论文目录 | |
| 摘要 | 第1-12页 |
| Abstract | 第12-13页 |
| 缩略词表 | 第14-15页 |
| 第一章 引言 | 第15-22页 |
| 1.1 耐盐基因 Na~＋/H~＋逆向转运蛋白基因（NHX1）的研究进展 | 第15-17页 |
| 1.2 其它耐盐基因在转基因应用中研究进展 | 第17页 |
| 1.3 耐盐基因表达图谱的微阵列研究 | 第17页 |
| 1.4 超声波介导的遗传转化及其转基因应用 | 第17-18页 |
| 1.4.1 超声波的作用机理 | 第17-18页 |
| 1.4.2 超声波介导法的研究进展 | 第18页 |
| 1.5 珠美海棠研究进展 | 第18-20页 |
| 1.5.1 珠美海棠的耐盐性研究 | 第18-19页 |
| 1.5.2 珠美海棠作为优良的耐盐砧木的研究 | 第19页 |
| 1.5.3 珠美海棠组织培养的研究 | 第19-20页 |
| 1.6 本研究的目的、意义和内容 | 第20-22页 |
| 1.6.1 本研究的目的和意义 | 第20页 |
| 1.6.2 本研究的主要内容 | 第20-22页 |
| 第二章 珠美海棠愈伤组织诱导及植株再生体系的建立 | 第22-33页 |
| 2.1 材料与方法 | 第22-24页 |
| 2.1.1 试验材料及试验地点 | 第22页 |
| 2.1.2 外植体取材时间 | 第22页 |
| 2.1.3 外植体的消毒时间的筛选 | 第22-23页 |
| 2.1.4 愈伤组织诱导 | 第23页 |
| 2.1.5 愈伤组织诱导中基本培养基的碳源 | 第23页 |
| 2.1.6 愈伤组织诱导中的暗培养时间 | 第23页 |
| 2.1.7 愈伤组织分化芽的诱导 | 第23页 |
| 2.1.8 继代培养 | 第23-24页 |
| 2.1.9 生根培养 | 第24页 |
| 2.2 结果与分析 | 第24-30页 |
| 2.2.1 不同取材时间对愈伤组织诱导的影响 | 第24-25页 |
| 2.2.2 不同的消毒时间对外植体消毒效果的影响 | 第25页 |
| 2.2.3 不同激素配比对愈伤组织诱导的影响 | 第25-26页 |
| 2.2.4 不同碳源对愈伤组织诱导的影响 | 第26页 |
| 2.2.5 不同暗培养时间对愈伤组织诱导的影响 | 第26-27页 |
| 2.2.6 不同激素配比对愈伤组织诱导芽分化的影响 | 第27-28页 |
| 2.2.7 不同激素配比对愈伤组织分化芽增殖的影响 | 第28-29页 |
| 2.2.8 不同激素对珠美海棠试管苗生根的影响 | 第29-30页 |
| 2.3 讨论与小结 | 第30-33页 |
| 第三章 超声波介导的珠美海棠遗传转化体系的建立 | 第33-53页 |
| 3.1 材料和方法 | 第33-40页 |
| 3.1.1 试验材料 | 第33-34页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第34-35页 |
| 3.1.2.1 培养基配置 | 第34-35页 |
| 3.1.3 PRI201-AN-GUS-Mz2NHX1表达载体菌液质粒扩增 | 第35页 |
| 3.1.4 蓝白斑筛选 | 第35页 |
| 3.1.5 阳性克隆的检测 | 第35-36页 |
| 3.1.5.1 菌落PCR检测 | 第35-36页 |
| 3.1.5.2 质粒DNA的酶切 | 第36页 |
| 3.1.6 Mz_2NHX_1 基因 PCR 鉴定 | 第36页 |
| 3.1.7 超声波介导法转化珠美海棠 | 第36-37页 |
| 3.1.7.1 超声波反应缓冲液体系 | 第36-37页 |
| 3.1.7.2 超声波处理 | 第37页 |
| 3.1.8 愈伤组织对卡那霉素的敏感性试验 | 第37页 |
| 3.1.9 珠美海棠转化后植株的再生 | 第37页 |
| 3.1.10 珠美海棠转化后再生植株的 GUS 组织化学染色 | 第37-38页 |
| 3.1.11 阳性苗的RT-PCR检测 | 第38-39页 |
| 3.1.12 实时荧光定量PCR | 第39-40页 |
| 3.1.12.1 实时荧光定量PCR反应体系 | 第39页 |
| 3.1.12.2 荧光定量PCR程序运行及基因表达测定设置信息 | 第39-40页 |
| 3.1.13 转化苗的盐处理试验 | 第40页 |
| 3.2 结果与分析 | 第40-50页 |
| 3.2.1 pRI201-AN-GUS DNA-Mz_2NHX_1 表达载体的扩增与筛选 | 第40页 |
| 3.2.2 表达载体的菌落PCR鉴定 | 第40-41页 |
| 3.2.3 质粒DNA提取及PCR和双酶切鉴定 | 第41-43页 |
| 3.2.4 超声波介导的Mz2NHX1 基因对珠美海棠的转化结果 | 第43页 |
| 3.2.5 珠美海棠愈伤组织对卡那霉素的敏感性试验结果 | 第43-44页 |
| 3.2.6 珠美海棠转化后分化苗的诱导与植株再生 | 第44-45页 |
| 3.2.7 珠美海棠转化苗GUS组织化学染色 | 第45页 |
| 3.2.8 珠美海棠Mz2NHX1 基因表达的RT-PCR分析 | 第45-46页 |
| 3.2.9 珠美海棠转化苗中Mz2NHX1 基因的表达量分析 | 第46-48页 |
| 3.2.10 盐处理下珠美海棠转化苗耐盐性的分析 | 第48-50页 |
| 3.2.10.1 珠美海棠转化苗中POD的活性分析 | 第48-49页 |
| 3.2.10.2 珠美海棠转化苗中SOD的活性分析 | 第49页 |
| 3.2.10.3 珠美海棠转化苗中MDA的含量分析 | 第49-50页 |
| 3.3 讨论 | 第50-53页 |
| 第四章 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 附录 | 第61-63页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文及参与的科研项目 | 第63页 |
