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原核表达的rADTZ复性及性质研究

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原核表达的rADTZ复性及性质研究
论文目录
 
摘要第1-6 页
Abstract第6-8 页
目录第8-11 页
第一章 前言第11-30 页
  · 黄曲霉毒素的简介第11 页
  · 黄曲霉毒素的结构及其理化特性第11-12 页
  · 黄曲霉毒素的生物合成第12-13 页
  · 黄曲霉毒素的危害第13-14 页
  · 黄曲霉毒素去毒化的研究进展第14-17 页
    · 物理化学去毒第14-15 页
    · 生物学去毒第15-17 页
  · 蛋白质的体外复性第17-26 页
    · 蛋白质的折叠机理第17-18 页
    · 复性的基本原则第18 页
    · 复性的方法第18-21 页
      · 稀释复性第19 页
      · 膜控制的变性剂除去过程第19 页
      · 色谱复性技术第19-21 页
    · 影响复性效率的环境因素第21-25 页
    · 复性结果的检测方法第25-26 页
  · 圆二色谱在结构生物学研究中的应用第26-27 页
  · 等温滴定微量热法第27-28 页
  · 研究背景、目的与意义第28-30 页
第二章 实验设备及材料第30-34 页
  · 主要仪器设备第30 页
  · 试剂第30-34 页
    · 常用试剂第30-31 页
    · 培养基&其他试剂第31-34 页
第三章 实验方法第34-46 页
  · MBP_ADTZ融合蛋白的诱导表达第34-37 页
  · MBP_ADTZ融合蛋白的亲和层析第37-38 页
    · MBP_ADTZ融合蛋白的亲和层析第37 页
    · MBP_ADTZ融合蛋白的亲和层析pH的优化第37-38 页
  · 酶切MBP_ADTZ融合蛋白,释放rADTZ第38-39 页
  · 复性第39-43 页
    · 待复性rADTZ的变性第39 页
    · 复性体系的设计第39-40 页
    · 复性第40-41 页
    · 复性条件的优化第41-42 页
    · 氧化还原条件对复性的影响第42 页
    · 复性后rADTZ活性的测定第42-43 页
  · 复性产物的分离纯化第43-44 页
    · 复性产物的Phenyl Sepharose 6 Fast Flow疏水柱层析第43-44 页
    · 复性产物的Superose~(TM) 12 10/300 GL分子筛层析第44 页
  · 复性后rADTZ二级结构的圆二色性分析第44-45 页
  · 复性后rADTZ分子间二硫键的分析第45 页
  · rADTZ活性中心金属离子结合的分析第45-46 页
第四章 实验结果第46-69 页
  · 高表达量的重组菌的筛选结果第46-47 页
  · MBP_ADTZ融合蛋白的可溶性分析第47 页
  · 重组菌的发酵培养第47-48 页
  · 亲和层析第48-50 页
    · pH的摸索第48-49 页
    · 亲和层析第49-50 页
  · 酶切MBP_rADTZ融合蛋白释放rADTZ第50-51 页
  · 复性第51-61 页
    · 各种促折叠物质对复性的影响第51-58 页
    · 复性条件的优化第58-60 页
    · 氧化还原条件对复性的影响第60-61 页
    · 复性小结第61 页
  · 复性产物的分离纯化第61-64 页
    · 复性产物的Phenyl Sepharose 6 Fast Flow疏水柱层析第61-62 页
    · 复性产物的Superose~(TM) 12 10/300 GL分子筛层析第62-64 页
  · 复性后rADTZ二级结构的圆二色性分析第64-65 页
  · 复性后rADT分子间二硫键的分析第65-67 页
  · rADTZ活性中心与金属离子的分析第67-69 页
    · rADTZ与锌离子的分析第67 页
    · rADTZ与铜离子的分析第67-69 页
第五章 讨论与分析第69-78 页
  · 亲和层析纯化优化第69 页
  · 复性条件的筛选第69-74 页
    · 变性剂第69 页
    · 变性剂的去除第69-70 页
    · 复性环境第70-72 页
    · EDTA与金属离子第72 页
    · 氧化还原环境第72-74 页
  · rADTZ活性检测第74 页
  · rADTZ蛋白的分离纯化第74-75 页
  · rADTZ蛋白二级结构的圆二色性分析第75 页
  · 分子间二硫键的分析第75-76 页
  · rADTZ金属离子结合性及结构的分析第76-77 页
  · 关于ADTZ活性中心的讨论第77-78 页
第六章 小结与展望第78-80 页
致谢第80-81 页
参考文献第81-94 页
攻读硕士学位期间发表论文第94-95 页
致谢第95页

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