论文目录 | |
致谢 | 第1-8页 |
摘要 | 第8-10页 |
abstract | 第10-19页 |
第一章 前言 | 第19-29页 |
1.1 番茄果实概况及采后贮藏的研究进展 | 第19-22页 |
1.1.1 番茄果实概述 | 第19页 |
1.1.2 果实贮藏过程中的生理生化变化 | 第19-21页 |
1.1.3 番茄果实采后贮藏的研究进展 | 第21-22页 |
1.2 硫化氢(H_2S)的研究现状 | 第22-24页 |
1.2.1 H_2S的理化性质 | 第22页 |
1.2.2 H_2S在植物体内的产生通路及生理功能 | 第22-24页 |
1.3 乙烯的研究进展 | 第24-26页 |
1.3.1 乙烯的生物学功能 | 第24-25页 |
1.3.2 乙烯的生物合成及对采后果实贮藏品质的影响 | 第25-26页 |
1.4 半胱氨酸合成酶的研究现状 | 第26-27页 |
1.4.1 半胱氨酸合成酶的生理功能 | 第26-27页 |
1.4.2 半胱氨酸合成酶的研究进展 | 第27页 |
1.5 课题研究的目的、意义及内容 | 第27-29页 |
1.5.1 课题研究的目的和意义 | 第27-28页 |
1.5.2 课题研究的主要内容 | 第28-29页 |
第二章 H_2S和C_2H_4对番茄果实贮藏期及营养物质代谢的影响 | 第29-44页 |
2.1 实验材料、试剂及仪器 | 第29-30页 |
2.1.1 实验材料 | 第29页 |
2.1.2 主要试剂 | 第29页 |
2.1.3 主要仪器 | 第29-30页 |
2.2 实验方法 | 第30-34页 |
2.2.1 材料处理及样品制备 | 第30页 |
2.2.2 番茄表皮色泽变化的测定 | 第30页 |
2.2.3 叶绿素和类胡萝卜素的测定 | 第30-31页 |
2.2.4 类黄酮、总酚和花青素的测定 | 第31页 |
2.2.5 抗坏血酸、可滴定酸和还原糖含量的测定 | 第31-32页 |
2.2.6 可溶性蛋白质和淀粉含量的测定 | 第32页 |
2.2.7 蛋白水解酶和淀粉酶活性的测定 | 第32-33页 |
2.2.8 半胱氨酸合成酶的活性测定 | 第33页 |
2.2.9 半胱氨酸合成酶相关基因的表达量测定 | 第33-34页 |
2.3 结果与讨论 | 第34-43页 |
2.3.1 H_2S和C_2H_4对番茄果实贮藏过程中色泽的影响 | 第34-35页 |
2.3.2 H_2S和C_2H_4对番茄贮藏过程中叶绿素和类胡萝卜素的影响 | 第35-36页 |
2.3.3 H_2S和C_2H_4对番茄贮藏过程中类黄酮、总酚和花青素的影响 | 第36-38页 |
2.3.4 H_2S和C_2H_4对番茄贮藏过程中抗坏血酸、可滴定酸和还原糖含量的影响 | 第38-39页 |
2.3.5 H_2S和C_2H_4对番茄贮藏过程中可溶性蛋白质和淀粉含量的影响 | 第39-40页 |
2.3.6 H_2S和C_2H_4对番茄贮藏过程中蛋白水解酶活性和淀粉酶活性的影响 | 第40-41页 |
2.3.7 H_2S和C_2H_4对番茄中半胱氨酸合成酶活性的影响 | 第41页 |
2.3.8 H_2S和C_2H_4对番茄中半胱氨酸合成酶相关基因表达的影响 | 第41-42页 |
2.3.9 番茄中各指标变化与半胱氨酸合成酶相关基因表达量的相关性分析 | 第42-43页 |
2.4 本章小结 | 第43-44页 |
第三章 番茄OASTL的生物信息学分析及亚细胞定位 | 第44-57页 |
3.1 实验材料、试剂及仪器 | 第44页 |
3.1.1 实验材料 | 第44页 |
3.1.2 主要试剂 | 第44页 |
3.1.3 主要仪器设备 | 第44页 |
3.2 实验方法 | 第44-48页 |
3.2.1 番茄半胱氨酸合成酶基因OASTL的生物信息学分析 | 第44-45页 |
3.2.2 番茄GFP载体的构建 | 第45-46页 |
3.2.3 农杆菌转化及在烟草中的表达 | 第46-47页 |
3.2.4 OASTL基因在番茄不同组织中的表达 | 第47-48页 |
3.3 结果与分析 | 第48-56页 |
3.3.1 番茄OASTL基因进化树、蛋白结构域及Motif分析 | 第48-50页 |
3.3.2 目的片段的扩增及纯化 | 第50页 |
3.3.3 GFP菌株活化及质粒提取 | 第50-51页 |
3.3.4 GFP质粒的酶切与纯化 | 第51页 |
3.3.5 大肠杆菌的转化与鉴定 | 第51-52页 |
3.3.6 农杆菌的转化与鉴定 | 第52-53页 |
3.3.7 OASTL在烟草中的亚细胞定位分析 | 第53-54页 |
3.3.8 OASTL基因在番茄不同组织中的表达水平 | 第54-56页 |
3.4 本章小结 | 第56-57页 |
第四章 番茄OASTL基因缺失体和过表达体的构建、转化及功能分析 | 第57-86页 |
4.1 实验材料、试剂及仪器 | 第57-58页 |
4.1.1 实验材料 | 第57页 |
4.1.2 主要试剂 | 第57页 |
4.1.3 主要仪器 | 第57-58页 |
4.2 实验方法 | 第58-66页 |
4.2.1 OASTL1、OASTL2基因Crispr-Cas9敲除载体的构建 | 第58-60页 |
4.2.2 OASTL1、OASTL2基因过表达载体的构建 | 第60-63页 |
4.2.3 番茄的植物组织培养技术 | 第63-64页 |
4.2.4 番茄缺失植株与过表达植株的鉴定 | 第64-65页 |
4.2.5 番茄过表达植株OASTL基因的表达量测定 | 第65页 |
4.2.6 番茄过表达植株的愈伤在重金属镉胁迫下的生长情况 | 第65-66页 |
4.3 结果与讨论 | 第66-84页 |
4.3.1 OASTL1、OASTL2基因缺失载体的获得 | 第66-73页 |
4.3.2 OASTL1、OASTL2基因过表达载体的获得 | 第73-78页 |
4.3.3 番茄的植物组织培养 | 第78-79页 |
4.3.4 番茄缺失植株和过表达植株的获得 | 第79-82页 |
4.3.5 番茄过表达植株OASTL基因表达量的变化 | 第82-84页 |
4.3.6 重金属镉的逆境胁迫对番茄愈伤的影响 | 第84页 |
4.4 本章小结 | 第84-86页 |
参考文献 | 第86-94页 |
攻读硕士学位期间的学术活动及成果情况 | 第94-95页 |