论文目录 | |
| 致谢 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| abstract | 第9-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-25页 |
| 1.1 鸡肉发展现状及营养成分和价值 | 第16-18页 |
| 1.2 黄山黑鸡的营养价值 | 第18-19页 |
| 1.3 脂肪酸对鸡肉品质的影响 | 第19-20页 |
| 1.4 转录组测序在畜禽重要经济性状鉴定中的应用 | 第20-21页 |
| 1.5 本研究的目的及技术路线 | 第21-25页 |
| 1.5.1 研究背景及目的意义 | 第21-23页 |
| 1.5.2 研究技术路线 | 第23-24页 |
| 1.5.3 研究内容 | 第24-25页 |
| 第二章 黄山黑鸡肌肉组织转录组测序与生物信息学分析 | 第25-47页 |
| 2.1 引言 | 第25-26页 |
| 2.2 实验材料 | 第26-27页 |
| 2.2.1 主要试剂 | 第26页 |
| 2.2.2 主要仪器设备 | 第26-27页 |
| 2.3 实验方法 | 第27-30页 |
| 2.3.1 样品采集 | 第27页 |
| 2.3.2 脂肪酸的提取及甲酯化 | 第27页 |
| 2.3.3 脂肪酸的组成成分检测 | 第27页 |
| 2.3.4 测序文库的构建 | 第27-28页 |
| 2.3.5 质量控制 | 第28页 |
| 2.3.6 参考序列比对分析 | 第28页 |
| 2.3.7 基因表达水平分析 | 第28页 |
| 2.3.8 差异表达分析 | 第28页 |
| 2.3.9 差异基因GO富集分析和KEGG富集分析 | 第28-29页 |
| 2.3.10 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)验证 | 第29-30页 |
| 2.4 结果与分析 | 第30-43页 |
| 2.4.1 样品脂肪酸组成比较 | 第30-31页 |
| 2.4.2 RNA提取与质量检测 | 第31-34页 |
| 2.4.3 测序质量控制 | 第34-36页 |
| 2.4.4 参考序列比对分析 | 第36-39页 |
| 2.4.5 差异表达基因筛选 | 第39-41页 |
| 2.4.6 差异基因GO富集分析 | 第41-42页 |
| 2.4.7 差异基因KEGG富集分析 | 第42页 |
| 2.4.8 实时荧光定量PCR对不同差异基因的验证 | 第42-43页 |
| 2.5 讨论 | 第43-45页 |
| 2.6 本章小结 | 第45-47页 |
| 第三章 FADS2基因的功能验证 | 第47-63页 |
| 3.1 引言 | 第47-48页 |
| 3.2 实验材料 | 第48-49页 |
| 3.2.1 主要试剂 | 第48-49页 |
| 3.2.2 主要仪器设备 | 第49页 |
| 3.3 实验方法 | 第49-52页 |
| 3.3.1 鸡前脂肪细胞的分离及培养 | 第49-50页 |
| 3.3.2 鸡FADS2基因的siRNA干扰序列的设计与合成 | 第50页 |
| 3.3.3 慢病毒载体构建和包装、扩增 | 第50-51页 |
| 3.3.4 慢病毒滴度的测定 | 第51页 |
| 3.3.5 慢病毒感染鸡前脂肪细胞最佳感染复数MOI的测定 | 第51页 |
| 3.3.6 实时荧光定量PCR检测FADS2基因的RNA干扰效率 | 第51页 |
| 3.3.7 FADS2siRNA侵染实验 | 第51-52页 |
| 3.3.8 脂肪细胞RNA的提取 | 第52页 |
| 3.3.9 实时荧光定量PCR检测FADS2基因的RNA干扰效率 | 第52页 |
| 3.3.10 基因表达检测 | 第52页 |
| 3.4 结果与分析 | 第52-60页 |
| 3.4.1 鸡前脂肪细胞的形态观察 | 第52-53页 |
| 3.4.2 鸡前脂肪细胞的生长曲线 | 第53页 |
| 3.4.3 慢病毒滴度结果 | 第53-54页 |
| 3.4.4 最佳感染复数MOI的探索 | 第54-55页 |
| 3.4.5 FADS2基因干扰效率检测 | 第55-57页 |
| 3.4.6 慢病毒侵染鸡前脂肪细胞结果 | 第57页 |
| 3.4.7 通过荧光定量检测慢病毒的干扰效率 | 第57页 |
| 3.4.8 FADS2siRNA对鸡脂肪细胞中ELOVL5等基因表达的影响 | 第57-60页 |
| 3.5 讨论 | 第60-61页 |
| 3.6 本章小结 | 第61-63页 |
| 第四章 结论与展望 | 第63-65页 |
| 4.1 结论 | 第63页 |
| 4.2 论文的创新点 | 第63-64页 |
| 4.3 存在的问题及展望 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-72页 |
| 附录 | 第72-75页 |
| 附录1 TRIZOL法提取样品中总RNA及质量检测 | 第72-73页 |
| 附录2 转录组测序文库的构建 | 第73页 |
| 附录3 HIFI-MMLVCDNA第一链合成试剂盒反转录 | 第73-74页 |
| 附录4 鸡前脂肪细胞的分离 | 第74-75页 |
| 攻读硕士学位期间的学术活动及成果情况 | 第75-76页 |
