文站内搜索    
分类:教育论文网→农业科学论文→畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂论文动物医学(兽医学)论文家畜肿瘤学论文
表达RGD和MEL基因重组减毒沙门氏菌的构建及其对黑色素瘤的靶向治疗作用
论文目录
 
摘要第1-23页
Abstract第23-25页
第一章 引言第26-37页
    1.1 减毒沙门氏菌在肿瘤基因治疗中的研究进展第26-30页
        1.1.1 细菌治疗肿瘤的研究背景第26-28页
        1.1.2 沙门氏菌载体在肿瘤治疗中的研究现状和问题第28-30页
            1.1.2.1 沙门氏菌载体在肿瘤治疗中的研究现状第28-29页
            1.1.2.2 沙门氏菌载体在肿瘤治疗中的问题第29-30页
    1.2 肿瘤靶向肽在肿瘤治疗中的作用机制和研究进展第30-32页
        1.2.1 RGD靶向肿瘤的作用机制第30-31页
        1.2.2 RGD治疗肿瘤的研究进展第31-32页
    1.3 蜂毒肽的抑瘤机制及研究进展第32-34页
        1.3.1 蜂毒肽作为药物的研究背景第32-33页
        1.3.2 蜂毒肽的抑瘤活性及存在问题第33-34页
    1.4 研究方案第34-37页
        1.4.1 技术路线第35-36页
        1.4.2 研究内容和意义第36-37页
第二章 表达RGD及MEL双基因减毒沙门氏菌的制备第37-64页
    第一节 表达RGD及MEL双基因真核表达质粒的构建第37-48页
        2.1 材料与方法第37-45页
            2.1.1 材料第37-39页
                2.1.1.1 菌株、细胞系和载体第37页
                2.1.1.2 试剂第37-38页
                2.1.1.3 主要仪器第38页
                2.1.1.4 溶液和培养基第38-39页
            2.1.2 方法第39-45页
                2.1.2.1 大肠杆菌感受态细胞的制备第39-40页
                2.1.2.2 引物设计第40页
                2.1.2.3 重组质粒p MD-RGD-MEL和pMD-MEL的提取第40-41页
                2.1.2.4 pEGFP-N1和p MD-RGD-MEL、pMD-MEL的双酶切第41页
                2.1.2.5 产物回收第41-42页
                2.1.2.6 质粒的制备与鉴定第42-44页
                2.1.2.7 重组质粒图谱第44-45页
        2.2 结果与分析第45-47页
            2.2.1 RGD-MEL及MEL基因扩增第45页
            2.2.2 pEGFP-RGD-MEL重组表达质粒的鉴定第45-46页
            2.2.3 pEGFP-MEL重组表达质粒的鉴定第46-47页
        2.3 讨论第47页
        2.4 小结第47-48页
    第二节 重组减毒沙门氏菌LH430/pEGFP-RGD-MEL的制备及稳定性检测第48-64页
        2.5 材料与方法第48-56页
            2.5.1 材料第48-49页
                2.5.1.1 菌株、细胞系和载体第48页
                2.5.1.2 主要试剂第48-49页
                2.5.1.3 主要仪器第49页
            2.5.2 方法第49-56页
                2.5.2.1 重组减毒沙门氏菌LH430感受态细胞的制备第49-50页
                2.5.2.2 重组减毒沙门氏菌的构建与鉴定第50-51页
                2.5.2.3 重组减毒沙门氏菌遗传稳定性鉴定第51页
                2.5.2.4 全自动生长曲线分析仪记录LH430/pEGFP-RGD-MEL生长曲线第51-52页
                2.5.2.5 B16细胞的培养第52-53页
                2.5.2.6 重组减毒沙门氏菌侵染B16细胞第53页
                2.5.2.7 重组减毒沙门氏菌侵染B16细胞总RNA的提取第53-54页
