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类鼻疽GEM颗粒疫苗的初步研究

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类鼻疽GEM颗粒疫苗的初步研究
论文目录
 
中文摘要第1-13页
英文摘要第13-15页
第一章 引言第15-31页
    1.1 乳酸菌及其应用第15-17页
        1.1.1 乳酸菌的概述第15页
        1.1.2 乳酸菌的应用前景第15-17页
    1.2 乳酸菌表面展示系统第17-23页
        1.2.1 乳酸菌表面展示抗原蛋白第17-18页
        1.2.2 乳酸菌表面展示的结合方式第18-19页
        1.2.3 非共价结合乳酸菌表面的锚定结构域第19-22页
        1.2.4 细菌样颗粒第22-23页
    1.3 乳酸菌GEM-PA表面展示系统第23-27页
        1.3.1 乳酸菌GEM-PA系统在疫苗研究和应用中的优势第23-25页
        1.3.2 乳酸菌GEM-PA系统在疫苗应用方面的新进展第25-27页
    1.4 类鼻疽的相关研究概况第27-30页
        1.4.1 类鼻疽杆菌与类鼻疽第27-28页
        1.4.2 类鼻疽疫苗候选抗原介绍第28-29页
        1.4.3 类鼻疽疫苗研究面临的挑战第29-30页
    1.5 本研究的目的及意义第30-31页
第二章 GEM-PA系统表面展示平台的建立第31-54页
    2.1 试验材料第31-33页
        2.1.1 菌株第31页
        2.1.2 试验试剂第31页
        2.1.3 试验主要仪器第31-32页
        2.1.4 培养基及溶液第32页
        2.1.5 主要试剂配制第32-33页
    2.2 试验方法第33-40页
        2.2.1 锚定蛋白的制备与筛选第33-35页
        2.2.2 GEM颗粒的制备与筛选第35-36页
        2.2.3 GEM颗粒制备工艺的优化第36-37页
        2.2.4 GEM颗粒透射电镜观察及核酸残留的测定第37-39页
        2.2.5 锚定蛋白与GEM颗粒的结合与鉴定第39-40页
        2.2.6 颗粒定量结合融合荧光蛋白试验第40页
    2.3 试验结果第40-51页
        2.3.1 融合蛋白的制备与筛选第40-42页
        2.3.2 GEM颗粒的筛选第42-43页
        2.3.3 GEM颗粒制备工艺的优化第43-44页
        2.3.4 透射电镜观察GEM颗粒第44-45页
        2.3.5 GEM颗粒核酸残留的测定第45-46页
        2.3.6 SDS-PAGE和 Western Blot鉴定GEM颗粒与融合蛋白的结合第46-47页
        2.3.7 结合后GEM颗粒荧光倒置显微镜的观察第47-48页
        2.3.8 结合后的GEM颗粒透射电镜的观察鉴定第48-49页
        2.3.9 结合后荧光强度检测第49-50页
        2.3.10 颗粒定量结合融合蛋白试验第50-51页
    2.4 讨论第51-54页
第三章 类鼻疽细菌样颗粒疫苗的制备及免疫评价第54-74页
    3.1 试验材料第54-55页
        3.1.1 菌株与实验动物第54页
        3.1.2 试验试剂第54页
        3.1.3 试验主要仪器和耗材第54-55页
        3.1.4 相关溶液的配制第55页
    3.2 试验方法第55-63页
        3.2.1 引物设计与目的基因扩增第55-57页
        3.2.2 原核表达载体的构建第57-59页
        3.2.3 融合蛋白的诱导表达第59页
        3.2.4 与GEM颗粒的结合及鉴定第59页
        3.2.5 动物免疫及抗体检测第59-63页
    3.3 结果第63-72页
        3.3.1 重组质粒的构建及鉴定第63-64页
        3.3.2 融合蛋白的表达第64-65页
        3.3.3 GEM颗粒展示类鼻疽融合蛋白的鉴定第65-67页
        3.3.4 类鼻疽细菌样颗粒疫苗的免疫评价第67-72页
    3.4 讨论第72-74页
第四章 结论第74-75页
参考文献第75-80页
致谢第80-81页
附录第81-82页
攻读学位期间发表的论文第82页

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