                2.5.2.8 RT-PCR检测目的基因RGD-MEL和MEL的表达第54页
                2.5.2.9 Western blotting检测第54-56页
        2.6 结果与分析第56-62页
            2.6.1 重组减毒沙门氏菌的制备与鉴定第56-57页
            2.6.2 重组减毒沙门氏菌的稳定性第57-58页
            2.6.3 重组减毒沙门氏菌生长曲线的测定第58-59页
            2.6.4 重组减毒沙门氏菌侵染B16细胞检测结果第59-61页
            2.6.5 RT-PCR检测目的基因表达第61页
            2.6.6 Western Blotting检测蛋白表达结果第61-62页
        2.7 讨论第62页
        2.8 小结第62-64页
第三章 LH430/pEGFP-RGD-MEL的体外抑瘤作用的研究第64-82页
    3.1 材料与方法第64-70页
        3.1.1 材料第64-66页
            3.1.1.1 菌株、细胞系和载体第64页
            3.1.1.2 主要试剂第64-65页
            3.1.1.3 主要仪器第65-66页
        3.1.2 方法第66-70页
            3.1.2.1 细胞培养第66页
            3.1.2.2 LH430/pEGFP-RGD-MEL侵染细胞第66页
            3.1.2.3 CCK-8 法检测LH430/pEGFP-RGD-MEL对细胞增殖作用的影响第66-67页
            3.1.2.4 Western blotting检测B16细胞中凋亡蛋白第67页
            3.1.2.5 扫描电镜观察第67-68页
            3.1.2.6 流式细胞术检测B16细胞凋亡情况第68页
            3.1.2.7 细胞划痕试验检测B16细胞迁移能力第68-69页
            3.1.2.8 细胞趋化试验检测FBS介导B16细胞的迁移能力第69页
            3.1.2.9 细胞侵袭试验检测B16细胞的侵袭能力第69-70页
    3.2 结果与分析第70-80页
        3.2.1 LH430/pEGFP-RGD-MEL抑制肿瘤细胞及正常细胞增殖作用的测定第70-72页
        3.2.2 LH430/pEGFP-RGD-MEL对肿瘤细胞及正常细胞的IC50值第72-73页
        3.2.3 LH430/pEGFP-RGD-MEL侵染B16细胞中凋亡蛋白的表达第73页
        3.2.4 扫描电镜观察LH430/pEGFP-RGD-MEL侵染B16细胞表面形态变化第73-74页
        3.2.5 LH430/pEGFP-RGD-MEL对B16细胞的凋亡作用第74-76页
        3.2.6 LH430/pEGFP-RGD-MEL抑制B16细胞迁移情况第76-79页
        3.2.7 LH430/pEGFP-RGD-MEL可抑制FBS介导的B16细胞迁移第79页
        3.2.8 LH430/pEGFP-RGD-MEL可抑制B16细胞的侵袭能力第79-80页
    3.3 讨论第80-81页
    3.4 小结第81-82页
第四章 小鼠黑色素瘤模型的构建第82-94页
    4.1 材料与方法第82-86页
        4.1.1 材料第82-83页
            4.1.1.1 细胞系和试验动物第82页
            4.1.1.2 主要试剂第82页
            4.1.1.3 主要仪器第82-83页
        4.1.2 方法第83-86页
            4.1.2.1 B16实体瘤模型的建立与荷瘤小鼠的治疗第83页
            4.1.2.2 荷瘤小鼠活体成像第83-84页
            4.1.2.3 Q-PCR检测RGD-MEL基因在各组织中的表达第84-86页
    4.2 结果与分析第86-92页
        4.2.1 荷瘤小鼠生存曲线及体重变化曲线第86-88页
        4.2.2 LH430/pEGFP-RGD-MEL对荷瘤小鼠内脏器官及肿瘤重量的影响第88-91页
        4.2.3 小鼠活体成像结果第91页
        4.2.4 Q-PCR检测各组织MEL基因表达量第91-92页
    4.3 讨论第92-93页
    4.4 小结第93-94页
第五章 小鼠黑色素瘤模型的病理学检测第94-105页
    5.1 材料与方法第94-98页
        5.1.1 材料第94-95页
            5.1.1.1 试验组织第94页
            5.1.1.2 主要试剂第94-95页
            5.1.1.3 主要仪器第95页
            5.1.1.4 试验试剂第95页
        5.1.2 方法第95-98页
            5.1.2.1 冰冻切片的制备第95-96页
            5.1.2.2 病理切片的制备及HE染色第96页
            5.1.2.3 免疫组织化学染色第96-97页
            5.1.2.4 TUNEL法染色第97页
            5.1.2.5 肿瘤组织细菌计数第97-98页
    5.2 结果与分析第98-103页
        5.2.1 肿瘤组织冰冻切片结果第98页
        5.2.2 各组织HE染色结果第98-101页
        5.2.3 各肿瘤组织免疫组织化学染色结果第101页
        5.2.4 TUNEL法检测肿瘤组织中细胞凋亡状况第101-103页
        5.2.5 肿瘤组织中细菌残留状况第103页
    5.3 讨论第103-104页
    5.4 小结第104-105页
第六章 RNA-seq研究LH430/pEGFP-RGD-MEL抑瘤机理第105-111页
    6.1 材料与方法第105-106页
        6.1.1 材料第105-106页
            6.1.1.1 试验组织第105页
            6.1.1.2 主要试剂第105页
            6.1.1.3 主要仪器第105-106页
        6.1.2 方法第106页
            6.1.2.1 肿瘤组织中RNA提取第106页
            6.1.2.2 RNA质量检测第106页
            6.1.2.3 RNA文库构建第106页
    6.2 结果与分析第106-109页
        6.2.1 测序组装结果统计第106-107页
        6.2.2 差异基因富集功能分析第107-108页
        6.2.3 差异基因的KEGG代谢通路结果分析第108页
        6.2.4 深入分析结果第108-109页
    6.3 讨论第109-110页
    6.4 小结第110-111页
结论第111-112页
论文创新点第112-113页
参考文献第113-120页
附录一 序列信息第120-121页
附录二 测序报告第121-122页
攻读硕士学位期间发表的论文第122-124页
致谢第124页

本篇论文共124页,点击这进入下载页面
 
更多论文
表达RGD和MEL基因重组减毒沙门氏菌
禽心包积液-肝炎综合征IgY脂质体的
基于响应性聚集金纳米粒子体系用于
mTERT与mTyr双启动子联合调控HN基因
采摘机械臂的运动路径规划研究
日粮添加有机锌、有机铁对芦花鸡蛋
不同菌种制备的发酵牛肉调味基料抑
市售普通鸡蛋、柴鸡蛋和乌鸡蛋中维
乳酸菌降低红肠中N-亚硝胺形成的工
南瓜多糖与人参皂苷或芦丁的联合体
鸡蛋液喷雾干燥工艺参数优化研究
Ⅱa类细菌素抗性的产生及机理研究
调味辣椒鸡油的研制及辣椒素对鸡油
杏仁主要过敏原鉴定及其脱敏方法研
鱼糜制品加工过程中脂肪对N-亚硝胺
养殖盐度和密度对斑节对虾肉质及风
饲料中添加根瘤菌对凡纳滨对虾生长
斑点叉尾鮰调味鱼贮藏过程中品质变
优质食味水稻品系的理化特性和食味
驴精液低温和冷冻保存研究
冲调粉的研制及其体外消化特性和抗
围填海工程对天津近海鱼类资源的影
冬小麦、夏玉米复种下土壤调理剂对
鸡粪促进餐厨垃圾高负荷厌氧发酵特
盐碱地滴灌土壤—玉米系统中盐离子
温室滴灌典型作物经济灌水下限研究
天津地区玫瑰香葡萄功能成分解析研
自主移动药肥共施机器人的研发
单体动力电池性能检测系统开发
玉米秸秆栽培毛头鬼伞及其菌糠对玉
地西泮残留检测的间接竞争ELISA方法
果糖和海藻酸钠对猪精液4℃低温保存
稀有鮈鲫卵细胞系的建立及其对草鱼
西式培根中N-亚硝胺形成的影响因素
体外模拟冬枣发酵前后小分子糖的变
农田土壤水盐动态模拟及调控增产效
设施种植条件下西红柿耗水规律研究
山西省典型作物经济灌溉制度研究
天津市平原区地下水压采方案及修复
“雍贝”金果梨智能化溯源管理体系
深化县级农业行政管理体制改革研究
天津市设施蔬菜经营主体生产效率研
菏泽市农村电商发展的政策支持研究
天津小站稻区域公用品牌竞争力提升
天津市农民教育培训体系优化研究
天津市多兴庄园蔬菜会员制模式研究
江西省于都县和泰生态农业园区建设
基于价值创造理论的乡村产业融合发
基于差异化战略的天津水稻产业竞争
J公司绩效评价方法研究
天津蓟州区粮食作物种子经营服务体
基于杜邦分析法下的TF房地产集团盈
怀宁县农田发展稻渔综合种养成效分
A房地产开发集团有限公司现金流优化
LN公司融资结构研究
文化引领的农业产业融合模式及路径
NA建筑公司财务风险管理研究
H城投集团债务风险控制研究
共享经济视角下乡村物流配送模式优
SG公司目标成本管理优化研究
业绩难过汇率关?——DF航空公司案
天津市田园综合体发展路径研究
TZ农业合作社供应链融资研究
天士力医药集团股份有限公司社会责
HT机械制造公司资本结构优化研究
基于灰色关联的T乳业有限公司成本控
多元化经营视角下A企业集团现金流管
农村集体产权制度改革的会计问题研
WJ有限公司作业成本法应用研究
天津市蔬菜种业品牌竞争力提升研究
收益法在Z公司无形资产价值评估中的
去杠杆背景下D公司财务风险控制研究
价值链视角下JM公司成本管理研究
M公司股权激励方案设计
基于战略导向的XX公司的全面预算管
XZ公司财务诊断研究
Y公司营运资金风险的识别评价与控制
Y集团市场化债转股财务绩效研究
要素-渠道双视角下营运资金管理研究
基于EVA的G公司企业价值评估研究
D公司利润质量分析
金税三期背景下H公司税务风险预警体
政府会计制度下TN高校财务信息化建
T高校内部控制信息化建设问题研究
风味鸡蛋干工艺优化及贮藏特性研究
铜绿假单胞菌YY24脱氮过程中基因克
地方黑猪单核细胞趋化蛋白-1表达及
基于游离氨基酸和生物胺的牛乳腐败
不同配比中药渣基质对知母生长及质
早酥梨销地适宜臭氧及紫外线处理浓
石斑鱼工厂化健康养殖技术研究进展
凡纳滨对虾诱食剂的研究
利用秋水仙素诱导黑果枸杞多倍体研
树莓耐盐突变体的鉴定以及蛋白质组
降温方式对晚采鸭梨采后生理及褐变
盐碱地上彩叶树的年轮生态反应值、
基于稳定性同位素和脂肪酸谱分析的
副溶血弧菌和黄曲霉毒素B1对凡纳滨
南美白对虾苗种标粗及成虾养殖实践
喂食当归多糖对点带石斑鱼生长、抗
根瘤菌JX566662培养基选择、优化及
姜黄素和岩藻黄质对黄颡鱼生长、消
蛋氨酸铬对鲤鱼生长及糖代谢调控的
混养池塘生物膜微生物群落结构及碳
饲料不同糖水平对鲤生长、肝胰脏组
不同大小黄颡鱼品质差异性的研究
3种地被植物耐盐性差异及外源钙对其
类鼻疽GEM颗粒疫苗的初步研究
青蛤对海水酸化的响应
绿宝苹果授粉品种的筛选及其花芽形
miR-143对牛骨骼肌卫星细胞成肌分化
珍珠龙胆工厂化循环水养殖技术研究
饲料中添加几种益生菌和益生元(酵
生态基对养殖池塘环境微生物群落结
万寿菊粉与角黄素对黄金锦鲤着色、
基于动态聚类方法的东中国海生态分
应用高光谱技术快速测量液态奶中脂
基于二维相关荧光谱土壤中多环芳烃
京津冀地区凡纳滨对虾养殖现状调查
天津市观赏鱼市场调查以及前景分析
天津海水工厂化养殖现状及发展研究
裂壶藻和钝顶螺旋藻对津新鲤生长、
噬菌体蛋白应用于李斯特菌快速检测
7个樱桃品种的果实特性与果实品质研
Ec-cLYZ基因和hLTF基因重组腺病毒的
人工鱼礁构建对渤海湾西岸小型底栖
牛蛙凝集素的小鼠体内组织分布及抗
黑鲷荧光标记技术试验研究
高粱基因型与环境单因子互作及农艺
绿宝苹果与不同砧木嫁接亲和性研究
几种苹果属植物抗逆性研究
蓝莓有机生态型无土栽培基质筛选研
EPS菌剂对土壤水肥保持及作物生长的
半滑舌鳎对纳米锌、纳米铜需求量的
饲料不同糖脂比和烟酸铬对津新鲤生
中华胭脂鱼胚胎发育、幼鱼耗氧率及
“冀研一号”东方鲀遗传特征和免疫
当归多糖对点带石斑鱼头肾白细胞免
两种海洋饵料微藻对共栖异养细菌和
环境因子对小球藻生长、蛋白质含量
珠美海棠Mz2NHX1<
高温和弱光胁迫对水稻产量、品质·
不同灌溉条件下水稻产量和稻米品质
IBV S1基因和MG TM-1基因重组腺病毒
不同脂肪源饲料对津新鲤(Cyprinus
磺胺甲噁唑在吉富罗非鱼(GIFT Ore
牛CMYA1互作蛋白的筛选及其结构域初
循环水养殖系统中可培养细菌的构成
环境胁迫对豹纹鳃棘鲈(Plectropomu
单方中草药对半滑舌鳎生化指标和抗
投喂频率对点带石斑鱼生长、生理生
大亚湾海域珊瑚资源恢复技术研究
不同水质条件下点带石斑鱼异常行为
鳜养殖池塘好氧反硝化菌的分离鉴定
水产品及养殖水体中5类42种兽药同时
 
RGD基因论文 MEL基因论文 减毒沙门氏菌论文 黑色素瘤论文 靶向治疗论文
版权申明:目录由用户lianghuifa**提供,www.51papers.com仅收录目录,作者需要删除这篇论文目录请点击这里
| 设为首页||加入收藏||站内搜索引擎||站点地图||在线购卡|
版权所有 教育论文网 Copyright(C) All Rights Reserved